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《產(chǎn)植酸酶菌株青霉P11發(fā)酵條件的研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、產(chǎn)植酸酶菌株青霉P11發(fā)酵條件的研究摘要：研究了不同碳源、氮源等對青霉p11液體發(fā)酵產(chǎn)植酸酶的影響。菌株P11發(fā)酵產(chǎn)植酸酶的最佳碳源為蔗糖，氮源為蛋白腺和硝酸錢。最適發(fā)酵產(chǎn)酶條件為培養(yǎng)溫度30°C,發(fā)酵培養(yǎng)基最適pH值5,搖瓶裝液量10%,接種量4%,搖床轉(zhuǎn)速120r/min,培養(yǎng)時間96h,最高酶活性可達2.63U/mLo關鍵詞：青霉P11；植酸酶；產(chǎn)酶條件；酶活中圖分類號：Q939.97文獻標識碼：A文章編號：0439-811406-1269-03StudiesontheCultureConditionsofPhytase
2、ProducingPenicilliumPllHUANGFang-yi1,ZHONGYi2,LIUYanlOUSbonandnitrnsoufermentatioofPenici11iumPllthatproducesphytasewasstudied?Theresultsindicatedthatthebestcarbonandnitrogencompoundsforthisstrainweresucrose,peptoneandammoniumnitraterespecTheoptimumproducingconditio
3、nwascultivateureat30°C,pHofthentationmediumat5；mediumquantity,10%；inoculationproportion,4%；rotatespeedoftheshaker,120r/min；fermentationtime,96h.Thehighestenzymeactivitycouldreach2.63U/mL.Keywords：Peniciphytase；enzymeproducingcondition；enzymeactivit植酸酶是催化植酸水解成肌醇與磷酸的一
4、類酶的總稱。它能水解植酸而釋放出無機磷，是一種優(yōu)良的環(huán)保型食飼兩用酶制劑。其生產(chǎn)主要來源于微生物，且絕大多數(shù)屬于酸性植酸酶。一般來講，微生物源植酸酶最適PH值范圍較植物源的寬，細菌源植酸酶最適PH值一般為中性或偏堿性，真菌源植酸酶最適PH值為2.5?7.0,最適溫度為40?60°C［1一3］。大多數(shù)微生物植酸酶適宜pH值在酸性范圍內(nèi)，接近動物胃、腸道內(nèi)的PH值，因而能在動物胃、腸道內(nèi)保持較高活性并發(fā)揮催化作用。褚西寧等［4］在國內(nèi)首次分離到一種產(chǎn)植酸酶的青霉菌一一變灰青霉。隨后，白玉明等［5］、陳旭等［6］、何平等［7,8］、
5、王尊生等［9］、劉紅蕾等［10］也對產(chǎn)植酸酶青霉菌進行了不同程度的研究。當前，國外使用的植酸酶產(chǎn)生菌以NRRL3135菌株研究得較為詳細［11］。本研究用正交試驗對一株產(chǎn)植酸酶的青霉P11的產(chǎn)酶培養(yǎng)基及產(chǎn)酶條件進行優(yōu)化，以期為植酸酶性質(zhì)研究和工業(yè)化生產(chǎn)提供一些基礎資料。1材料與方法1.1材料1.1.1青霉青霉保藏于武漢生物工程學院發(fā)酵工程實驗室。1.1.2培養(yǎng)基斜面培養(yǎng)基：PDA培養(yǎng)基；發(fā)酵培養(yǎng)基：碳源4.0%、氮源總量1.0%、KC10.05%、MgSO4?7H2O0.05%、FeSO4?7H2O0.003%、MnS04?4
6、H200.002%。1.2方法1.2.1搖瓶培養(yǎng)將活化的青霉P11接種于250mL搖瓶中，置于轉(zhuǎn)速為120r/min的搖床上，30°C發(fā)酵培養(yǎng)4?5do1.2.2酶活的測定在反應試管中加入0.5mL20mmol/L植酸和3mL乙酸緩沖液，50°C保溫30min,加入0.5mL植酸酶酶液，反應30min后，用2mL10%TCA終止反應，測定發(fā)酵液中無機磷的含量［12］。一個酶活性單位定義為：樣品在指定的溫度、PH值等條件下，每分鐘釋放出1ymo1無機磷所需的酶量。酶活為每毫升酶液中所含酶活性單位。2結(jié)果與分析2.1碳源對發(fā)酵產(chǎn)酶
7、的影響分別以4.0%的葡萄糖、果糖、麥芽糖、蔗糖、乳糖、可溶性淀粉作為碳源，30°C、120r/min搖瓶中培養(yǎng)96h后測定酶活，結(jié)果見圖1。該菌碳源譜較廣，對乳糖的利用能力最弱，發(fā)酵產(chǎn)酶活性遠遠低于其他碳源；對蔗糖的利用能力最強，明顯優(yōu)于其他碳源，蔗糖來源廣泛，價格低廉，適合工業(yè)化生產(chǎn)，文獻】13,14］中也有蔗糖有利于產(chǎn)酶的報道。2.2氮源對發(fā)酵產(chǎn)酶的影響以質(zhì)量分數(shù)4.0%的蔗糖為碳源。分別以有機氮和無機氮作氮源，氮源質(zhì)量分數(shù)為1.0%,培養(yǎng)后測定結(jié)果見圖2。該菌的氮源譜也比較廣，不但可以利用有機氮為氮源，也可以利用無機氮
8、為氮源進行發(fā)酵產(chǎn)酶。以蛋白腺、硝酸鞍分別作為氮源時植酸酶活性最高，考慮遲效和速效氮源搭配使用，因此選擇蛋白腺、硝酸鍍分別作為有機和無機氮源。2.3正交試驗對碳源含量和兩種氮源含量進行正交試驗優(yōu)化，因素與水平設計見表1,正交試驗結(jié)果見表2o根據(jù)表2可知各因素作用的主次順序為：蔗
