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《測定大鼠血漿中苦參堿和苦參堿藥代動(dòng)力學(xué)及其應(yīng)用》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、通過高效液相色譜測定大鼠血漿中苦參堿和苦參堿藥代動(dòng)力學(xué)及其應(yīng)用(翻譯)摘要一個(gè)簡單的高效液和色譜(HPLC)方法描述了大鼠血漿中苦參堿的測定。血漿是用乙月青除去蛋白并含有一個(gè)內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)(非那西?。?,并從水層分離,加入氯化鈉??鄥A提取到高產(chǎn)乙膳層,采用反相高效液相色譜法測定(柱:YMC?包消耗臭氧物質(zhì),5微米,150M.6毫米,內(nèi)徑;洗脫液:乙膳、醋酸鍍、三乙胺緩沖液0.2摩爾毎升(體積比是35:65:0.035)和紫外檢測(220納米)??鄥A的定量限為200納克血漿每臺升,冋收率大于89%。該的線性從0.5到50微克每毫升。變化小于6%。該方法用于確定血漿中苦參堿時(shí)間曲線下口服或注射苦參堿
2、注射水溶液從中苦參堿到達(dá)體循環(huán)的分?jǐn)?shù)是由一個(gè)首次反褶積法估計(jì)。2003Elsevier科學(xué)BV公司保留所有權(quán)利關(guān)鍵詞:苦參堿;HPLC-紫外;大鼠血漿。中國人用草藥治療各種疾病已經(jīng)有兒千兒年的歷史??喽棺訛榭喽棺覬SophomalopecuroidesL.)的干燥根是一種被廣泛使用的中草藥。它具有解熱、抗炎鎮(zhèn)痛的作用,它被用于治療急性或慢性的腸胃炎[1]。其中最主要的成分是苦參堿[2](化學(xué)結(jié)構(gòu)如圖1),它被證明有保護(hù)脂多糖從而降低肝損傷的作用[3],和抑制小鼠水浸應(yīng)激性潰瘍[4]??鄥A也已證明具有消炎作用[5],對細(xì)胞的增殖抑制和誘導(dǎo)K?562細(xì)胞的分化有顯著影響[6],并具有抗心律失常
3、作用[7]。對苦參堿的各種藥理作用的發(fā)現(xiàn)己被很好的描述,以及他們的在體內(nèi)的代謝[8,9]o然而,這些藥代動(dòng)力學(xué)研究已經(jīng)只集屮于靜脈注射后的過程。盡管苦豆子通常是口服,也缺乏有關(guān)的信息在何種程度上被吸收后苦參堿口服。由于大多數(shù)中約是以粗提取物的形式在臨床使用,在胃腸道的活性成分的吸收率會被用來作為適合于臨床應(yīng)用的參考。用于測定血漿屮苦參堿有幾種方法在文獻(xiàn)屮被描述。這包括氣相色譜法[10]高效液相色譜法(HPLC)[9]。但是,這些方法要么缺乏敏感性要么樣品預(yù)處理過于復(fù)雜。此外,他們并不適用于大鼠血漿中苦參堿定量,因?yàn)橹挥猩倭康难嚎梢缘玫皆诮o定的藥代動(dòng)力學(xué)研究的時(shí)間間隔進(jìn)行采樣。要獲取苦參堿,
4、藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)可用簡便,靈敏的高效液相色譜法用于測定大鼠血漿中苦參堿口服后或水溶液注射苦參堿注射從中開發(fā)出苦參堿分?jǐn)?shù)。圖1:苦參堿的結(jié)構(gòu)式2.實(shí)驗(yàn)2」化學(xué)品和試劑苦參堿是分析純,作為分析和藥物作為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)成績,從中醫(yī)控制研究所(北京,屮國)和鹽池制約廠(寧夏,中國),分別購買使用。乙膳和水的HPLC級的關(guān)東化工有限責(zé)任公司(東京,日本)獲得。醋酸鍍和非那西丁(特級)均購自和光純化學(xué)工業(yè)有限公司(日木大阪)。三乙胺(特級)購自SigmaAldrich公司(東京,日木)。2.2高效液和色譜系統(tǒng)HPLC分析進(jìn)行了使用島津的LC-6A條高效液相色譜系統(tǒng)(日本京都),與社民黨,紫外河見光檢測器和SIL
5、-6B型自動(dòng)注射器配備。阿YMC-包消耗臭氧層物質(zhì)的列,4.6/150毫米,5毫米(YMC有限公司,京都,日木)的使用。流動(dòng)和:乙猜、醋酸鞍、三乙胺緩沖液0.2摩爾毎升(體積比是35:65:0.035),過濾通過0.45毫米的微孔過濾和脫氣前使用。流速為0.9毫升分鐘。檢測在220nm波長在室溫溫度進(jìn)行。進(jìn)樣量為20微升。2.3動(dòng)物和采集血樣雄性Wistar應(yīng)變大鼠(180-210克)從SLC的公司(日本靜岡縣)購買,喂12小時(shí)水,實(shí)驗(yàn)前禁食。聚乙烯管(內(nèi)徑0.28毫米,外徑061毫米)插入到右邊的老鼠而動(dòng)物用乙瞇麻醉下股動(dòng)脈。老鼠被安置在一個(gè)籠了里,并允許I■専爾曼從麻醉中恢復(fù)超過1小時(shí)苦
6、參堿水溶液當(dāng)時(shí)的老鼠口服在40毫克毎千克劑量或注射進(jìn)入血液,通過空心管在40或4毫克毎千克單劑量。血液樣木(0.25毫升)是經(jīng)由空心管在0,10,20,30,45,60,90,120,180,240,360和480min后口服,或0,5,10,20,30,45,60,90,120,180,240分鐘后推注。在毎次采樣,減少血容量進(jìn)行了補(bǔ)充與同等體積的生理鹽水1毫升含100IU毎毫升的肝素。各組大鼠在給藥后1小吋補(bǔ)充生理鹽水。2.4血漿樣品制備毎次收集血液樣本,立即被轉(zhuǎn)移到一個(gè)肝素離心管中,在4°C時(shí)8000轉(zhuǎn)離心5分鐘(Himac的CT13R,日立,日木)。由此產(chǎn)生的離心產(chǎn)物(0.1毫升)與
7、0.2毫升含有非那西丁乙月青(5毫克每毫升)混合30秒作為標(biāo)準(zhǔn)品。經(jīng)過15分鐘的混合物離心8000轉(zhuǎn)在4°C2分鐘沉淀分離蛋片。上清液轉(zhuǎn)移到1.5毫升含氯化鈉50?60毫克的試管中?;鞈乙夯旌暇鶆颍覝胤胖?分鐘。經(jīng)過渦流混合,在8000轉(zhuǎn)在4°C離心5分鐘,取上層清夜20微升,通過有機(jī)0.45毫米微孔過濾器過濾毫升直接注入色譜法。同一樣站的處理用于等離子回收率和精密度測定。(C)圖2:大鼠血漿中苦參堿核磁共