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《液質(zhì)聯(lián)用(HPLCMSMS)分析鑒定西地那非和他達拉非的補》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、國家藥品監(jiān)督管理局藥品檢驗補充檢驗方法和檢驗項目批準件批準件編號2006009中文名，具有補腎壯陽功效的中成藥劑型片劑.?丸劑、膠奏劑規(guī)格現(xiàn)執(zhí)行標準現(xiàn)行的國家藥品標準（中國藥典、局頒標準、部頒標準）申請單位中國藥品生物制品檢定所mit/t-zEr兄陽家食品藥品監(jiān)普管理局批準的補充檢驗方法和項目的補充檢驗方法與項目的實施規(guī)定本方法適用于具有補腎壯陽功效的中成藥中涉嫌非法添加西地那非、他達拉非的監(jiān)督檢驗。補充檢驗二00六年三月十四日方法與項目的批準液質(zhì)聯(lián)用（HPLC/MS/MS）分析鑒定西地那非和他達拉非的
2、補充檢驗方法【鑒別】取供試品適量，按照定性及含量測定項下方法試驗，若供試品HPLC色譜峰保留時間與西地那非或他達拉非對照品色譜峰一致，并且供試品該色譜峰液質(zhì)聯(lián)用的一級質(zhì)譜及二級質(zhì)譜均與相應(yīng)西地那非或他達拉非對照品一致，則確認供試品中含有西地那非或他達拉非?！径ㄐ约昂繙y定】本品定性分析采用液質(zhì)聯(lián)用法（HPLC/MS/MS）,見《中華人民共和國藥典2005年版二部》附錄IXJ;含量測定按照高效液相色譜法，見《中年人民共和國藥典2005年版二部》附錄VD。液質(zhì)聯(lián)用條件使用以十八烷基鍵合硅膠為填充劑的液相色譜
3、柱（柱頭加裝相同規(guī)格填料的預(yù)色譜柱），以0.01mol/L乙酸錢水溶液/乙睛/甲醇（35:10:55）為流切相，檢測波長為254nm,進樣量10pL,西地那非和他達拉非的理論塔板數(shù)均不小于2000,分離度大于1?5;質(zhì)譜裝配電噴霧電離源（ESI）,源電壓5KV,毛細管溫度275°C,毛細管電壓15V,鞘氣流速40arb;正負離子同時檢測，掃描方式采用全掃描一級質(zhì)譜、全掃描二級質(zhì)譜（MS/MS）,質(zhì)量采集范圍100?1000。對照品溶液的制備與測定分別精密稱取西地那非和他達拉非對照品適量（約5mg）,置于
4、50mL容量瓶中，加入上述流動相溶液適量，超聲10分鐘使之溶解，放冷至室溫，用流動相溶液定容至刻度混勻，將上述兩種溶液按照1：1的比例混合均勻作為貯備液。將該貯備溶液用流動相溶液稀釋制備系列標準溶液（濃度分別為50pg/mL.25pg/mL、lOpg/mL,5pg/mL,lMg/mL）,分別取10ML注入液相色譜儀，進行液質(zhì)聯(lián)用分析，記錄液相色譜圖及一級質(zhì)譜與二級質(zhì)譜圖,依據(jù)西地那非和他達拉非系列標準溶液濃度及液相色譜紫外檢測峰面積，建立擬合方程，計算相關(guān)系數(shù)（r值不小于0.99X供葉品溶液的制備與測定
5、若供試品為片劑，稱量后細致研磨粉碎，然后適量稱?。s300mg）加入50mL容量瓶中，先加入約45mL上述流動相溶液，超聲提取10分鐘，放冷至室溫，加入流動相溶液定容至刻度，混和均勻；若供試品為膠囊，取出內(nèi)容物細致研磨粉碎，然后適量稱取(約300mg)加入50111L容量瓶中，先加入約45mL±述流動相溶液，超聲提取lOmin,放冷至室溫，加入流動相溶液定容至刻度?混勻：若供試品為大蜜丸，稱量整個蜜丸的質(zhì)量，再將蜜丸粉碎成小顆粒，全部加入100譏容量瓶中，先加入約90譏上述流動相溶液，超聲溶解，直至溶液
6、中無大顆粒狀物質(zhì)，放冷至室溫，加入流動相溶液定容至刻度,混勻：供試品為口服液，量取10mL加入50mL容量瓶中，再加入約30mL甲醇超聲提取lOmin,放冷至室溫，加入乙購定容至刻度，超聲混勻，置于冰箱中冷藏過夜。上述樣品溶液經(jīng)過夜沉淀后取上層溶液適量，高速離心(不小于lOOOOrpm),取上清液用上述流動相溶液稀釋10-100倍，取10pL進行液質(zhì)聯(lián)用分析，記錄液相色譜圖及一級質(zhì)譜與二級質(zhì)譜圖。通過與對照品液相色譜圖及一級質(zhì)譜與二級質(zhì)譜圖的對比，確定供試品中是否含有西地那非(C22H3NO4S)或他達
7、打拉非(c22h19n3o4);通過液相色譜圖紫外吸收的積分峰面積，代入上述擬合方程，計算供試品中西地那非(C22H3oN604S)或他達拉非(C22H19N5O4)的重量百分含量。*附：西地那非和他達拉非結(jié)構(gòu)信息(1)中文名稱：西地那非英文名稱：SildenafilCAS登記號:139755-83-2474.20分子量：474.58(2)中文名稱：他達拉非英文名稱：TadalafilCAS登記號:171596-29-5結(jié)構(gòu)式：分子試：c22h19n3o4精確質(zhì)量：389.14分子量：389.40
