b型煙粉虱抗吡蟲啉品系的交互抗性譜及抗性生化機(jī)理

b型煙粉虱抗吡蟲啉品系的交互抗性譜及抗性生化機(jī)理

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1、中文摘要B型煙粉虱抗吡蟲啉品系的交互抗性譜及抗性生化機(jī)理摘要煙粉虱Bemisiatabaci(Gcnnadius)是一種取食植物汁液的重要農(nóng)業(yè)害蟲,同時(shí)也是許多植物病毒最重要的傳播媒介之一,現(xiàn)已成為世界性分布,為害經(jīng)濟(jì)作物的主要害蟲.截至目前為止,至少確定26種煙粉虱生物型,包括B型、Q型和非B/Q型,其中B生物型煙粉虱因其寄主范圍廣,適應(yīng)性圣妄,繁殖力旺盛,對(duì)許多常規(guī)殺蟲劑都產(chǎn)生了抗性而為害最為嚴(yán)重.以吡蟲啉為代表的新煙堿類殺蟲劑是防治煙粉虱的主要藥劑,持續(xù)、大量、大面積的使用對(duì)靶標(biāo)害蟲形成強(qiáng)大的選擇壓力.靶標(biāo)害蟲對(duì)吡蟲啉的抗性風(fēng)險(xiǎn)成為吡蟲啉

2、使用壽命的限制性因子.本文就B型煙粉虱對(duì)吡蟲啉的抗性機(jī)理及其交互抗性進(jìn)行了研究,將為開發(fā)煙粉虱吡蟲啉抗性的檢測(cè)方法及制定抗性治理措施提供一定的理論依據(jù).1.B型煙粉虱抗吡蟲啉品系的篩選及交互抗性根據(jù)煙粉虱mtDNACOI基因的序列,采自南京的煙粉虱NJ品系被鑒定為B型煙粉虱.用吡蟲啉對(duì)煙粉虱NJ品系進(jìn)行了室內(nèi)抗·巨篩選,獲得了對(duì)吡蟲啉具有256倍抗性的高抗品系(NJ.Imi).煙粉虱NJ.Imi抗性品系對(duì)新煙堿類殺蟲荊噻蟲嗪和啶蟲脒分別具有98和49倍的高水平交互抗性,對(duì)殺蟲單和多殺菌素分別具有6.7和3.7倍的低水平交互抗性,而對(duì)阿維菌素和氟

3、氰菊酯沒有交互抗性.利用診斷劑量法對(duì)北京、南京、武漢和廣東四地的田間煙粉虱種群進(jìn)行了抗性監(jiān)測(cè),發(fā)現(xiàn)田間煙粉虱種群已對(duì)吡蟲啉產(chǎn)生了低至中水平抗性.2.B型煙粉虱抗吡蟲啉品系的抗性生化機(jī)制通過活體增效試驗(yàn)和解毒代謝酶活性測(cè)定,初步研究了煙粉虱NJ.Imi抗性品系對(duì)吡蟲啉的抗性機(jī)理.酯酶抑制劑DEF和谷胱甘肽.s.轉(zhuǎn)移酶抑制荊DEM對(duì)吡蟲啉在抗性品系和敏感品系中增效作用的差異均不顯著,多功能氧化酶抑制劑PBO對(duì)吡蟲啉NJ.Imi抗性品系具有2.49倍的增效作用,而對(duì)NJ敏感品系沒有增效作用.解毒酶活性測(cè)定表明,谷胱甘肽.s.轉(zhuǎn)移酶活性在抗,感品系中無

4、顯著差異,酯酶在抗性品系中較敏感品系降低了L4倍,而細(xì)胞色素P450單加氧酶在抗性品系中鮑活性較敏感品系上升了綺2.2倍.由此可見,細(xì)胞色素P450單加氧酶在B型煙耪虱時(shí)吮女噼抗性產(chǎn)生過程中可能起著一定作用.盡管NJ.1mi和NJ品系膜蛋白靶標(biāo)與【Ⅻ.Epibatidine的結(jié)合能力無明顯差異,但不能排除靶標(biāo)不敏感性參與抗性的可能性.B型煙粉虱抗毗蟲啉品系的交互抗性譜及抗性生化機(jī)理3.煙粉虱乙酰膽堿受體亞基的克隆與分析煙堿型乙酰膽堿受體(NicotinicAcetylcholineReceptor,nAchg)是昆蟲體內(nèi)重要的一類殺蟲劑作用靶標(biāo)

5、.本文利用RT-RCR和RACE技術(shù),對(duì)煙粉虱nAChRa亞基的一個(gè)基因進(jìn)行了克隆和序列分析.獲得的煙粉虱nAChRa亞基基因的全長(zhǎng)cDNA序列舍有2090bp,其開放閱讀框編碼564個(gè)氨基酸.根據(jù)該基因編碼的氨基酸序列與其它昆蟲乙酰膽堿受體a亞基氨基酸序列之間的相似性,將該基因命名為Bta4(GenBank注冊(cè)號(hào)EF590120).Bta4編碼的a亞基含有2個(gè)結(jié)構(gòu)域(N端的胞外結(jié)構(gòu)域和跨膜結(jié)構(gòu)域)。N端的胞外結(jié)構(gòu)域含有2個(gè)相鄰的半胱氨酸(a亞基特征序列)、15個(gè)氨基酸構(gòu)成的半胱氨酸環(huán)和乙酰膽堿結(jié)合區(qū).本研究對(duì)于揭示煙粉虱潛在的對(duì)新煙堿類殺蟲劑

6、靶標(biāo)抗性的分子機(jī)理具有重要意義.關(guān)鍵詞:煙粉虱;吡蟲啉;抗性機(jī)理;交互抗性;乙酰膽堿受體;Bta4亞基Ⅱ英文摘要CROSSRESISTANCESPECTRUMANDBIOCHEMICALMECHANlSMSOFRESISTANCETOIMIDACLOPRIDINB.TYPEBE朋YS五4Z鋤i4C,ThewhiteflyBemisiatabaci(Gennadius)isoneofthemostdamagingpeststhroughoutthetropicalandsubtropicalregionsoftheworld.Itisanimpo

7、rtantagriculturalpestthatfeedsinthephloemandalsothemostimportantvectorofseveralplantvirusgenera.Sofar,atleast26biotypeshasbeencharacterized,includingB—type,Q·typeandnon-B/Q·type,inwhichtheBtype且tabaciisthemostseriousagriculturalpestduetoitsparticularlypolyphagous,highlyfecun

8、d,stronelyadaptabilityandresistancetomanyinsecticides.Imidacloprid,thefirst

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