草莓苗木繁育技術(shù)規(guī)程（定稿）

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1、ICS65.020B61DB37山東省地方標(biāo)準(zhǔn)DB37/T××××—××××草莓苗木繁育技術(shù)規(guī)程Technicalregulotionsofseedlingsbreedingforstrawberry××××-××-××發(fā)布××××-××-××實施山東省市場監(jiān)督管理局發(fā)布DB37/T××××—××××前??言本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。本標(biāo)準(zhǔn)由山東省農(nóng)業(yè)農(nóng)村廳提出并組織實施。本標(biāo)準(zhǔn)由山東省農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：山東農(nóng)業(yè)工程學(xué)院、龍口市農(nóng)業(yè)局、濟南普朗特生物科技有限公司。本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：秦旭、范崇慧、崔剛、王猛、劉文寶、段曦、束靖、徐波、魯萌。7

2、DB37/T××××—××××草莓苗木繁育技術(shù)規(guī)程1　范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了草莓苗木繁育的品種與植株選擇、脫毒苗繁育、生產(chǎn)用苗繁育和生產(chǎn)檔案等。本標(biāo)準(zhǔn)適用于山東省內(nèi)草莓苗木繁育。2　規(guī)范性引用文件下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB/T8321（所有部分）　農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則NY/T496　肥料合理使用準(zhǔn)則　通則NY/T1276　農(nóng)藥安全使用規(guī)范　總則NY/T5010　無公害農(nóng)產(chǎn)品　種植業(yè)產(chǎn)地環(huán)境條件NY/T5105　無公害食品　草莓生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程3　品種與植株選擇3.1　品

3、種選擇選擇抗性強、品質(zhì)優(yōu)良草莓品種。促成栽培選擇休眠短的品種。3.2　植株選擇選擇健康草莓植株，種苗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)為有三片以上新葉，根須發(fā)達(dá)，無病蟲害。4　脫毒苗繁育4.1　繁育流程包括培養(yǎng)室培養(yǎng)和溫室馴化移栽兩個階段。4.2　培養(yǎng)室培養(yǎng)4.2.1　培養(yǎng)室設(shè)置4.2.1.1　配藥室配備冰箱、實驗臺、天平、恒溫培養(yǎng)箱、加熱器、pH計、蒸餾水制備器、三角瓶、培養(yǎng)皿、量筒、燒杯、容量瓶等儀器設(shè)備。4.2.1.2　洗滌室7DB37/T××××—××××配備洗瓶池、洗瓶機、純水發(fā)生器等。1.1.1.1　滅菌室配備高壓滅菌鍋等設(shè)備。1.1.1.2　更衣室用于操作人員更衣，放置無菌操作服。1.1.1.3　冷

4、凝室用于存儲培養(yǎng)基。1.1.1.4　接種室用于操作人員接種操作，放置超凈工作臺、雙目顯微鏡、臭氧發(fā)生器等滅菌儀器、鑷子、剪刀、接種刀設(shè)備。1.1.1.5　培養(yǎng)室用于組培苗培養(yǎng)，放置多層培養(yǎng)架，室內(nèi)保持在20℃～25℃，空氣相對濕度保持在50%～60%，采用日光燈、LED燈等補充光照，培養(yǎng)室內(nèi)每日光照12h～14h，光照強度2000lx～3000lx。1.1.2　熱處理將選好草莓植株放入39℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱或人工氣候箱內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，光照模擬自然光，待長出匍匐莖作為外植體。1.1.3　莖尖誘導(dǎo)培養(yǎng)1.1.3.1　外植體清洗洗滌劑清洗2min～3min，再用吐溫清洗2min～3min，清洗過程

5、中不停搖晃，以便清洗充分；清洗過后用流水沖洗30min～40min。1.1.3.2　外植體消毒在超凈工作臺上將外植體置于無菌瓶中；用75%酒精浸泡30s，過程中不斷搖晃，消毒均勻徹底；無菌水沖洗4～5遍；用1‰的HgCL浸泡3min，過程中不斷搖晃，消毒均勻徹底；無菌水沖洗4～5遍。1.1.3.3　培養(yǎng)基制作基本培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基。將加熱溶化的培養(yǎng)基分裝在100ml三角瓶或其它培養(yǎng)容器中，在121℃高壓滅菌20分鐘。莖尖分化培養(yǎng)基和增殖繼代培養(yǎng)基添加6-芐氨基腺嘌呤（6-BA）0.2mg·L-1～0.5mg·L-1，赤霉素（GA3）0.1mg·L-1～0.5mg·L-1，吲哚丁酸（IBA

6、）0～0.02mg·L-1；生根培養(yǎng)基附加6-芐氨基腺嘌呤（6-BA）0.1mg·L-1～0.2mg·L-1，吲哚丁酸（IBA）0.02mg·L-1～0.1mg·L-1。1.1.3.4　莖尖剝離在雙目解剖鏡下，用解剖針將0.3mm～0.5mm的生長點完整取下，然后將其接入配制好的培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng)。1.1.3.5　莖尖培養(yǎng)7DB37/T××××—××××接種后的玻璃瓶放在培養(yǎng)室中培養(yǎng)。環(huán)境條件同培養(yǎng)室要求。培養(yǎng)大約2個月，草莓莖尖可長成完整植株，此后進(jìn)行增殖繼代培養(yǎng)。1.1.1　病毒檢測組培苗要進(jìn)行病毒檢測，每個組培無性系抽取1%的樣品進(jìn)行草莓斑駁病毒（SMoV）、草莓輕型黃邊病毒（SMYEV

7、）、草莓鑲脈病毒（SVBV）及草莓皺縮病毒（SCrV）檢測，檢測采用酶聯(lián)免疫法（ELISA）、PCR、分子標(biāo)記法進(jìn)行。檢測無病毒后繼續(xù)增殖繼代培養(yǎng)。1.1.2　增殖繼代培養(yǎng)培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基+6-芐氨基腺嘌呤（6-BA）0.05mg/L+吲哚丁酸（IBA）0.01mg/L+糖25g/L。在超凈工作臺上用鑷子、剪刀將其分隔成3～4株在一起的小芽叢，再放入新培養(yǎng)基瓶中培養(yǎng)，每瓶3～4個芽叢，每代周期大約30d～40d，最好不超過兩代，繼