有機(jī)物的鑒定

有機(jī)物的鑒定

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1、有機(jī)物的鑒定糖類(lèi)蛋白質(zhì)脂肪鑒定的探究性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)原理:某些化學(xué)試劑能夠使生物組織屮的有關(guān)有機(jī)化合物產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)??扇苄蕴侵械倪€原糖(如葡萄糖、果糖),與班氏試劑發(fā)牛作用,可以生成磚紅色的氧化亞銅沉淀。脂肪可以被蘇丹III染成橘黃色。蛋白質(zhì)與雙縮月尿試劑發(fā)生作用,可以產(chǎn)生紫色反應(yīng)。因此,可以根據(jù)與某些化學(xué)試劑所產(chǎn)生的顏色反應(yīng),鑒定生物組織中糖、脂肪或蛋口質(zhì)的存在。目的耍求:初步掌握鑒定牛物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。材料用具:一、實(shí)驗(yàn)材料1、做可洛性還原糖的鑒定實(shí)驗(yàn),應(yīng)選擇含糖量較高、顏色為白色或近于白色的植物組織(如蘋(píng)果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜等)。2、

2、做脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn),應(yīng)選擇富含脂肪的種子,以花生種子為最佳,實(shí)驗(yàn)前需浸泡3-4h03、做蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn),可用雞蛋蛋白或用浸泡l-2d的黃豆種子(或豆?jié){)。二、儀器和試劑1>儀器水果刀、銀了、試管、試管夾、試管架、大小燒杯、量筒、滴管、酒精燈、三腳架、石棉網(wǎng)、火柴、載玻片、蓋玻片、吸水紙、研缽、石英砂、紗布、顯微鏡2、試劑班氏試劑、蘇丹III染劑、雙縮腺試劑、體積分?jǐn)?shù)為20%的酒精溶液、蒸憾水方法步驟:一、可溶性還原糖的鑒定1、制備生物組織樣液為節(jié)省實(shí)驗(yàn)時(shí)間,教師在上課之前準(zhǔn)備好蘋(píng)果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜的組織樣液(具體方法參照課木中有關(guān)內(nèi)容)。2、實(shí)驗(yàn)操作方法和觀察(1)

3、取A、B編號(hào)的2支試管,分別注入2ml組織樣液和2ml蒸他水。(2)向2支試管內(nèi)分別加入5—6滴班氏試劑。振蕩試管,使溶液混合均勻,此時(shí)溶液呈藍(lán)色。(3)將2支試管放進(jìn)盛有開(kāi)水的大燒杯中,用酒精燈加熱煮沸2min左右。在對(duì)試管加熱煮沸過(guò)程中,隨時(shí)仔細(xì)觀察并對(duì)比2支試管中溶液的顏色變化。3、教學(xué)建議(1)將學(xué)生分成4個(gè)小組,分別選用蘋(píng)果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜的組織樣液進(jìn)行實(shí)驗(yàn),比較這些植物組織中含糖量的高低,從而增加實(shí)驗(yàn)的探究性。另外,也可選用同一種植物的不同品種的某器官作為實(shí)驗(yàn)材料,以比較它們含糖量的高低,如用不同品種的柑橘果實(shí)。(2)課外探究:尿糖的定性檢測(cè)有興趣的同學(xué)

4、可根據(jù)還原糖與班氏試劑的顏色反應(yīng),檢測(cè)自己的尿液中是否含有尿糖(葡萄糖)。具體方法附后。4、說(shuō)明:(1)實(shí)驗(yàn)操作中增加了一個(gè)對(duì)照組,冃的是為了排除加熱使班氏試劑顏色變化的可能性。(2)鑒定試劑改為班氏試劑,主要是考慮班氏試劑配制后能長(zhǎng)期使用,不需使用時(shí)再臨時(shí)配制,從而簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)操作。二、脂肪的鑒定1、制備生物組織樣本取2?3粒浸泡過(guò)的花生種子去皮,置于研缽中研磨呈泥狀待用。2、實(shí)驗(yàn)操作方法和觀察(1)用銀子取少許泥狀花生種子組織于載玻片上,滴2?3滴蘇丹III染液,染色2-3min0(2)用吸水紙吸去組織周?chē)娜疽?,再滴?滴體積分?jǐn)?shù)為20%的酒精溶液,洗去浮色。(3)用吸水

5、紙吸去組織周?chē)木凭?,再滴??2滴蒸憾水,蓋上蓋玻片,壓片制成臨時(shí)裝片。(4)在低倍鏡下尋找組織附近己著色的圓形小顆粒。為了觀察得更清楚,可以用高倍鏡進(jìn)行觀察。3、說(shuō)明:(1)徒手切取花生子葉薄片難度較大,也有一定的危險(xiǎn)性。因此改用研蘑成泥狀的花生子葉。另外考慮到本實(shí)驗(yàn)的時(shí)間較緊張,花生泥可由教師在實(shí)驗(yàn)之前制備好。(2)制備花生種子組織樣本時(shí),研磨要充分;制片時(shí),應(yīng)盡量使花生泥呈一薄層均勻分布在蓋玻片下,以便于觀察。三、蛋白質(zhì)的鑒定1、制備生物組織樣液(1)取幾粒浸泡過(guò)的黃豆,去皮,切成薄片。(2)將黃豆薄片放進(jìn)研缽中,加少許石英砂和5ml蒸館水,充分研碎。(3)將玻璃漏

6、斗插入試管中,在漏斗上墊上一層紗布,過(guò)濾黃豆組織研磨液。2、實(shí)驗(yàn)操作方法和觀察(1)取2支試管,分別向2支試管加入豆?jié){和蒸餡水各2ml,再分別向2支試管中加入2ml雙縮服試劑A(質(zhì)量濃度為O.lg/ml的氫氧化鈉溶液),搖蕩均勻,注意觀察溶液的顏色變化。(2)再向2支試管加入3?5滴雙縮腺試劑B(質(zhì)量濃度為0.01g/ml的硫酸銅洛液)搖勻,注意觀察溶液的顏色變化。3、教學(xué)建議(1)為節(jié)省實(shí)驗(yàn)時(shí)間,可見(jiàn)現(xiàn)成的食用豆?jié){作為黃豆組織研磨液使用:也可將實(shí)驗(yàn)分成幾個(gè)小組,分別用不同廠家生產(chǎn)的牛奶(可選用本校小賣(mài)部出售的幾種牛奶)作為實(shí)驗(yàn)材料,以比較它們的蛋白質(zhì)含量。(2)課外探究:

7、尿蛋口的定性檢測(cè)有興趣的同學(xué),可根據(jù)蛋白質(zhì)具有變性和沉淀反應(yīng)的化學(xué)特性,檢測(cè)尿液中蛋白質(zhì)的含量,具體方法附后。4、說(shuō)明:實(shí)驗(yàn)操作中增加了一個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn),目的是為了排除雙縮服試劑A和雙縮腺試劑B反應(yīng)造成顏色變化的可能性,從而增強(qiáng)了說(shuō)服力。有關(guān)試劑的配制:1、班氏試劑的配制:(1)600ml蒸僞水溶解173g檸檬酸鈉和100g碳酸鈉,冷卻后稀釋到850ml(A液)。(2)100ml蒸憾水溶解17.4g無(wú)水硫酸銅,冷卻后稀釋到150ml(B液)。(3)將B液緩緩倒入A液中,邊倒入邊攪拌,如有沉淀產(chǎn)生,可過(guò)濾沉淀物,長(zhǎng)期使用

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