薄層掃描分析修改

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1、實習(xí)名稱薄層掃描分析喻彥林7/23/20211序-薄層色譜(TLC)發(fā)展歷史1938年俄國人首先實現(xiàn)了在氧化鋁薄層上分離一種天然藥物。1965年德國化學(xué)家出版了“薄層色譜法”一書,這一技術(shù)日趨成熟。70年代中后期發(fā)展了高效薄層色譜。80年代以后發(fā)展了薄層色譜光密度掃描儀,和各步操作的儀器化,并實現(xiàn)了計算機化。方法特點:設(shè)備簡單,分析速度快,分離效率高,結(jié)果直觀,定性和半定量7/23/20212一、薄層掃描定量分析原理:用一束長寬可調(diào)的一定波長和強度的光照射到薄層斑點上進行整個斑點掃描,用儀器測量通過斑點或被斑點反射的光束強度的變化達(dá)到定量

2、的目的。斑點掃描積分面積—物質(zhì)含量7/23/20213二、薄層掃描儀組成:主機:光源:可見光源鎢燈400-800nm紫外光源氘燈200-400nm熒光激發(fā)光源分光器:光柵200-800nm檢測器:光電倍增管PMTCCD/CMOS直接成像光源選擇桿變換數(shù)據(jù)處理及信號輸出7/23/20214薄層色譜掃描儀測光形式單波長單光束單波長雙光束光單色器檢測器光波長1波長2檢測器斬波器光單色器分光鏡檢測器檢測器雙波長雙光束7/23/20215光單色器檢測器7/23/20216透射法光源與檢測器在薄層板上下兩側(cè)。光源發(fā)出的光經(jīng)單色器成為一定波長的單色光,

3、光束照到薄層斑點上,測量透射光強度。實際應(yīng)用少光源單色器薄層色譜掃描儀測定方法7/23/20217反射法光源與檢測器在薄層板同側(cè)。光源發(fā)出的光經(jīng)單色器成為一定波長的單色光,光束照到薄層斑點上,部分被薄層吸收,部分經(jīng)過漫反射又折回表面成為反射光,測量反射光強度,得到反射光譜。反射吸收度與物質(zhì)含量有確定關(guān)系,可進行定量。光源單色器7/23/20218薄層色譜掃描儀掃描方式直線掃描——用一束比斑點寬度略寬的光作一個方向的等速掃描鋸齒掃描——用微小的正方形光速在對斑點進行Y軸等速直線掃描的同時對斑點進行X軸等輻往復(fù)掃描,光束運動軌跡呈鋸齒形。直線

4、掃描鋸齒掃描輪廓曲線積分曲線7/23/20219斑點斑點ABCABCCAB對于不規(guī)則斑點,兩種掃描結(jié)果不一樣。同一斑點從A、B、C三個不同方向掃描,鋸齒掃描所得積分值變動小,而直線掃描所得積分值變動大。7/23/202110定性﹡斑點的Rf值﹡斑點的光譜掃描:利用薄層掃描儀顏色斑點:鎢燈400-780nm無色有紫外吸收斑點:氘燈200-400nm定量:直接定量-薄層掃描法外標(biāo)法、內(nèi)標(biāo)法、歸一化法A1aC10AxCx外標(biāo)一點法歸一化法7/23/2021117/23/202112應(yīng)用醫(yī)藥方面:中藥成分的分析生物樣品分析環(huán)境有害物質(zhì)分析食品分析

5、物證鑒定*毒物分析和法醫(yī)化學(xué):麻醉藥、巴比妥、大麻、鴉片生物堿等*文檢:墨水配方和書寫時間*其他物證7/23/202113三、分析樣品:1、藍(lán)色圓珠筆油墨染料成分分析計算各染料斑點的Rf值和百分含量儀器測定參數(shù)測光形式:單波長單光束 測定波長:580nm測定方法:反射法 掃描方式:鋸齒掃描 掃描原點—溶劑前沿7/23/202114不同種類藍(lán)色圓珠筆油樣品薄層色譜圖7/23/202115案例1:利用真實文書變造(藍(lán)色圓珠筆)7/23/202116案例3:利用真實文書變造(換頁)7/23/2021172、大紅粉染料的定量分析測定未知濃度的大紅

6、粉染料儀器測定參數(shù)測光形式:單波長單光束 測定波長:510nm測定方法:反射法 掃描方式:鋸齒掃描 只掃描大紅粉紅色斑點A1aC10AxCx外標(biāo)一點法7/23/202118A1aC10AxCx外標(biāo)一點法7/23/2021197/23/2021207/23/2021217/23/202122完7/23/202123

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