16免疫分析儀器

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1、第I?六章免疫分析儀器*免疫分析法：應(yīng)用不同的標(biāo)記物，以抗原抗體相互結(jié)合為基礎(chǔ)的免疫學(xué)測(cè)定方法。*類型：(1)用酚作標(biāo)記物，稱為酚免疫分析法。(2)以化學(xué)發(fā)光物質(zhì)作標(biāo)記，為化學(xué)發(fā)光免疫分析法。(3)用放射性核素作標(biāo)記物，稱為放射免疫分析法。笫一節(jié)陸標(biāo)分析儀一、酶免疫分析法*分類：冇兩種類型。(1)均相陋免疫測(cè)定：主要用于藥物測(cè)定。(2)非均相酶免疫測(cè)定：也叫酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(EL1SA),常川于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)。二、酶標(biāo)儀的工作原理及結(jié)構(gòu)(1)微機(jī)：可通過(guò)控制電路控制微孔板在X和Y方向的移動(dòng)。(2)微孔板：是一透明鴉料板

2、，板上有裝載待測(cè)樣品的多排小孔。1、原理：采用比色法。光源光線經(jīng)濾光片后成單色光，射入微孔板中待測(cè)樣品后被吸收掉一部分，透射光到達(dá)光電檢測(cè)器，經(jīng)放大及模數(shù)轉(zhuǎn)換后，送入微機(jī)處理、顯示和打印結(jié)果。2、光路系統(tǒng)：光源發(fā)出的光，經(jīng)聚光鏡、光欄、到反射鏡作90()反射后，垂肓通過(guò)比色溶液，然后經(jīng)濾光片到達(dá)光電管。3、陋標(biāo)儀利I光電比色iI*的不同點(diǎn):兩者都用比色法測(cè)定，不同點(diǎn)為(1)裝載比色液的容器不是比色血，而是塑料微孔板。(2)光束垂肓通過(guò)待測(cè)液即微孔板。(3)通常不用吸光度A而是用光密度OD表示。4、酶標(biāo)儀類型:有兩

3、種。(1)單通道：分自動(dòng)型和手動(dòng)型。(2)多通道：均為自動(dòng)型，特點(diǎn)是檢測(cè)速度快。三、EL312E型酚標(biāo)儀簡(jiǎn)介是美國(guó)BIO-TEK公司的產(chǎn)品。1、光學(xué)系統(tǒng)原理：采用比色法。濾光片類型為后密封式干涉濾光片，半通帶寬度10nm；比色板為標(biāo)準(zhǔn)96孔板。2、技術(shù)指標(biāo)：如表。四、半白動(dòng)微孔板式ELISA分析儀結(jié)構(gòu)在酶標(biāo)儀的基礎(chǔ)上再配置加液器、溫育器、洗板機(jī)、測(cè)讀儀。測(cè)定中需山手工將微孔板移至下一步驟的儀器中進(jìn)行。五、全自動(dòng)微孔板式ELISA分析儀結(jié)構(gòu)自動(dòng)化酶免疫分析系統(tǒng)由加樣系統(tǒng)、溫育系統(tǒng)、洗板系統(tǒng)、判讀系統(tǒng)、機(jī)械愕系統(tǒng)、液

4、路動(dòng)力系統(tǒng)、軟件控制系統(tǒng)等組成第二節(jié)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀*發(fā)光劑：指能產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的物質(zhì)，也叫發(fā)光底物。一、化學(xué)發(fā)光免疫分析法1、概念：利用化學(xué)發(fā)光作為抗原抗體反應(yīng)的指示系統(tǒng)，用于定量檢測(cè)抗原或抗體的方法。2、類型：有化學(xué)發(fā)光標(biāo)記免疫測(cè)定和化學(xué)發(fā)光晦免疫測(cè)定兩種。*發(fā)光現(xiàn)象：指物質(zhì)分子吸收能量后躍遷到激發(fā)態(tài)，當(dāng)激發(fā)態(tài)分子返回基態(tài)時(shí)，以發(fā)射可見光的形式釋出能量的現(xiàn)象。*化學(xué)發(fā)光：是指由化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的發(fā)光現(xiàn)象。二、ACS-180SE全口動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀簡(jiǎn)介：由德國(guó)拜M(BaYer)公司生產(chǎn)。(%1)性能特點(diǎn)：(

5、1)檢測(cè)靈敏度高,達(dá)10-15g/mL(2)分析速度快，達(dá)180個(gè)測(cè)定/hr,并可同時(shí)完成13個(gè)項(xiàng)忖。(3)采用兩點(diǎn)定標(biāo)法，節(jié)省時(shí)間和試劑消耗。(%1)儀器測(cè)定原理利用化學(xué)反應(yīng)和免疫反應(yīng)相結(jié)合的原理和方法，采用微量倍增技術(shù)，因而靈敏度很高。*選用的化學(xué)發(fā)光劑為W噪酯。(%1)儀器結(jié)構(gòu):包括主機(jī)和微機(jī)兩部分，外觀如圖。1、主機(jī)：包括原材料配備、液路、機(jī)械傳動(dòng)、光路檢測(cè)等部分。2、微機(jī)系統(tǒng)：功能有程控操作、B動(dòng)監(jiān)測(cè)、指示判斷、數(shù)據(jù)處理、故障診斷等。第三節(jié)放射免疫測(cè)定儀器一、放射免疫分析概述：1、歷史：1959年：美國(guó)

6、學(xué)者Berson和Yalow,用1311作示蹤，首次創(chuàng)立血漿微屋胰島素的測(cè)定方法。定名為放射免疫分析(RlA)o1977年：獲諾貝爾牛物醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。2、特點(diǎn)：放射免疫具冇高特異和高靈敏兩個(gè)基本特點(diǎn)。(1)高特異：即用特異的抗體取代了化學(xué)試劑，不再是針對(duì)物質(zhì)的局部基團(tuán)，具有很高特異性。(2)高靈敏：是指創(chuàng)造性地應(yīng)用了放射性核素示蹤技術(shù)，具有很高靈放度。3、設(shè)備類型：標(biāo)記的核索分兩類，發(fā)射射線的核索用儀測(cè)量。發(fā)射能量較低的射線的核索用儀測(cè)量。二、放射性核索的基本概念*核索：指冇確定質(zhì)了數(shù)和中了數(shù)的原子核所對(duì)應(yīng)的原了統(tǒng)稱。

7、核索冇1900多種，其中279種是穩(wěn)定的，其余都是不穩(wěn)定的，會(huì)發(fā)生衰變并放射出射線，故稱為放射性核素。*同位素：質(zhì)子數(shù)相同而中子數(shù)不同的一類核素。*同質(zhì)杲能素：核內(nèi)中子數(shù)和質(zhì)子數(shù)都相同，但原子核所處能量狀態(tài)不同的核素。（i）放射性核素衰變方式I'衰變：原子核放出粒子（氮核）而衰變?yōu)榱硪环N原子核的過(guò)程。2、衰變：有兩種。（1）■衰變：原子核內(nèi)放射出電子和反小微子的衰變。⑵+衰變：原了核內(nèi)放射出正電了和屮微了的衰變。3、電子俘獲：原子核俘獲一個(gè)核外電子，使核內(nèi)一個(gè)質(zhì)了轉(zhuǎn)變?yōu)橹辛?，同時(shí)發(fā)射一個(gè)中微子的過(guò)程。4、躍遷：放

8、射性核素從激發(fā)態(tài)躍遷到能量較低狀態(tài)，并發(fā)射光了的過(guò)程。（二）放射性衰變規(guī)律1、放射性活度A：指單位時(shí)間內(nèi)發(fā)生衰變的原了核數(shù)。為衰變常數(shù)，N為t時(shí)刻的原子核數(shù)，貝山A=N2、半衰期T1/2：樣詁中的放射性原子衰變掉一半所需的時(shí)間。公式：Tl/2=ln2/3、設(shè)A0和A為t=0和t時(shí)的放射性活度，則:A=A0e-t（三）放射性活度的單位1、SI制：Bq（貝克）lCi=3.7X