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1、直接抗人球蛋白實驗陽性和免疫溶血性貧血抗球蛋白試驗-檢測IgG通過抗人球蛋白抗體的特異性橋連作用，促進紅細胞的凝集?？煞譃橹苯雍烷g接抗球蛋白試驗。直接抗球蛋白試驗檢查受檢者紅細胞在機體內是否被抗體致敏產生直抗陽性的條件自身免疫溶血性貧血溶血性輸血反應新生兒溶血病間接抗球蛋白試驗證實紅細胞在體外被抗體結合的試驗是檢查血清中IgG抗體特異性或紅細胞抗原的重要手段可用于未知抗體的檢出與確認交叉配合試驗確認抗原間接抗球蛋白試驗步驟1：致敏步驟2：洗滌步驟3：加入抗人球蛋白試劑（AHG）增強介質可以增強反應性和減少孵育時間LISS電解質增加溶液的介電常數，減弱了抗原抗體的靜電作用。降低離
2、子強度可以顯著增加抗原抗體結合率Polybrene堿性高分子物質，有效中和紅細胞表面負電荷，降低zeta電位，縮短紅細胞之間的距離PeG極強的親水性，減少紅細胞與抗體周圍的水分22％BovinealbuminEnzymes增強介質柱凝集（Columnagglutination）固相技術（Solid-phasetechnology）RedbloodcellspanelPlasmaorserumScreenDiluentNanoLysAnti-HumanGlobulin(AHG)復合方法抗體篩選方法1.DispensingH1H2H3ScreenNanoLysDiluent60μl
3、of12μlof60μlof15μlofScreenserumorNanoLysHemascreenDiluentplasmaScreenLys1,2,32.Incubation20’at37°C3.ShakeandMagnetizeinthesametime抗體篩選方法MAGNETMAGNETMAGNETMAGNETDAT陽性血液標本的收集EDTA抗凝血提供紅細胞DAT測定，定型，洗脫，自身吸收不抗凝血提供血清抗體篩選，抗體鑒定DAT陽性血清學研究多特異性抗球蛋白，抗IgG，抗C3測定附著在紅細胞上的免疫球蛋白的類型血清抗體篩選與鑒定自身抗體，同種抗體自身＋同種抗體放散試驗確
4、認附著抗體的特異性直抗（IgG）陽性，而血清與洗脫液皆無反應需進一步研究：藥物處理細胞，A和B細胞，酶處理細胞紅細胞鑒定定型ABO/Rh，磷酸氯奎放散，收集網織紅細胞DATIgG，C3?放散陰性：A和B細胞，酶處理，藥物處理細胞陽性：同種抗體，自身抗體，同種＋自身自身吸收血清抗體鑒定陽性自身抗體溫抗體，冷抗體同種抗體特異性鑒定自身吸收鑒定同種抗體陰性IgG抗A，抗B抗體酶處理細胞藥物依賴抗體抗體放散方法方法用途要點Luifreeze-thawABOHDFN快速；紅細胞用量少；其它抗體難放散Heat(560C)ABOHDFN；容易；IgG同種和自身IgM凝集抗體抗體難放散酸放散試
5、劑盒溫自身和同種抗體容易；當高效價的抗體存在時放散液有假陽性洋地黃皂苷酸溫自身和同種抗體洗滌消耗時間乙醚放散溫自身和同種抗體紅細胞疾病紅細胞增多紅細胞減少紅細胞生成減少紅細胞破壞過多（溶血性貧血）紅細胞丟失過多溶血性貧血紅細胞內在缺陷遺傳性紅細胞增多癥紅細胞酶缺乏的貧血珠蛋白生成障礙性貧血異常血紅蛋白病陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥紅細胞外來因素免疫溶血性貧血機械性溶血性貧血其它因素引起的溶血性貧血免疫溶血性貧血的分類自身免疫溶血性貧血（AIHA）WarmAIHA(WAIHA)ColdAgglutininSyndrone(CAS)Mixed-typeAIHAParoxysmalCol
6、dHemoglobinura(PCH)DAT-negativeAIHA同種免疫溶血性貧血HemolyticTransfusionReactionHemolyticDiseaseoftheFetusandNewborn(HDFN)藥物誘發(fā)的免疫溶血性貧血Drug-dependentDrug-independent自身免疫溶血性貧血的血清學特征WAIHACASMixed-PCHtypeAIHADATIgGC3onlyIgG+C3C3onlyIgG+C3C3C3免疫抗體IgGIgMIgG,IgMIgG類型放散液IgG抗體沒有反應IgG抗體沒有反應IAT；在20C，IgM凝集抗體，Ig
7、GIAT-反應在DLT試驗中血清35%未凝集4C效價>1000抗體和IgM凝集IgG雙相溶血(60%)抗體廣范圍反應；多通常為抗I通常未知抗P特異性種特異性報道溫抗體型自身免疫溶血性貧血(WAIHA)發(fā)病率1/80000，女性比男性高，年齡多數>40病因分類網狀內皮細胞腫瘤慢性淋巴瘤;霍奇金病;非霍奇金淋巴瘤病膠原病系統(tǒng)性紅斑狼瘡;類風濕性關節(jié)炎等免疫性疾病免疫缺陷綜合癥;低球蛋白血癥等胃腸道疾病某些良性腫瘤WAIHA發(fā)病機制免疫調節(jié)紊亂?免疫器官對自身紅細胞失去識別能力?紅細胞膜損傷，改變
