GBT18646-2002 動物布每氏菌病診斷技術(shù) - 下載地址.pdf

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1、GB/T18646一2002前言布魯氏菌病(簡稱布病)是由布魯氏菌屬細菌致人畜共患的傳染病-一變態(tài)反應(yīng)性疾病，世界范圍性威脅人類健康和影響畜牧業(yè)發(fā)展。動物布病主要由羊種布魯氏菌、牛種布魯氏菌和豬種布魯氏菌感染羊、牛和豬等動物呈急性或慢性經(jīng)過。另外，是人布病的主要傳染來源。其臨床主要特征是母畜流產(chǎn)、乳腺炎、不育和各種組織(如攀丸、關(guān)節(jié))的炎癥。世界動物衛(wèi)生組織[WorldOrganizationforAnimalHealth(英),OfficeIntentionaldesEpizootic(法),OIE〕將布病列為B類重要傳染病，中華人民共和國傳染病防治法將布病列為乙類傳染病。為確診

2、動物布病要盡可能分離病原體，并鑒定其種和生物型，但方法復(fù)雜，需要的時間長，而且陽性檢出率低。因此布病最常用的檢疫技術(shù)是血清學(xué)診斷。目前我國常用的血清學(xué)方法有虎紅平板凝集試驗、試管凝集試驗和補體結(jié)合試驗以及乳牛全乳環(huán)狀試驗。本標準的編制參考了OIE的《診斷試驗和疫苗標準手冊》有關(guān)章節(jié)，澳大利亞動物疾病診斷技術(shù)標準有關(guān)布病診斷部分和聯(lián)合國糧食與農(nóng)業(yè)組織(FAO)和世界衛(wèi)生組織(WHO)聯(lián)合布魯氏菌病專家委員會推薦的《布魯氏菌病實驗室技術(shù)》(第三版)。本標準適用于對動物布病的檢疫及監(jiān)測。本標準的附錄A,附錄B、附錄C、附錄D是標準的附錄，附錄E、附錄F是提示的附錄。本標準由中華人民共和國

3、農(nóng)業(yè)部提出。本標準由全國動物檢疫標準化技術(shù)委員會歸口。本標準起草單位:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所。本標準主要起草人:白文彬。中華人民共和國國家標準GB/T18646-2002動物布每氏菌病診斷技術(shù)Diagnostictechniquesforanimalbrucellosis1范圍本標準規(guī)定了動物布魯氏菌病的診斷技術(shù)。本標準規(guī)定的虎紅平板凝集試驗、乳牛全乳環(huán)狀試驗適用于家畜布病田間篩選試驗和乳牛場布病的監(jiān)測及診斷泌乳母牛布病的初篩試驗;試管凝集試驗和補體結(jié)合試驗適用于診斷羊種、牛種、和豬種布病感染的家畜本標準規(guī)定的試管凝集試驗不適用于犬種和綿羊副攀種布病感染家畜的檢疫。2虎紅平

4、板凝集試驗2-，材料準備2.1.1抗原、標準陽性血清、陰性血清由制標單位提供，按說明書使用。2.1.2受檢血清應(yīng)新鮮，無明顯蛋白凝塊，無溶血和無腐敗氣味。2.1.3潔凈的玻璃板，其上劃分成4cm'的方格。2.1.4吸管或分裝器，適于滴加。.03ml。2.1.5牙簽或火柴桿，供攪拌用。2.2操作方法2.2.1將玻璃板上各格標記受檢血清號，然后加相應(yīng)血清。.03mL,2.2.2在受檢血清旁滴加抗原0.03mL.2.2.3用牙簽類小棒攪動血清和抗原使之混合。2.2.4每次試驗應(yīng)設(shè)陰、陽性血清對照。2.3判定2.3.1在陰、陽性血清對照成立的條件下，方可對被檢血清進行判定。2.3.2受檢血

5、清在4min內(nèi)出現(xiàn)肉眼可見凝集現(xiàn)象者判為陽性(十)，無凝集現(xiàn)象，呈均勻粉紅色者判為陰性(一)。3乳牛布病全乳環(huán)狀試驗3.1材料準備3.1.1布病全乳環(huán)狀抗原由制標單位提供，按說明書使用。3.1.2乳樣3.1.2.1受檢乳樣須為新鮮的全乳。3.1.2.2采乳樣時應(yīng)將母畜的乳房用溫水洗凈、擦干，然后將乳液擠人潔凈的器皿中。中華人民共和國國家質(zhì)f監(jiān)督檢驗檢疫總局2002-02-19批準2002一05一01AM標準分享網(wǎng)www.bzfxw.com免費下載GB/T18646-20023.1.2-3采集的乳樣夏季時應(yīng)于當日內(nèi)檢查;保存于2℃時，了d內(nèi)仍可使用3.2操作方法3.2.1取乳樣1ml

6、-，加于滅菌凝集試驗管內(nèi)。3.2.2取充分振蕩混合均勻的全乳環(huán)狀抗原1滴(約50kL)加人乳樣中充分混勻3.2.3置37C-38'C水浴中60min3.2.4加溫后取出試管勿使振蕩，立即進行判定3.3判定標準分為:a)強陽性反應(yīng)(十++)，乳柱上層乳脂形成明顯紅色的環(huán)帶，乳柱白色，臨界分明;b)陽性反應(yīng)(++)，乳脂層的環(huán)帶呈紅色，但不顯著，乳柱略帶顏色;c)弱陽性反應(yīng)(+)，乳脂層的環(huán)帶顏色較淺，但比乳柱顏色略深;d)疑似反應(yīng)(士)，乳脂層的環(huán)帶顏色不明顯，與乳柱分界不清，乳柱不褪色;e)陰性反應(yīng)(一)，乳柱上層無任何變化，乳柱顏色均勻。4動物布病試管凝集試驗4.1材料準備4.，

7、.1稀釋液0.5環(huán)石炭酸生理鹽水。檢驗羊血清時用含。.5%石炭酸的10%鹽溶液，如果血清稀釋用含0.5石炭酸的10%鹽溶液，抗原的稀釋亦用含0.5%石炭酸的10YD鹽溶液.4.1.2抗原、陽性血清和陰性血清由制標單位提供，按說明書使用。4.1.3凝集試驗管(三分管)、試管架、吸管及溫箱。4-2操作方法4.2.1按常規(guī)方法采血分離血清。4.2.2運送和保存血清樣品時防止凍結(jié)和受熱，以免影響凝集價。若3d內(nèi)不能送到實驗室，按每9MI.血清加1m1.5%石炭酸生理鹽水(徐徐