水浸提靈芝多糖條件研究

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1、西安源森生物實(shí)驗(yàn)室對(duì)水浸提靈芝多糖的條件研究靈芝提取物靈芝多糖作為西安源森生物的主打產(chǎn)品之一，以其調(diào)節(jié)人體免疫、抗衰老的特色優(yōu)勢(shì)受到了保健詁市場(chǎng)的廣泛認(rèn)可。它的常用提取方法包括水、稀酸、稀堿以及二甲基亞磯等多種溶劑類(lèi)型，經(jīng)過(guò)研究，西安源森生物實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn)，水浸提法在操作成本、靈芝多糖活性保持方面具有相當(dāng)優(yōu)勢(shì)。為了研究確定水浸提靈芝多糖的適宜條件，西安源森牛?物實(shí)驗(yàn)室在本次實(shí)驗(yàn)中，采用苯酚■硫酸檢測(cè)法對(duì)靈芝多糖的含量進(jìn)行測(cè)定，對(duì)水浸提靈芝多糖的吋間、溫度、固液比例三因素進(jìn)行試驗(yàn)和正交試驗(yàn)：一.實(shí)驗(yàn)材料與方法1.材料、儀器和試劑材料：赤芝，來(lái)自西安源森生物實(shí)驗(yàn)室儀器：752-

2、C紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、分析天平、植物粉碎機(jī)試劑:標(biāo)準(zhǔn)衙萄糖、苯酚、硫酸。2.實(shí)驗(yàn)方法（1）多糖含量測(cè)定方法：采用苯酚?硫酸法。（2）材料處理：取一定量干燥的靈芝碎片，經(jīng)植物粉碎機(jī)破碎后，加入一定比例水在一定溫度下浸提一定時(shí)間，得到靈芝多糊的水浸提液。（3）標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備：収標(biāo)準(zhǔn)衙萄糖20mg于500mL容量瓶中，加水定容至刻度。（4）標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作：精確量取標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液0.0、0.4、0.6、0.8、1.0、2.2、1.4、1.6及1.8mL,各以水補(bǔ)至2.0mL,然后分別加入6%苯酚1.0mL＞濃硫酸5.0mL,靜置10min,搖勻，室溫放置20min后于490nm

3、處測(cè)定吸光度。橫坐標(biāo)為多糖微克數(shù)，縱坐標(biāo)為光密度值，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖1。圖1標(biāo)準(zhǔn)曲線（5）靈芝多糖提取液稀釋至適當(dāng)倍數(shù)后，精密吸取1.0mL,按照標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法測(cè)定吸光度，計(jì)算得靈芝多糊含量。二.實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果一：不同浸提時(shí)間對(duì)靈芝多糖提取的影響浸提時(shí)間對(duì)靈芝多糖提取的影響如圖2所示：0.07654ooO???ooO32oO??oO2.52.01.5時(shí)間/h1.00.5圖2不同浸提時(shí)間對(duì)多糖提取吊的影響如圖2所示，在浸提時(shí)間到2h時(shí)，提取量基木不再變化，說(shuō)明此時(shí)提取液中的靈芝多糖己經(jīng)達(dá)到平衡，因此浸提時(shí)間2h時(shí)的捉取效果最好；從整體曲線走向來(lái)看，浸捉時(shí)間越長(zhǎng)，提収效果

4、越好，總至2h吋達(dá)到平衡。實(shí)驗(yàn)結(jié)果二：浸提料液比對(duì)靈芝多糖提取的影響料液比是指浸提時(shí)的加水量（圖3）：料液比圖3料液比對(duì)靈芝多糖提取笊的彫響如圖3所示，靈芝多糖溶出量隨著加水量的增加逐漸提高，但是當(dāng)加水量過(guò)大會(huì)給后續(xù)的濃縮操作帶來(lái)不便；以實(shí)際應(yīng)用為前捉，加水量應(yīng)該確定在靈芝多糖提取量趨于穩(wěn)定的節(jié)點(diǎn)（1：15）,因此料液的最佳比例應(yīng)為1：15o實(shí)驗(yàn)結(jié)果三：浸提溫度對(duì)靈芝多糖提取率的影響溫度的不斷升高，分子運(yùn)動(dòng)的速度越快,越易于靈芝多糖在水中溶出（圖4）：O?????ooooO択fx-UOIT60708090100浸提溫度/9圖4浸提溫度對(duì)靈芝多糖提取童的彫響（1）浸捉溫度

5、越髙，靈芝多糖的提取效果就越好；（2）在80?90°CZ間，靈芝多糖提取量的增加趨于平緩；（3）隨著浸提時(shí)間的延長(zhǎng)，浸提液會(huì)不斷減少，從而會(huì)影響靈芝多糖的提取最，并且溫度過(guò)高也會(huì)影響靈芝多糖的生物活性。因此，最適宜的靈芝多糖浸提溫度范圍應(yīng)該在80?90°C之間。實(shí)驗(yàn)結(jié)果四：正交試驗(yàn)為了確定浸提吋間、料液比例和浸提溫度對(duì)靈芝多糖提取效果的影響大小，西安源森生物對(duì)此三因素進(jìn)行了正交試驗(yàn)。因素水平表1：農(nóng)1正交試驗(yàn)因素水平表水平浸提溫度/9A浸提時(shí)間/hB料液比C1701.01:102801.51s153902.01:20正交試驗(yàn)結(jié)果以及數(shù)據(jù)分析見(jiàn)表2和表3所示:衣2正交試驗(yàn)

6、結(jié)果及其直觀分析衣試驗(yàn)號(hào)溫度A/X：時(shí)間B/h料液比CD多糖提取屋g/（1kg靈芝）1l(70>1(1.0)1(1s10>11.5121(70)2(1.5)2(1：15>22.1331(70)3(2.0)3(1:20)32.8642(X0)1(1.0)2(1:I5)34.2652(80)2(1.5)3(1:20)15.3662(80>3(2.0)1(1:10)25.2973(90>1(1.0)3(1:20)25.8183(90>2(1.5)1(1:10)36.3993(90>3(2.0)2(1s15)16.99K6.49611.58113.19013.86040.59

7、7Kt14.91113.88013.38)13.230心19.19015.13614.02613.507R12.6943.5550.8360.353衣3方差分忻衣變異來(lái)源自由度平方利方差FA262821.1631410.581.80*B236225.3618112.68C23380S.1616902.58D233734.8216867.41謀差e469960.1817490.05總和8F(0.1)=1.80從正交試驗(yàn)結(jié)果看出：（1）最佳提取條件為:A3B3C3,即浸提溫度-90°C浸提時(shí)間-2.0h料液比一1:20（2）由方差分析和直觀分