超聲法提取香菇多糖最佳工藝優(yōu)化研究

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1、萬方數(shù)據(jù)2007年7月第29卷第7期中成藥ChineseThditionalPatentMedicineJuly2007V01．29No．7超聲法提取香菇多糖最佳工藝優(yōu)化研究胡斌杰，王芳，王方林(開封大學(xué)化學(xué)工程學(xué)院，河南開封475004)關(guān)鍵詞：香菇多糖；正交試驗；超聲提取中圖分類號：R284．2文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B文章編號：1001-1528(2007)07一附4-02香菇(Lentinusedodes(Berk．)Sing)是側(cè)耳科(Pleurota—ceae)的擔(dān)子菌，世界名貴食用兼藥用菌之一。香菇

2、子實體中除含有蛋白質(zhì)、氨基酸、礦物質(zhì)、維生素和對人體有益的微量元素外還含有一種重要的生物活性高分子一多糖。香菇多糖具有抗病毒、抗腫瘤、調(diào)節(jié)免疫功能和刺激干擾素形成等多項功能。它的作用已被世界醫(yī)學(xué)生物界作了充分的研究，尤其在日本，它被廣泛應(yīng)用于藥品和保健食品中，以它制成的制劑——香菇多糖針劑及片劑，配合放化療，用于腫瘤患者療效顯著，由于它的特殊的免疫功能，在全世界各地被廣泛應(yīng)用。臨床主要用于胃癌、肺癌、腸癌及癌性胸腹水等惡性腫瘤的治療，另外對提高肝炎及艾滋病人的免疫功能等均有較好的作用?。傳統(tǒng)的香菇多糖

3、提取工藝復(fù)雜，浸提劑用量大、收率低、成本高。近年來人們開始采用超聲波技術(shù)提取植物多糖，研究表明，利用超聲波產(chǎn)生的強(qiáng)烈振動，高的加速度，強(qiáng)烈的空化效應(yīng)、攪拌作用等，可加速有效成分進(jìn)入溶劑，從而有利于多糖的提取口1。本試驗采用單因素考察和正交試驗方法利用超聲波對香菇多糖提取的最佳工藝進(jìn)行了探討，為香菇多糖工業(yè)化生產(chǎn)提供一定的理論參考。1儀器與試藥1．1儀器超聲波處理器(JY92—2D)，寧波超聲器材廠；紫外分光光度計(722型)，天津分析儀器廠；離心機(jī)(LX．I—lI型)，上海醫(yī)用分析儀器廠；恒溫水浴鍋。

4、1．2試藥香菇由開封市食用菌栽培基地提供；苯酚、葡萄糖、無水乙醇、濃硫酸、乙醚等均為分析純試劑。2實驗方法2．1香菇多糖提取實驗方法香菇經(jīng)烘干后粉碎，過40目篩，先用乙醚回流脫脂2次，再用85％乙醇提取去除單糖、低聚糖，過濾。預(yù)處理后的菌粉采用超聲提取。對提取的不同料液比、提取次數(shù)、超聲時間、溫度進(jìn)行單因素探索以確定各因素水平，用正交試驗優(yōu)選出最佳超聲提取工藝條件。2．2多糖的測定方法香菇多糖的測定采用苯酚一硫酸比色法，以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)品。2．2．1標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液的配制精密稱取105。C干燥至恒重的葡萄糖

5、對照品100mg置于100mL量瓶中，加水適量使溶解，定容。精密吸取上述溶液10mL定容至100mL量瓶中，即得100¨g／mL的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。2．2．2最大吸收光波長的確定分別吸取一定量的標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖溶液樣品，置于比色皿中，加水至2mL，加1mL5％苯酚后，立即加入5mL濃硫酸并混勻，室溫顯色20min。同時取2mL水進(jìn)行上述同樣操作，作為空白對照。樣品溶液分別于450～550nln處測吸光度，確定其最大吸收峰所對應(yīng)的波長。根據(jù)實驗測定，當(dāng)吸收光波長為490n／n時，樣品溶液的吸光度最大，所以測定多糖含

6、量時使用的吸收光波長應(yīng)為490am。2．2．3標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制用移液管精密移取0．1、0．2、0．3、0．4、0．5、0．6．0．7mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品溶液。分別置于10mL比色皿中，依次加水使成為2mL。另加1．0mL的5％的苯酚，搖勻，迅速滴加濃硫酸各5mL，搖勻后放置5min，在25℃水浴中放置15min，以空白校正零點，于490nm處檢測其吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得回歸方程為Y=1．1879X一0．0702(r=0．9997)。3結(jié)果3．1超聲提取香菇多糖單因素考察3．1．1不同料液比對香菇多糖提取的

7、影響(見圖1)圖1不同料液比對多糖提取含量的影響收稿日期：2006—11—15作者簡介：胡斌杰(1971～)，男，講師，主要從事生物化工工藝教學(xué)和天然產(chǎn)物有效成分提取，分離及應(yīng)用方面研究。電話：0378-3810032。附4鬟＼刪如纂精萬方數(shù)據(jù)2007年7月第29卷第7期中成藥ChineseTraditionalPatentMedicineJuly2007V01．29No．7由圖1可知，香菇多糖提出量隨料液比的增大而提高，多糖的含量在料液比1：5至1：15之間變化不大，從1：15對1：20明顯增長，從

8、1：20至1：25又出現(xiàn)較慢增長。3．1．2超聲處理時間對多糖提取的影響(見圖2)由圖2可知，多糖提取量隨超聲處理時間剛開始上升較大，至超聲處理40min時達(dá)到最高點，而后，隨著超聲時間的延長多糖含量開始緩慢下降。基礎(chǔ)缸絮掩圖2超聲處理時間對多糖提取含量的影響3．1．3不同提取溫度對多糖提取的影響(見圖3)由圖3可知，隨著提取溫度的增高，多糖提取量也升高，在溫度50℃達(dá)最高點，而后，隨著溫度的延長，多糖含量反而有所下降。摹嘲缸鞭蚺圖3不同提取溫度對多糖提