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1、運(yùn)脾方對(duì)小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化作用探究摘要：目的：研究?jī)和瘏捠嘲Y的有效治療方藥運(yùn)脾方不同劑量對(duì)正常小鼠淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化作用的影響，探討運(yùn)脾方增強(qiáng)免疫功能的作用機(jī)理。方法：選取60只正常小鼠，分為正常組、模型組、陽(yáng)性對(duì)照組(消食健兒糖漿組)、運(yùn)脾方大、中、小劑量組，測(cè)定小鼠PHA刺激淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率。結(jié)果：運(yùn)脾方大、中、小劑量組小鼠PHA刺激淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率與正常組比較有顯著或極顯著增強(qiáng)。結(jié)論：運(yùn)脾方對(duì)小鼠的免疫功能有上調(diào)作用。關(guān)鍵詞：運(yùn)脾方；兒童；厭食癥；小鼠；淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化；動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?中圖分類(lèi)號(hào)：R2-03文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1673-7717(2010)04-0739-02Study
2、onEffectofYun~PiPrescriptioninDifferentDoseontheBlastisationofLymphocyteinMiceZHANGCui,SUNYuan?ling,ZHOUWei,YANGZhen(ShanghaiChildren^sMedicalCenteraffiliatedtoShanghaiJiaotongUniversitySchoolofMedicine,Shanghai200127,China)Abstract：令0bjective：?ToobservetheeffectofYun-PiPrescriptiononregula
3、tingtheimmunefunction,andtoexplorethemechanismofYun-PiPrescriptioninenhancingimmunefunction.Methods：60normalmiceweredividedintogroups：thenormalgroup,themodelgroup,thepositivecontrolgroup(treatedwithXiaoShiJianErSyrup),andYun-PiPrescriptiontreatmentgroupincludinghigh,middleandlowdose?observe
4、thelymphocyteconversionratioofthesemiceafterPHAirritation.ResuIts：Thehigh,middleandlowdoseofYun-PiPrescriptioncanobviouslyelevatelymphocyteconversionratioofthemiceafterPHAirritation.Conclusion：Yun-PiPrescriptionhasanup-regulationeffectonimmunefunction.省略。通訊作者：孫遠(yuǎn)嶺(1957-),男，教授，博士研究生導(dǎo)師,博士，研究方向
5、：中西醫(yī)結(jié)合對(duì)兒童營(yíng)養(yǎng)性疾病的研究。Tel:021?38626161-6388。運(yùn)脾方是導(dǎo)師孫遠(yuǎn)嶺教授治療兒童厭食癥的有效驗(yàn)方,主要由黃英、當(dāng)歸、蒼術(shù)、白術(shù)、浮小麥等藥組成，具有益氣健中、運(yùn)脾和胃之功效。臨床應(yīng)用治療兒童厭食癥、兒童反復(fù)呼吸道感染等，能顯著提高患兒食量，增進(jìn)食欲，增強(qiáng)免疫力，減少呼吸道感染次數(shù)及天數(shù)，減輕感染程度。本研究通過(guò)測(cè)定正常小鼠灌胃后PHA刺激淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率，探討運(yùn)脾方提高機(jī)體免疫功能的機(jī)理，為其臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。1材料1.1動(dòng)物?KM小鼠,雄性,體重(22土2)g,SPF級(jí),由中科院上海實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，檢疫后備用。1.2藥物?受試藥物：運(yùn)脾方按
6、國(guó)家藥典規(guī)定加工為糖漿制劑，由本院制劑室提供。臨床日服劑量按1mL/kg計(jì),設(shè)大、中、小3個(gè)劑量組，相當(dāng)于臨床日用量的20、10、5倍。?陽(yáng)性對(duì)照藥物：消食健兒糖漿，由四川豪運(yùn)藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)。臨床日服劑量按1mL/kg計(jì)，試驗(yàn)時(shí)給藥劑量為20mL/kg(相當(dāng)于臨床日服劑量的20倍)o1.3試劑?PHA溶液：將廣東紅花云豆(PhaseolusVulgaris)研磨成粉末，取10g粉末加生理鹽水lOOmL,放置49冰箱浸泡48h,每隔4h稍加攪拌。取出后用濾紙過(guò)濾或在離心(2500r/min)30min。取濾液或上清液加生理鹽水補(bǔ)足至lOOmL,繼而經(jīng)細(xì)菌濾過(guò)濾，無(wú)菌分裝小
7、瓶，冰凍保存。臨用前加10倍生理鹽水配成1%濃度，并進(jìn)行效力測(cè)定，實(shí)驗(yàn)按每毫升培養(yǎng)液加入50U/mL的PHAO.ImLo令小牛血清：未進(jìn)食的新生小公牛，以無(wú)菌手續(xù)從頸動(dòng)脈放血分離血清，分裝后，56工30min滅活，無(wú)菌試驗(yàn)陰性，冰凍保存長(zhǎng)期備用。?肝素：取粉末狀肝素用HanK's(PH7.4)配成126U/mL,8磅lOmin滅菌,41冰箱中保存，用時(shí)按ImL血液加入0.ImL肝素。?0.5%水解酪蛋白HanK's溶液：配制后15磅高壓滅菌15mino臨用前加最終濃度為20%無(wú)菌小牛血清，并加青霉素(1
