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《細胞培養(yǎng)的應用和培養(yǎng)細胞的特性及條》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、細胞培養(yǎng)為什么要做細胞培養(yǎng)？細胞在體外生長的基本條件培養(yǎng)細胞的特性主要講3方面問題：細胞培養(yǎng)的有益應用細胞培養(yǎng)應用前景：（1）保存優(yōu)良的動物品種（2）拯救瀕臨滅絕的珍惜動物（3）利用克隆動物工廠生產(chǎn)蛋白質(zhì)藥物（4）利用克隆技術(shù)生產(chǎn)人體器官類型動物細胞培養(yǎng)的產(chǎn)物人疫苗小兒麻痹癥、狂犬、風疹、腦炎、乙肝表面抗原、皰疹、某些癌癥動物疫苗口蹄疫、雞瘟病、豬霍亂、馬腦炎、牛痢疾、犬瘟、草魚出血病酶尿激酶、細胞色素P450、胃蛋白酶、胰蛋白酶、纖維蛋白溶酶原激活劑、膠原酶、酪氨酸脫羧酶激素促紅細胞生成素、促間質(zhì)細胞激素、絨毛膜促性腺激素、促黃體激素、促濾泡激素、生長激素免疫調(diào)節(jié)因子白細胞活化
2、因子、轉(zhuǎn)移抑制因子、胸腺素、白細胞介素、干擾素、血清胸腺因子、巨噬細胞毒力因子、β-細胞生長因子動物細胞規(guī)?；囵B(yǎng)與現(xiàn)代醫(yī)藥治療性抗體抗體藥物培養(yǎng)條件下細胞的特性離體培養(yǎng)的動物細胞可分為：貼壁依賴型(anchorage-dependent)非貼壁依賴型(anchorage-independent)兼性貼壁細胞1）貼壁依賴型簡稱為貼壁細胞，包括成纖維細胞型、上皮細胞型、游走細胞型、多形性細胞型。2）非貼壁依賴型也稱懸浮型，這類細胞培養(yǎng)時不貼附于支持物上，可在培養(yǎng)液中懸浮生長。來源于血液、淋巴組織的細胞，許多腫瘤細胞等均屬于此類，細胞一般呈圓形。3）兼性貼壁細胞動物細胞培養(yǎng)中，有些細
3、胞呈現(xiàn)雙重性，既可以貼壁生長，也可以懸浮培養(yǎng)，如中國地鼠卵巢細胞、小鼠L929細胞等。培養(yǎng)條件下動物細胞的生理特點1）動物細胞的分裂周期長動物細胞分裂周期一般為12～48小時，它不僅隨細胞種屬的不同而有差異，即使是同一種屬，不同部位的細胞所需的時間也不同。此外，培養(yǎng)條件如溫度、pH、培養(yǎng)基的成分等，也會影響分裂周期的長短。2）接觸抑制(contactinhibition)現(xiàn)象除少數(shù)懸浮培養(yǎng)細胞外，大多數(shù)正常二倍體細胞的生長都需要在一定的基質(zhì)（如玻璃、塑料等）上貼附，伸展后才能增殖。當細胞在基質(zhì)上分裂增殖，逐漸匯合成片即每個細胞與其周圍的細胞相互接觸時，細胞就停止增殖，即細胞密度不
4、再增加，這一現(xiàn)象稱之為接觸抑制或密度依賴抑制現(xiàn)象。動物細胞的環(huán)境敏感性動物細胞與微生物和植物細胞相比，其培養(yǎng)難度要大一些，其主要原因是動物細胞只有細胞膜，而沒有細胞壁的保護。動物相比對培養(yǎng)環(huán)境十分敏感，一切影響細胞膜變形的因素都會影響動物細胞存活。動物細胞培養(yǎng)對營養(yǎng)條件的要求也十分復雜。1.動物細胞培養(yǎng)的環(huán)境要求1）無污染環(huán)境2）溫度昆蟲細胞培養(yǎng)溫度一般是25～28℃哺乳動物細胞的培養(yǎng)溫度一般是37℃。總體上講，動物細胞忍受低溫的能力比忍受高溫的能力強。如哺乳動物細胞在45℃下只能存活1小時，但在25℃條件下仍然能慢速生長，并維持長時間不死，甚至在4℃下數(shù)小時后，再置于適宜溫度下
5、細胞仍然可以正常生長。液氮凍存。3）pH動物細胞培養(yǎng)適宜的pH一般在7.2-7.4，低于6.8或高于7.6都不利于細胞生長，嚴重時會導致細胞死亡。培養(yǎng)細胞對pH的要求因培養(yǎng)時間長短有關(guān)，一般原代細胞要求較嚴格，而永久細胞系對pH具有較強的忍耐性。4）氣體環(huán)境及溶氧一般細胞在培養(yǎng)初期要求較低的溶氧水平，而在對數(shù)生長期或培養(yǎng)后期，對溶氧水平要求增加，如果供氧不足，將導致細胞缺氧而死亡。除了氧氣供應外，還應注意培養(yǎng)基的氧氣和CO2的平衡。5）滲透壓動物細胞培養(yǎng)滲透壓包括兩個方面的問題：培養(yǎng)基的滲透壓維持細胞體內(nèi)的滲透壓維持大多數(shù)動物細胞對滲透壓的忍耐程度較強，只要培養(yǎng)基的滲透壓變化不是
6、很劇烈，一般對培養(yǎng)物不會造成致命傷害。動物細胞滲透壓的維持一般采用平衡鹽溶液。謝謝！
