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1、淺談動物疫病診斷技術(shù)[摘要]隨著我國國際貿(mào)易的不斷增加,國內(nèi)畜牧業(yè)及其產(chǎn)詁的流通渠道也越來越廣,同時動物疫病的傳播機(jī)會和傳播途徑也逐漸增多,疫病的傳播速度也逐漸加快。山于動物重大疫病的發(fā)生,新的疫病也伴隨著出現(xiàn),以及人類的影響,使動物疫病的朝著多樣化的方向發(fā)展,對畜牧業(yè)帶來了很大的威脅。而如何準(zhǔn)確的診斷出動物疫病對動物疫病的防治工作冇非常大的作用。本文主要介紹動物疫病的診斷技術(shù),以期對動物疫病的診斷工作提供依據(jù)。[關(guān)鍵詞]動物疫病診斷技術(shù)[中圖分類號]S858[文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A[文章編號]1003-1650(2013)09-0181-01一、膠
2、體金免疫層析技術(shù)膠體金免疫層析技術(shù)是在膠體金標(biāo)記技術(shù)、層析技術(shù)、免疫檢測技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的新型免疫診斷動物疫病的技術(shù)。膠休金免疫層析技術(shù)(GICA)的工作原理是以條狀纖維層析材料為基礎(chǔ),利用毛細(xì)作用使樣品溶液在層析條上游動,并使樣品的待測物和層析材料上的抗原發(fā)牛相應(yīng)的免疫反應(yīng),在發(fā)生免疫反應(yīng)時,免疫復(fù)合物在層析材料上形成一定的區(qū)域,這個區(qū)域就是檢測帶,運(yùn)用可以用肉眼目測到的膠體金發(fā)生顯色反應(yīng),同時處于游離狀態(tài)的膠體金就會越過檢測帶,與結(jié)合的標(biāo)記物自動分離開來。GICA就是以膠體金的顯色特點(diǎn)為基礎(chǔ),結(jié)合免疫層析技術(shù)達(dá)到檢測疫病的目的,膠體金
3、與待測物會濃集到一起而發(fā)生顯色反應(yīng),從而觀察顯色帶的顏色而快速檢測岀結(jié)果。膠體金免疫層析技術(shù)成為廣泛使用的動物疫病診斷技術(shù),如在動物病毒病檢測、動物細(xì)菌病檢測、動物寄生蟲病檢測,水產(chǎn)動物疫病檢測等,其與其他動物疫病診斷技術(shù)相比,主要的特點(diǎn)是:一、檢測1的廣。GICA既可以檢測抗原,也可以檢測抗體,在動物疫病快速診斷和獸藥殘留快速診斷中應(yīng)用的最為廣泛。二、操作方便。GICA的操作步驟很簡單,不需要特殊的診斷儀器,且樣本不需要特殊處理,檢測的結(jié)果肉也可以觀察出來。三、速度快。一般只需5分鐘左右就可以得到檢測結(jié)果。四、靈敏。使用很少的抗原或抗體就可
4、以檢測出來。五、方便。試劑不受外界因素的影響且攜帶方便。六、經(jīng)濟(jì)實(shí)用且安全環(huán)保。二、基因芯片診斷技術(shù)基因芯片即DNA芯片或DNA微陣列,是將DNA片段按提前設(shè)計(jì)的方式固定在載體上,在一定條件下,與樣品的DNA片段進(jìn)行雜交,實(shí)現(xiàn)對樣品基因的含量和變異情況進(jìn)行快速檢測的方法?;蛐酒脑\斷方式主要有:一、同步檢測多種病原體。在病原微生物基因測序測定完成的基礎(chǔ)上,將代表每種微生物的特殊基因做出對應(yīng)的芯片,通過反轉(zhuǎn)錄可以檢測出樣本屮的病原體基因情況。二、同步檢測多個樣品。對同一病原體進(jìn)行檢測時,可以將對應(yīng)的基因芯片與多個樣品同時檢測,縮短檢測時間。三
5、、對病原體進(jìn)行分類。山于病原體會發(fā)生基因突變,而相同基因病毒不同株的雜交結(jié)果卻有差異,這就為不同類型的病原體的確定提供了依據(jù)。與傳統(tǒng)的檢測技術(shù)相比,基因芯片可以同時對多種樣品進(jìn)行檢測;不需要進(jìn)行免疫反應(yīng)就能對疫病檢測檢測,簡單方便,口具有較高的靈敏性和可靠性;能夠有效的檢測出病原體的耐藥性;使用自動化控制,對大規(guī)模推廣應(yīng)用冇很大的作用。同時,基因芯片可以作為動物疫病預(yù)測和診斷的標(biāo)準(zhǔn),提高了動物疫病診斷的效率,并可以檢測出疫病的類型、發(fā)病類型、發(fā)病程度等,為動物疫病的診斷提供幫助。三、PCR技術(shù)PCR技術(shù)即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),又被稱為體外擴(kuò)增技術(shù),
6、是以生物體內(nèi)的DNA能夠自主復(fù)制為基礎(chǔ)而設(shè)計(jì)的在生物體外對特點(diǎn)的DNA序列進(jìn)行快速擴(kuò)增的一種技術(shù)。PCR技術(shù)的主耍特點(diǎn)是操作簡單、速度快、敏感度高、特異性。山于每一種病原體都具有特殊的核酸序列,通過將核酸序列進(jìn)行分離并標(biāo)記,做出相應(yīng)的探針,與被檢測的DNA序列進(jìn)行對比,從而實(shí)現(xiàn)動物疫病的診斷。PCR技術(shù)目前主要應(yīng)用于基因擴(kuò)增、基因檢測、基因克隆、基因改造、遺傳分析等過程的檢測,它既可以檢測病原體,也可以對不同病原體進(jìn)行檢測,同時也可以對特殊病毒和細(xì)菌進(jìn)行檢測,應(yīng)用范圍非常廣。四、納米技術(shù)納米技術(shù)是在納米尺度的基礎(chǔ)上對物質(zhì)進(jìn)行研究、工業(yè)化,以及
7、利用納米尺度物質(zhì)進(jìn)行交叉研究的綜合性技術(shù)。隨著納米技術(shù)的發(fā)展,將納米技術(shù)應(yīng)用于動物疫病的診斷分析中,是納米技術(shù)的新發(fā)展。納米傳感器是利用納米材料制成的生物和化學(xué)傳感器,能夠?qū)Ω咧虏⌒詣游镆卟∵M(jìn)行早期診斷。納米傳感器可以利用不同病毒與抗休進(jìn)行結(jié)合時,電流有不同變化的特征來判斷病原體的類型,從而確定病毒,診斷出動物疫病。微流控技術(shù)即微流控全分析系統(tǒng),是利用微細(xì)加工技術(shù)在芯片上建立微反應(yīng)室、微管道等微功能元件,從而建立微流路系統(tǒng),在該系統(tǒng)屮加入樣品和反應(yīng)液后,在電場的作用下形成微流路,在芯片上產(chǎn)生反應(yīng),從而達(dá)到分析診斷動物疫病的目的。該技術(shù)與傳統(tǒng)的
8、檢測方法相比,操作更加簡單,反應(yīng)也更加靈敏,一且有很強(qiáng)的特異性。五、結(jié)語隨著科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,巫大動物疫病的診斷技術(shù)也冇了非常大的突破,新的診斷技術(shù)也不斷的成熟起