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《實驗動物學實驗》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、實驗一常用實驗動物技術(shù)介紹目的了解并熟悉實驗動物實驗操作的基本方法和技術(shù)。內(nèi)容注射方法;麻醉方法;動物編號的方法;采血;動物性別鑒定;動物的致死。學習打結(jié)、縫合、固定動物等。播放錄像《太行山獼猴》、《動物的捉拿和給藥途徑》。用品大白鼠、小白鼠、蟾蜍、家兔,常用手術(shù)器械、注射器、小木錘、大小鼠固定器,戊巴比妥鈉,乙醚、士的寧、乙醚、氯仿、氯化鉀、一氧化碳、二氧化碳常用實驗動物性別鑒定1、大、小鼠的性別鑒定離乳仔鼠性別鑒定主要以生殖器與肛門之間的距離長短及肛門與生殖器有無被毛為標志。識別要點是:①雄性的生殖器與肛門之間的距離較遠,雌鼠較近;②雄性的生殖器與肛門之間有毛;③雄性的生殖器突起較
2、雌鼠大;④雌鼠乳頭較雄鼠明顯。成熟后,雄性可見陰囊,雌性乳頭明顯而易于區(qū)分。2、豚鼠的性別鑒定豚鼠的性別鑒定主要是通過生殖器形態(tài)來判斷。雌性外生殖器陰蒂突起比較小,用拇指按住陰蒂突起,余指撥開大陰唇的皺褶,可見陰道口呈”V”形(注意發(fā)情間期的閉鎖現(xiàn)象,即一種除了發(fā)情和分娩時外,關(guān)閉陰道口的細胞結(jié)構(gòu));雄性外生殖器有包皮覆蓋的陰莖小隆起,用拇指按住其基部包皮,可見龜頭向外突出。3、兔子的性別鑒定幼兔的性別鑒定主要以尿道開口部與肛門之間的距離及尿道開口部的形狀來判別。哺乳期仔兔,雄性尿道開口部與肛門之間的距離較遠,為雌性的1.5-2倍,雌性較近。雌性尿道開口扁形,大小與肛門同;雄性圓形,略
3、小于肛門。1月齡仔兔,雄性生殖孔呈圓形,翻出可見呈圓柱體的突起;雌性生殖孔呈Y形,翻出僅見有裂縫,裂縫及于肛門。3月齡以上成年兔,雄性陰囊明顯而雌性無陰囊;雄性頭大短而圓而雌性頭小略呈長形。4、貓的性別鑒定幼貓的性別是根據(jù)生殖器與肛門的距離來判斷。距離遠者為雄性,距離近者為雌性。5、猴類的性別鑒定猴類性別的區(qū)分較為困難。首先檢查尿道開口,許多雌性動物有較大的陰蒂,其腹側(cè)形成溝狀通向尿道口,而雄性動物的尿道開口在陰莖頭上。觸摸陰囊內(nèi)是否有睪丸是確定其雌雄的最可靠辦法。常用實驗動物處死大鼠和小鼠的處死方法1、脊椎脫臼法右手抓住鼠尾23用力向后拉,同時左手拇指與食指用力向下按住鼠頭,將脊髓與
4、腦髓拉斷,鼠便立即死亡。2、斷頭法實驗者戴上棉紗手套,用右手握住大鼠頭部,左手握住背部,露出頸部,助手用剪刀在鼠頸部將鼠頭剪掉。小鼠處死法相同。3、擊打法右手抓住鼠尾,提起,用力摔擊其頭部,鼠痙攣后立即死亡。用小木錘用力擊打鼠頭部也可致死。4、急性大失血法可采用鼠眼眶動脈和靜脈急性大量失血方法使大小鼠立即死亡。5、化學致死法吸入一氧化碳,大、小鼠在一氧化碳濃度為0.2-0.5%環(huán)境中即可致死。皮下注射士的寧,吸入乙醚、氯仿,均可致死。士的寧注射量,小鼠為0.76~2.0mg/kg體重,大鼠3.0-3.5ml/kg體重。氯化鉀處死大鼠劑量:25%溶液0.6ml/只靜脈注入。實驗動物的處死
5、方法很多,應(yīng)根據(jù)動物實驗?zāi)康?、實驗動物品種(品系)、以及需要采集標本的部位等因素,選擇不同的處死方法。無論采用哪一種方法,都應(yīng)遵循安樂死的原則。安樂死是指在不影響動物實驗結(jié)果的前提下,使實驗動物短時間無痛苦地死亡。處死實驗動物時應(yīng)注意,首先要保證實驗人員的安全;其次要確認實驗動物已經(jīng)死亡,通過對呼吸、心跳、瞳孔、神經(jīng)反射等指征的觀察,對死亡作出綜合判斷;再者要注意環(huán)保,避免污染環(huán)境,還要妥善處理好尸體。一、頸椎脫臼處死法此法是將實驗動物的頸椎脫臼,斷離脊髓致死,為大、小鼠最常用的處死方法。操作時實驗人員用右手抓住鼠尾根部并將其提起,放在鼠籠蓋或其他粗糙面上,用左手拇指、食指用力向下按壓
6、鼠頭及頸部,右手抓住鼠尾根部用力拉向后上方,造成頸椎脫臼,脊髓與腦干斷離,實驗動物立即死亡。二、斷頭處死法此法適用于鼠類等較小的實驗動物。操作時,實驗人員用左手按住實驗動物的背部,拇指夾住實驗動物右腋窩,食指和中指夾住左前肢,右手用剪刀在鼠頸部垂直將鼠頭剪斷,使實驗動物因腦脊髓斷離且大量出血死亡。三、擊打頭蓋骨處死法主要用于豚鼠和兔的處死。操作時抓住實驗動物尾部并提起,用木錘等硬物猛烈打擊實驗動物頭部,使大腦中樞遭到破壞,實驗動物痙攣并死亡。四、放血處死法此法適用于各種實驗動物。具體做法是將實驗動物的股動脈、頸動脈、腹主動脈剪斷或剪破、刺穿實驗動物的心臟放血,導致急性大出血、休克、死亡
7、。犬、猴等大動物應(yīng)在輕度麻醉狀態(tài)下,在股三角做橫切口,將股動脈、股靜脈全部暴露并切斷,讓血液流出。操作時用自來水不斷沖洗切口及血液,既可保持血液暢流無阻,又可保持操作臺清潔,使實驗動物急性大出血死亡。五、空氣栓塞處死法處死兔、貓、犬常用此法。向?qū)嶒瀯游镬o脈內(nèi)注入一定量的空氣,形成肺動脈或冠狀動脈空氣栓塞,或?qū)е滦那粌?nèi)充滿氣泡,心臟收縮時氣泡變小,心臟舒張時氣泡變大,從而影響回心血液量和心輸出量,引起循環(huán)障礙、休克、死亡??諝馑ㄈ幩婪ㄗ⑷氲目諝?/p>