基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究

基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究

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1、藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)課藥理教研室實(shí)驗(yàn)課程簡(jiǎn)介實(shí)驗(yàn)課程安排共18學(xué)時(shí)(1)實(shí)驗(yàn)基本技能(2)嗎啡鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)(5)藥物對(duì)家兔尿量的影響(6)傳出神經(jīng)藥物對(duì)家兔血壓的影響(4)藥物對(duì)家兔離體腸平滑肌的作用(3)藥物抗炎實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)課程學(xué)習(xí)要求實(shí)驗(yàn)前實(shí)驗(yàn)中實(shí)驗(yàn)后1.預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo),明確實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵?,充分了解?shí)驗(yàn)方法2.進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室,必須穿白大衣.3.檢查實(shí)驗(yàn)器材1.根據(jù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容進(jìn)行小組內(nèi)分工2.嚴(yán)格、準(zhǔn)確地按照指導(dǎo)中的實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作。3.仔細(xì)、真實(shí)的記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。1.死亡動(dòng)物放在指定地點(diǎn);存活動(dòng)物放入籠內(nèi)。2.將器材洗凈擦

2、干,放回原處3.每小組輪流負(fù)責(zé)搞好實(shí)驗(yàn)室內(nèi)衛(wèi)生。實(shí)驗(yàn)課程學(xué)習(xí)目的DBCA鞏固藥理學(xué)基本理論學(xué)習(xí)基本的實(shí)驗(yàn)方法培養(yǎng)實(shí)事求是的學(xué)習(xí)作風(fēng)培養(yǎng)動(dòng)手能力、科研能力基本實(shí)驗(yàn)操作不同給藥途徑的藥物對(duì)小鼠睡眠時(shí)間的影響藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?)掌握小鼠給藥的基本方法。2)比較不同給藥途徑藥物起效的時(shí)間快慢。實(shí)驗(yàn)原理:不同的給藥途徑的藥物起效時(shí)間不相同。1實(shí)驗(yàn)?zāi)康募霸韺?shí)驗(yàn)動(dòng)物:小鼠實(shí)驗(yàn)藥物:1%戊巴比妥鈉2主要實(shí)驗(yàn)材料3稱重、分組腹腔給藥皮 下 給 藥灌胃給藥(0.1ml/10g)小鼠翻正反射消失時(shí)翻正反射再次恢復(fù)時(shí)

3、間主要實(shí)驗(yàn)過程1小鼠基本捉拿、固定方法2小鼠基本給藥方法實(shí)驗(yàn)基本技能右手提起鼠尾,左手拇指和食指捏住雙耳及頭部皮膚,無名指、小指和掌心夾其背部皮膚及尾部,便可將小鼠完全固定。如圖-1。單手捉持,用拇指和食指抓住小鼠尾巴,用小指、無名指和手掌壓住尾根部,再用騰出的拇指、食指及中指抓住鼠雙耳及頭部皮膚而固定。如圖-2。圖1圖2注意事項(xiàng):小鼠固定方法注意事項(xiàng):1.取背部及后腿皮下,注射時(shí)用左手拇指及食指輕輕捏起皮膚,右手持注射器將針頭刺入,固定后即進(jìn)行注射。皮下注射注意事項(xiàng):1、針頭刺入部位不宜太接近上腹部或

4、太深,以免刺破內(nèi)臟。針頭與腹腔的角度不宜太小,避免刺入皮下。2、使用針頭不宜太粗,避免藥液注射后從注射孔流出。注射后可用棉球按一下注射部位。腹腔注射注意事項(xiàng):1.用左手拇指和食指抓住鼠兩耳和頭部皮膚,其他三指抓住背部皮膚,將鼠抓持在手掌內(nèi),固定好動(dòng)物,頭部和頸部保持很平,右手取注射器進(jìn)行灌胃。2.灌時(shí)針頭沿鼠口角通過食管進(jìn)入胃內(nèi)。灌時(shí)如很通暢,則表示針頭已進(jìn)入胃內(nèi);如動(dòng)物有嘔吐動(dòng)物或強(qiáng)烈掙扎,必須拔出后按上述方法重新操作。決不可進(jìn)針不順硬向里插。灌胃給藥(1)注意基本給藥途徑的正確操作。(2)注意小鼠翻

5、正反射消失時(shí)間判定(>1min)。(3)客觀真實(shí)的記錄實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。4實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)影響藥物起效的因素有哪些?請(qǐng)分析本次實(shí)驗(yàn)中,那些因素可影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。?仔細(xì)觀察記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果,結(jié)合藥理學(xué)總論知識(shí)思考,何種給藥途徑起效最快。為什么?問題與思考嗎啡鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模孩僬莆真?zhèn)痛藥的實(shí)驗(yàn)方法。(熱板法、扭體法)②觀察藥物的鎮(zhèn)痛作用。實(shí)驗(yàn)原理:熱刺激或者化學(xué)刺激物使小鼠產(chǎn)生疼痛反應(yīng),觀察給藥前后小鼠疼痛反應(yīng)的變化。(痛閾值、扭體次數(shù))1實(shí)驗(yàn)?zāi)康募霸韺?shí)驗(yàn)動(dòng)物:小鼠(雌性)實(shí)驗(yàn)藥物:0.4%嗎啡主要儀器:熱

6、板測(cè)痛儀(RB-200智能熱板儀)2主要實(shí)驗(yàn)材料3設(shè)定儀器溫度(55℃)動(dòng)物初篩給藥組:0.4%嗎啡0.1ml/10g給藥組:生理鹽水0.1ml/10g腹腔注射給藥后30min、45min、60min再次測(cè)定各組小鼠痛閾值。主要實(shí)驗(yàn)過程(熱板法)篩選指標(biāo):小鼠的痛閾值——即小鼠出現(xiàn)疼痛反應(yīng)的時(shí)間。以小鼠添后足作為出現(xiàn)疼痛觀察指標(biāo)。測(cè)定2次痛閾值,以痛閾值大于5秒,小于30秒,做為篩選合格動(dòng)物。小鼠篩選方法:動(dòng)物隨即分組給藥組:0.4%嗎啡0.1ml/10g腹腔注射30min后各組小鼠均注射0.6%冰醋酸

7、(0.2ml/只);記錄15min內(nèi)各組小鼠的扭體次數(shù)。對(duì)照組:生理鹽水0.1ml/10g3小鼠扭體反應(yīng)主要實(shí)驗(yàn)過程(扭體法)熱板儀溫度設(shè)定:55℃±0.5℃。室溫:以15~20oC為宜。熱板法中動(dòng)物性別的選擇:雌性。痛閾值判定指標(biāo):添后足。痛閾值時(shí)間:初篩(>5s、<30s)。超過60s動(dòng)物未添足,將動(dòng)物取出,痛閾值以60s計(jì)算。實(shí)驗(yàn)中保持小鼠足底及熱板內(nèi)干燥。冰醋酸現(xiàn)用現(xiàn)配。4實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)兩種鎮(zhèn)痛模型的區(qū)別?嗎啡藥理學(xué)作用、機(jī)制??問題與思考藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)抗炎實(shí)驗(yàn)三、1.1實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩W(xué)習(xí)利用化學(xué)藥物或者

8、雞蛋清制急性炎癥動(dòng)物模型方法。觀察糖皮質(zhì)激素的抗炎作用。1.2實(shí)驗(yàn)原理:化學(xué)刺激物或者蛋清,可致動(dòng)物急性炎癥,出現(xiàn)局部腫脹。比較給予藥物前后動(dòng)物局部腫脹程度的變化從而觀察到藥物的抗炎作用。1實(shí)驗(yàn)?zāi)康募霸韺?shí)驗(yàn)動(dòng)物:小鼠、大鼠(雄性)實(shí)驗(yàn)藥物:氫化可的松主要儀器(PV-200足趾腫脹測(cè)定儀)2主要實(shí)驗(yàn)材料動(dòng)物稱重、分組踝關(guān)節(jié)的突起點(diǎn)標(biāo)記,作為測(cè)量標(biāo)志(見后圖)給藥組:氫化可的松溶液1ml/100g體重對(duì)照組:生理鹽水1ml/100g體重腹腔注

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