《ⅱ微生物發(fā)酵產(chǎn)酶》ppt課件

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1、Ⅱ微生物發(fā)酵產(chǎn)酶一生產(chǎn)工藝流程1.收集篩選菌種:2.菌種保藏：3.細胞活化：4.根據(jù)菌種選培養(yǎng)基擴大培養(yǎng):5.發(fā)酵管理:發(fā)酵※工藝流程：收集篩選菌種→菌種保藏→細胞活化→擴大培養(yǎng)→發(fā)酵管理擴大培養(yǎng)收集篩選菌種發(fā)酵管理：條件與控制菌種保藏細胞活化※收集、篩選菌種1.用錢購買菌種2.收集土樣篩選菌種⑴收集土樣⑵初篩：單菌落培養(yǎng)，用透明圈法選出產(chǎn)目的酶的微生物（使用鑒定培養(yǎng)基）⑶復(fù)篩：單菌落培養(yǎng)，選出符合優(yōu)良菌種要求的菌落（使用選擇培養(yǎng)基）單菌落培養(yǎng)優(yōu)良菌種要求與常用菌種透明圈法※菌種保藏菌種保藏方法

2、：(1)斜面培養(yǎng)法(2)(3)(4)(5)(6)※細胞活化保藏的菌種通常以芽孢形式存在（保藏時營養(yǎng)缺乏），需放入營養(yǎng)充足的營養(yǎng)環(huán)境中活化：芽孢→營養(yǎng)細胞※擴大培養(yǎng)1.定義：根據(jù)菌種特點配制培養(yǎng)基，使菌種大量繁殖用于發(fā)酵2.方法：種子罐培養(yǎng)；實驗室培養(yǎng)（工業(yè)生產(chǎn)）（實驗室）3.目的：使菌種大量繁殖，用于發(fā)酵※培養(yǎng)基配制：碳源、氮源、生長因子、無機鹽、水※C／N：碳源：糖→加碳源加C/N→酸性→利于菌種保存（作保存培養(yǎng)基）氮源：有機、無機→加氮源減C/N→堿性→利于酶制劑生產(chǎn)（產(chǎn)酶需N元素）※產(chǎn)酶微

3、生物1.菌種要求：繁殖力強(繁殖周期短)產(chǎn)酶穩(wěn)定，產(chǎn)酶能力強安全(不用病菌)利于發(fā)酵管理(易于發(fā)酵)2.常用產(chǎn)酶微生物：略※單菌落培養(yǎng)法：稀釋涂平板，長單菌落，易于分離※透明圈法：例如:明膠作培養(yǎng)基可鑒別出產(chǎn)蛋白酶的菌落(明膠是蛋白質(zhì),蛋白酶可分解明膠)CaCO3作培養(yǎng)基可鑒別出產(chǎn)酸菌落(產(chǎn)生的酸可分解CaCO3,形成透明圈)※發(fā)酵管理1.溫度、PH：最適生長溫度、PH與最適產(chǎn)酶溫度、PH不同,要實時監(jiān)控、調(diào)節(jié)溫度、PH溫度：0-10oC;PH:酶活力范圍內(nèi)，防酶變性※調(diào)PH方法：CaCO3（備

4、用堿）磷酸緩沖液：維持PH穩(wěn)定調(diào)C/N：只工業(yè)上適用，C/N↑→酸，C/N↓→堿2.增大溶氧量：(1)攪拌，使大氣泡變?yōu)楹芏嘈馀?2)加大通入氧氣量3.氣泡：⑴產(chǎn)生：攪拌發(fā)酵液增大溶氧量⑵危害：①阻礙CO2排出，使PH減小，使發(fā)酵液變酸，影響微生物生長、產(chǎn)酶②氣泡過多會使菌液漫出，造成菌種污染⑶消除方法：機械消泡、化學(xué)試劑消泡、表面活性劑消泡4.濕度⑴開始：低⑵后來：高5.提高酶產(chǎn)量的方法①加誘導(dǎo)物②減阻遏物③轉(zhuǎn)基因（獲得產(chǎn)酶能力強的微生物去產(chǎn)酶）④加表面活性劑⑤加產(chǎn)酶促進劑微生物生長與產(chǎn)酶模

5、式※微生物生長與產(chǎn)酶模式微生物生長模式：調(diào)整期、對數(shù)期、平衡期、衰亡期產(chǎn)酶模式：1.同步合成型：調(diào)整期始產(chǎn)酶，平衡期始停產(chǎn)2.中期合成型：對數(shù)期始產(chǎn)酶，平衡期始停產(chǎn)3.滯后合成型：平衡期始產(chǎn)酶，衰退期始停產(chǎn)4.延續(xù)合成型：調(diào)整期始產(chǎn)酶，衰退期始停產(chǎn)※提高產(chǎn)酶能力的方法（變?yōu)檠永m(xù)合成型）1.非調(diào)整期始產(chǎn)酶（中期、滯后）：有營養(yǎng)物阻遏效應(yīng)，減少營養(yǎng)阻遏物濃度2.平衡期始停產(chǎn)（同步、中期）：mRNA不穩(wěn)水解，降溫使mRNA穩(wěn)