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《化學(xué)發(fā)光實(shí)驗(yàn)步驟》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、羥自由基清除實(shí)驗(yàn)(芬頓反應(yīng))溶液配制檢測(cè)儀器反應(yīng)過程注意事項(xiàng)溶液配制Na2CO3-NaHCO3緩沖液(CBSS,0.1mol/L):Na2CO3Mr=105.99,0.1mol/L溶液為10.599g/L;NaHCO3Mr=84.01,0.1mol/L溶液為8.401g/L;pH10.2Na2CO3:NaHCO3(6:4)Fe2+SO4-EDTA(3mM):100mlH2O加入Fe2+SO4·7H2O0.08346g,EDTA0.0877g0.1MNaOH:0.2gNaOH加入到50mlH2O.0.
2、1mMluminol溶液:10mMluminol儲(chǔ)液,88.585mgluminol溶于少量DMSO中,加0.1MNaOH定溶至50ml.0.1mMluminol,1ml10mMluminol加99mlCBSS(pH10.2).3%H2O2:100μl30%H2O2加900μlH2O檢測(cè)儀器檢測(cè)儀器:WDD-1型發(fā)光測(cè)試儀(北京第二光學(xué)儀器廠)檢測(cè)條件:電壓:讀數(shù)調(diào)零后,該儀器電壓調(diào)至主針(內(nèi)圈)8,副針(外圈)6.反應(yīng)過程0.1mMluminol溶液880μl100μl樣品(對(duì)照為H2O)10μl
3、Fe2+SO4-EDTA(3mM)10μlH2O2(3%)注意事項(xiàng)H2O2溶液應(yīng)當(dāng)?shù)蜏乇芄獗４鏅z測(cè)過程中,反應(yīng)溶液均在冰浴中保存更佳Fe2+SO4-EDTA和H2O2溶液,均分開貼在檢測(cè)管管壁,開始記時(shí)時(shí)搖勻開啟反應(yīng).樣品混勻后,記錄30S后的讀數(shù).超氧陰離子清除實(shí)驗(yàn)(鄰苯三酚自氧化)溶液配制檢測(cè)儀器反應(yīng)過程注意事項(xiàng)溶液配制0.1mMluminol溶液:10mMluminol儲(chǔ)液,88.585mgluminol溶于少量DMSO中,加0.1MNaOH定溶至50ml.0.1mMluminol,1ml10
4、mMluminol加99mlCBSS(pH10.2).4MNaOH:1.6gNaOH+10mlH2O3mM鄰苯三酚:H2O,用HCl調(diào)pH值為3.5;0.3M鄰苯三酚,0.037833g鄰苯三酚,加入1mlpH3.5的H2O中,3mM鄰苯三酚,10μl0.3M鄰苯三酚+990μlH2O(pH3.5).反應(yīng)過程0.1mMluminol溶液810μl100μl樣品(對(duì)照為H2O)80μlNaOH(4M)10μl鄰苯三酚(3mM)檢測(cè)儀器檢測(cè)儀器:WDD-1型發(fā)光測(cè)試儀(北京第二光學(xué)儀器廠)檢測(cè)條件:電壓
5、:讀數(shù)調(diào)零后,該儀器電壓調(diào)至主針(內(nèi)圈)10,副針(外圈)0.注意事項(xiàng)實(shí)驗(yàn)過程中,鄰苯三酚溶液需冰浴中保存鄰苯三酚溶液堿性條件下容易氧化,若對(duì)照數(shù)值有較大變化,則需配制新溶液3mM鄰苯三酚溶液,貼在檢測(cè)管管壁,開始記時(shí)時(shí)搖勻開啟反應(yīng).樣品混勻后,記錄8S(記錄時(shí)間也可以自己摸索)后的讀數(shù).
