松材線蟲(chóng)分離技術(shù)改進(jìn)的初步研究

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1、第3卷第版）JERIY松材線斌,劉桂林107,材線121年6月01L0FHUI131No蟲(chóng)分離技術(shù)改進(jìn)的初步研3期0URNAVo?惠州學(xué)院學(xué)報(bào)（自然科學(xué)H0UU3Jn究戴霖VSTZNI21u.01昌，鄭付芹,曹惠州560)最佳起始溫度多，第60在4線蟲(chóng)的最（惠州學(xué)院摘生命科學(xué)系，廣東要：對(duì)松材線蟲(chóng)快速分離的條件進(jìn)行了研究，果顯蟲(chóng)分離的最佳環(huán)境溫度為2q組合時(shí)總為4為3°C,這一溫度為h時(shí)的12條，2小人溢出量在處理時(shí)間在近與了佳最個(gè)這的詞度鍵的關(guān)定材炮對(duì)線標(biāo)于蟲(chóng)識(shí)分離液的結(jié)松5C,卜'松材線山的溢出量溢出量為66條，0h時(shí)間段內(nèi)，6少蟲(chóng)溫編快；碼速離材松文線分章3松樹(shù)萎鴛病是松樹(shù)的一種毀滅性病

2、害,其病原為松材線蟲(chóng)BrpenhsypisSirBhe）uahicux1hu（tn&uro該病seo1eer于一十ttt紀(jì)初（95年）日本長(zhǎng)崎首次報(bào)道,1710在至92年才鑒定出其病原為線蟲(chóng)，myMaia和Kyhr(aiiaaMmyoa等，17)92定名為Brpenhsii1,91Nkuah1cu1nos18年■1e和Mmy將其更正為BrPenhsyoh1o關(guān)于松材segcu1aiauah1CUX1■1ssePU線蟲(chóng)，最早是see:和Ehe于12tnriurr99年在美國(guó)得克薩斯的長(zhǎng)葉松材中分離出的，并命名為Ahlcoexlhpenhisypiedo1,9獰Nel將具歸入Brpenhsu17s

3、iek,uah1cu屬。松材線蟲(chóng)可導(dǎo)致大量的木材損失，se在我國(guó)被列為重要的檢疫對(duì)象。日前，該病在日木、國(guó)、美加拿大、國(guó)等國(guó)家都有分布，韓因危害嚴(yán)重，于防治從而受到世界各國(guó)的重難視。我國(guó)從18年在南京中山陵風(fēng)景區(qū)拘黑松上首次發(fā)現(xiàn)松材線蟲(chóng)后，已發(fā)展到江蘇、92現(xiàn)浙江、安徽、廣東、山東、湖北、上海、香港和澳門(mén)等地，并在上述地區(qū)有加速蔓延和危害的趨勢(shì)。我國(guó)臺(tái)灣省于二十卅紀(jì)七十年代發(fā)現(xiàn)該病，十世紀(jì)八十年代在臺(tái)灣北部迅速蔓延，二現(xiàn)正逐漸擴(kuò)散。松材線蟲(chóng)在1和我國(guó)已經(jīng)造成了巨人的損失。它不僅給林業(yè)生產(chǎn)帶來(lái)巨大損失，且造成生態(tài)景觀和生3本而態(tài)系統(tǒng)的破壞，入侵廣東二十多年以來(lái)，已經(jīng)造成松林生態(tài)系統(tǒng)的嚴(yán)重破壞。該

4、宵的發(fā)生和發(fā)展涉及寄主、媒介和病原以及有關(guān)的微生物等多種生物因素,而病原即松材線蟲(chóng)為苴主要因索。冃前對(duì)松材線蟲(chóng)的研究比較深入，從松材線蟲(chóng)的形態(tài)、分子生物學(xué)、生活史以及松材線蟲(chóng)的致病機(jī)理都進(jìn)行了詳細(xì)的研究。研究表明，松材線蟲(chóng)的3齡（III）4齡（1幼蟲(chóng)在形態(tài)結(jié)構(gòu)和生物化學(xué)上發(fā)生了某些變界，于被傳媒昆蟲(chóng)攜帶傳播。但是針對(duì)松材L和］V）L易線蟲(chóng)的分離技術(shù)則研究相對(duì)較少，快速分離鑒定松材線蟲(chóng)是控制松材線蟲(chóng)病擴(kuò)散蔓延的基礎(chǔ)，并對(duì)可能攜帶松材線蟲(chóng)的植物及其產(chǎn)品進(jìn)行準(zhǔn)確的檢驗(yàn)檢疫。因此，材線蟲(chóng)的快速檢測(cè)技術(shù)已成為控制該病害擴(kuò)散的重要手段松之一。審r最常用的快速檢測(cè)技術(shù)主要是形態(tài)學(xué)檢測(cè)，而形態(tài)學(xué)檢測(cè)中最為關(guān)鍵

5、的一步就是從病木或待檢產(chǎn)品屮分離蟲(chóng)體。本研究的冃的是通過(guò)試驗(yàn)對(duì)現(xiàn)有的線蟲(chóng)分離技術(shù)進(jìn)行改進(jìn)，以期建立一套完整的松材線蟲(chóng)快速分離技術(shù)，為松材線蟲(chóng)的快速檢疫和控制其傳播提供有力的技術(shù)保障。該技術(shù)的研究成果將具有明顯的經(jīng)濟(jì)、社會(huì)和生態(tài)效益，著廣闊應(yīng)用前景。有1材料與方法11供試材料?本實(shí)驗(yàn)所采用的松材線蟲(chóng)病木（馬尾松）自廣東省從化市流溪河森林公園林場(chǎng)（采廣東省惠州市神龍松材線收稿E期：01-5-212100基金項(xiàng)冃：惠州學(xué)院大學(xué)生創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)項(xiàng)冃；惠州市科技計(jì)劃項(xiàng)冃（冃編號(hào)：0000009項(xiàng)21C1040）作考簡(jiǎn)介：霖昌（91一）男，徽六安人，戴19,安惠州學(xué)院生命科學(xué)系生物科學(xué)08級(jí)本科生。通訊作者:桂

6、林.劉E-migl@hueuc.al1uz?d.n：i?38?惠州學(xué)院學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版）21年第3011卷蟲(chóng)病綜合治理有限公司提供）。12供試儀器.恒溫培養(yǎng)箱，解剖鏡，剪刀，線蟲(chóng)分離器。13?試驗(yàn)方法131材料處理與儀器設(shè)定??分別設(shè)置2—2—3—3—4%五個(gè)環(huán)境溫度和五個(gè)起始水溫進(jìn)行松材線蟲(chóng)的分離,0C、5C、0C、5C和0每個(gè)溫度設(shè)5次重復(fù)。將松材線蟲(chóng)病木木塊削成薄片狀，并用剪刀將薄木片剪成長(zhǎng)約為2e寬約為1e的木屑，m,m分別稱取5g木屑置于5塊紗布（每塊兩層），上用紗布將木屑包住，同時(shí)放入E徑為1m的玻璃漏斗中，并10e待怛溫培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度（分別為2—2—3—3—41穩(wěn)定Z后,0C、5

7、C、0C、5C和0C）將漏斗固定在恒溫培養(yǎng)箱中，并將漏斗出水V用夾有止水1夾的橡皮管套住。將事先處理好的週単分別為2—2%、0c、54—5份自來(lái)水（0C、53o3—0C的C、每份10m