資源描述：
《赤鐵礦除磷菌株的鑒定與培養(yǎng)特性研究》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、赤鐵礦除磷菌株的鑒定與培養(yǎng)特性研究對(duì)復(fù)篩出來(lái)的TX2,TX3兩株菌株，對(duì)它們?cè)诠腆w培養(yǎng)基生長(zhǎng)形態(tài)的觀察,通過巨大菌落特征觀察、染色觀察和載片培養(yǎng)三個(gè)試驗(yàn)，以此來(lái)確定微生物所屬的綱(類)、目、科、屬。⑴菌株培養(yǎng)2株菌株接種于培養(yǎng)皿內(nèi)察氏固體培養(yǎng)基表面,靜置于30°C培養(yǎng)箱中充分生長(zhǎng)。(2)實(shí)驗(yàn)設(shè)備及器具生物顯微鏡、恒溫培養(yǎng)箱、載玻片、培養(yǎng)皿、蓋玻片、酒精燈、接種環(huán)、滴管、玻棒等。(3)主要試劑乳酸石碳酸棉藍(lán)染色液血：石碳酸加入10mL蒸憾水1OOmL,加熱溶解,然后加入10譏相對(duì)密度為1.21的乳酸和20mL的甘油，最后加入0.02g棉藍(lán),等到其充
2、分溶解后倒入試劑瓶備用o其它:甘油、石蠟、無(wú)菌水等。4.1.1.1實(shí)驗(yàn)方法(1)巨大菌落的特征觀察在無(wú)菌操作臺(tái)上，將以高溫蒸汽滅菌的察氏培養(yǎng)基融化倒入培養(yǎng)皿，置生化培養(yǎng)箱30°C培養(yǎng)2?3天，確認(rèn)無(wú)雜菌菌落長(zhǎng)岀。然后，用接種環(huán)分別挑取少量TX2,TX3菌株成熟抱子在之前準(zhǔn)備好的固體培養(yǎng)基表面進(jìn)行點(diǎn)種。在30°C的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)47天。待培養(yǎng)皿中的砲子生長(zhǎng)成成熟大型的菌落后，用肉眼觀察并記錄菌落的特征(形狀，大小，邊緣結(jié)構(gòu)，光澤，顏色等)。⑵微生物染色觀察取載玻片，洗凈，用濾紙擦拭干凈。在中間滴加一滴乳酸石炭酸棉藍(lán)，小心挑取少屋菌絲，在棉藍(lán)上攤開，加
3、蓋蓋玻片，盡最避免產(chǎn)生氣泡，影響觀察效果,在光學(xué)顯微鏡下觀察先用低倍鏡，后用高倍鏡。(3)載片培養(yǎng)法觀察取一套清潔干燥的培養(yǎng)皿，把一張完全浸潤(rùn)20%甘油的濾紙(合適大小)鋪在培養(yǎng)皿底部，將兩根短玻璃棒水平放置在濾紙上。取一副滅菌后冷卻干燥的載玻片與蓋玻片，在蓋玻片上滴加一滴尚未凝固固體培養(yǎng)基，待冷凝后立即點(diǎn)種砲子，然后用蓋玻片蓋在上面。用融化的石蠟封閉蓋玻片的四周，封好后，載玻片放在培養(yǎng)皿的短玻璃棒上，蓋好皿蓋。以上操作在無(wú)菌操作臺(tái)上完成。然后，把培養(yǎng)皿靜置于3o°c恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，不定時(shí)取出載玻片進(jìn)行顯微鏡鏡檢，觀察抱子發(fā)育情況。4.1.1.
4、2實(shí)驗(yàn)結(jié)果(1)巨大菌落觀察結(jié)果菌株TX2,TX3在察氏固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)情況見表4?1。TX2菌株在培養(yǎng)皿中形成成熟菌落。菌落直徑為35mm,正面大部為灰綠色,有白圈成熟以前為白色，砲子成熟后轉(zhuǎn)為綠色。背面白色，略有淡黃色；菌落中間略有凸起，四周相對(duì)中心部分較??；菌落邊緣整齊，菌落質(zhì)地呈粉末狀，比較容易被接種環(huán)挑起，菌絲體與培養(yǎng)基的結(jié)合程度并不緊密。TX3菌株在培養(yǎng)皿中形成成熟菌落。菌落直徑為57mm,中心部分稍凸起，有規(guī)則的編射狀溝紋，質(zhì)地絲絨狀；分生泡子結(jié)構(gòu)大量，表面呈暗褐黑色，有滲出液，菌落反而呈淡黃色，分生砲子頭初為球形，菌落邊緣有白色
5、絲狀，容易被接種環(huán)挑起。(2)載片培養(yǎng)結(jié)果TX2鏡檢的結(jié)果：菌落綠色，分生范子梗從菌絲垂直生出，無(wú)足細(xì)胞，有橫,頂端排列成帚狀間枝，分枝多次，頂層為小梗，分生泡子串呈不分枝的鏈狀,單個(gè)飽子注綠色，呈橢圓形，光滑，無(wú)菌核。鑒定為真菌I'KFungi)/半知菌類/絲抱綱/絲泡目/叢梗袍科/單砲亞科/青霉^(penicillium.spp)^TX3鏡檢的結(jié)果：菌落黃褐色，菌絲體有隔膜，菌絲褐色，砲子黃褐色，分生抱子梗從足細(xì)胞分岀，頂部略為膨大形成頂囊，分生砲子穗呈輻射狀，小梗兩層，分生鞄子球形。這些特征符合曲霉的典型特性，依據(jù)《真菌鑒定手冊(cè)》，鑒定為真
6、菌門/半知菌亞門/絲飽綱/絲砲目/從梗泡科/曲霉屬{AspergillusSpp.}^K圖4-1TX2青繚菌落(正面)Fig.4-1TX2Penicilliumcolonies(positive)圖42TX2青篡菌落(反面)Fig.4-1TX2Penicilliumcolonies(negative)圖4?3TX3曲霉菌落（正面）Fig.4-1TX3Aspergilluscolonies(positive)圖4?4TX3曲霉菌落(反面)Fig.4-1TX3Aspergilluscolonies(negative)表4-1TX2與TX3的菌落特征T
7、able4-1thecolonycharacteristicsofTX2andTX3菌株菌落特征TX2TX3生長(zhǎng)速度較慢較快正面菌中央綠色黃褐色正面落邊緣綠色/白色白色背面顏中央淡黃色白色背面色邊緣白色白色菌落厚薄較薄較厚中央凹陷或凸起凸起凸起菌落邊緣整齊不整齊菌落質(zhì)地粗絨狀粉狀生長(zhǎng)狀況不限制不限制挑起程度容易容易菌落直徑（7d）35mm53mm4.1.2KX10的鑒定在顯微鏡下觀察，可以發(fā)現(xiàn)KX10是一種桿狀細(xì)菌，運(yùn)動(dòng)迅速，有鞭毛。圖4-5顯微鏡下觀察KX10圖4-6KX10菌落Fig.4-5KX10underthemicroscopeFig.
8、4-6KX10colony將該菌株的鑒定工作委托中科院昆明動(dòng)物所完成，通過16SrRNA基因序列檢測(cè)，在GenBank中基因序列相似度最
