Tune軟件操作說明-Q-Exactive series

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1、1打開Tune軟件2界面及圖標(biāo)介紹（1）ON、Standby、Off，啟動(dòng)掃描時(shí)選擇On，待機(jī)選擇是Standby（2）打開tune方法（3）保存tune方法（4）六通閥的切換，只用a，1是waste，2是inject（5）質(zhì)譜注射泵，可以更改流速（6）三個(gè)燈都為綠色是正常狀態(tài)，第1燈：指示儀器通訊是否正常，第2個(gè)燈：指示儀器硬件狀態(tài)是否正常，第3個(gè)燈：指示儀器的性能狀態(tài)是否正常。典型的變黃原因有：校正過期。建議重新校正，校正完成之后可恢復(fù)綠色。將鼠標(biāo)放在上述的燈上即可顯示變黃的信息提示。3Instrumentcontrol各項(xiàng)參數(shù)3.1Scanpara

2、meters（1）Scantype：分為FullMS-SIM和AIF-MS/MS；FullMS：一級(jí)全掃，要求Lastmass≤15*firstmassSIM：當(dāng)fullmass的掃描范圍小于50個(gè)質(zhì)量數(shù)時(shí)，自動(dòng)變?yōu)镾IM。AIF：所有的離子全部碎裂，沒有母離子的選擇性，現(xiàn)在軟件無法識(shí)別二級(jí)子離子是由哪個(gè)母離子產(chǎn)生的，所以暫時(shí)不用這種方法。MS/MS：設(shè)定center/width，或者scanrange，這里設(shè)置的是母離子的質(zhì)荷比；（2）Scanrange：參考scantype，scantype中設(shè)置的是fullscan時(shí)，這里設(shè)置全掃的質(zhì)荷比范圍，如果

3、scantype中選擇的是MS/MS，此處應(yīng)設(shè)置子離子的掃描范圍。（3）Fragmentation：分為sourceCID和NCE，一般做fullscan時(shí)此項(xiàng)是關(guān)閉狀態(tài)SourceCID：源內(nèi)裂解，主要用于打開二聚體等非共價(jià)結(jié)合的鍵。NCE：歸一化碰撞能量。儀器校正后，每個(gè)特定質(zhì)荷比的離子都有一個(gè)對(duì)應(yīng)將其打碎的能量值，做小分子設(shè)為35；（4）Resolution：分辨率代表儀器將不同質(zhì)量數(shù)離子分開的能力，QE可以達(dá)到14萬，最低分辨率為1750。QE中一級(jí)掃描的分辨率一般設(shè)為70,000，二級(jí)分辨率設(shè)為17,500。（5）Polarity：正負(fù)掃描模式

4、的選擇。（6）Microscan：將幾張質(zhì)譜圖疊加，一般用1。（7）Lockmass：內(nèi)標(biāo)校正時(shí)使用，常用m/z455.120025作為內(nèi)標(biāo)物。（8）AGCtarget：Orbitrap容納的離子數(shù)量，因?yàn)檫M(jìn)入Orbitrap中的離子都帶電荷，進(jìn)入之后會(huì)相互干擾（這種現(xiàn)象稱之為空間電荷效應(yīng)），離子數(shù)量過多，會(huì)影響質(zhì)荷比準(zhǔn)65確度，通常一級(jí)掃描設(shè)為1*10，二級(jí)設(shè)為1*10。（9）Maxinjectiontime：MS1：100ms，MS2：50ms。（10）Hotlink：選中之后，修改參數(shù)只需要點(diǎn)擊enter鍵就可以，如果不選中，點(diǎn)擊enter之后還要

5、再點(diǎn)擊apply，才能使用修改后的參數(shù)。3.2HESIsource：源區(qū)參數(shù)決定數(shù)據(jù)好壞、質(zhì)量，離子信號(hào)強(qiáng)度；（1）Sheathgasflowrate：幫助溶劑氣化，校正時(shí)用5~15，做樣品時(shí)設(shè)為35~45；（2）Auxgasflowrate：氣簾氣，校正一般為0，做樣品時(shí)設(shè)為10~15；（3）Sweepgasflowrate：吹掃氣，流動(dòng)相中加入不揮發(fā)性鹽時(shí)開啟此路氣體，設(shè)為1~2；（4）Sprayvoltage：正離子模式3.5~4.5KV、負(fù)離子模式2.5~3.5KV（5）Spraycurrent：ESI噴霧離子所形成的電流反饋值，不能設(shè)置；換AP

6、CI源后該處電會(huì)自動(dòng)變?yōu)镈ischargeCurrent，可設(shè)置；（6）Capillarytemperature：流速越高，溫度越高，校正時(shí)，設(shè)為275℃，當(dāng)鏈接色譜柱時(shí)，設(shè)為320℃；（7）S-lensRFlevel：一般為50~60（8）Heatertemperature：離子源的加熱溫度，當(dāng)鏈接色譜柱時(shí)，設(shè)為200~300℃，校正時(shí)設(shè)置為0。（9）SourceAutoDefaults：根據(jù)流速自動(dòng)調(diào)節(jié)參數(shù)，自動(dòng)調(diào)節(jié)的氣體流速偏大，一般不建議使用。3.3實(shí)時(shí)采集數(shù)據(jù)Acquisition（1）Fileinuse：上一次采集的數(shù)據(jù)（2）Destinat

7、ionfile：這次采集的數(shù)據(jù)保存路徑及名稱（3）Acquisitiontime：連續(xù)采集（4）Onstart：兩個(gè)選項(xiàng)，don`twait：點(diǎn)擊start就開始記錄；waitforcontactclosure：需要有觸發(fā)開始的信號(hào)（比方液相色譜的自動(dòng)進(jìn)樣器等）才開始數(shù)據(jù)采集；4Tune（1）TIC：對(duì)一級(jí)譜圖中總離子流圖進(jìn)行調(diào)諧，得到最佳的tune參數(shù)。（（（2））））Mass：對(duì)某一特定質(zhì)荷比的離子進(jìn)行調(diào)諧。（（（3））））點(diǎn)擊Tune，自動(dòng)調(diào)節(jié)離子源參數(shù)，使質(zhì)譜信號(hào)最強(qiáng)。（（（4））））HCDMode：開啟HCD對(duì)二級(jí)碎片進(jìn)行調(diào)諧優(yōu)化。5MassT

8、races（1）ScanNCE和ScanCE一般是輸入感興趣的碎片離子的m/z，