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1、實(shí)驗(yàn)室常用緩沖液配置方案1×TEBuffer組成濃度：10mMTris-HCl??1mMEDTAPH=8.0配制量：500ml配制方法：量取下列溶液于500ml燒杯中????1MTris-HCl??BufferPH=8.0??5ml????0.5MEDTA????PH=8.0??1ml????向燒杯中加入約400mlddH2O均勻混合；將溶液定容到500ml后，高溫高壓滅菌；室溫保存.1)1MTris-HCl(pH8.0)組份濃度：1MTris-HCl配制量：1L配制方法：1.稱量121.1gTris置于1L燒杯中。2.加入約800ml的去離子水，充分?jǐn)嚢枞?/p>
2、解。3.加入42ml濃鹽酸調(diào)節(jié)所需要的pH值。4.將溶液定容至1L。5.高溫高壓滅菌后，室溫保存。15）0.5MEDTA(pH8.0)組份濃度：0.5MEDTA配制量：1L配制方法：稱取186.1gNa2EDTA·2H2O，置于1L燒杯中。2.加入約800ml的去離子水，充分?jǐn)嚢琛?.用NaOH調(diào)節(jié)pH值至8.0（約20gNaOH)。注意：pH值至8.0時(shí)，EDTA才能完全溶解。4.加去離子水將溶液定容至1L。5.適量分成小份后，高溫高壓滅菌。6.室溫保存。實(shí)驗(yàn)室常用緩沖液配置方案1)1MTris-HCl(pH7.4,7.6,8.0)組份濃度：1MTris-
3、HCl配制量：1L配制方法：1.稱量121.1gTris置于1L燒杯中。2.加入約800ml的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?.按下表量加入濃鹽酸調(diào)節(jié)所需要的pH值。PH值濃HCl7.4約70ml7.6約60ml8.0約42ml4.將溶液定容至1L。5.高溫高壓滅菌后，室溫保存。注意：應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值，因?yàn)門ris溶液的pH值隨溫度的變化差異很大，溫度每升高1℃，溶液的pH值大約降低0.03個(gè)單位。2)10×TEBuffer(pH7.4,7.6,8.0)組份濃度：100mMTris-HCl,10mMEDTA配制量：1L配制方法：1.量取下列溶液，置
4、于1L燒杯中。1MTris－HClBuffer（PH7.4，7.6，8.0）100ml500mMEDTA(PH8.0)20ml2.向燒杯中加入約800ml的去離子水，均勻混合。3.將溶液定容至1L后，高溫高壓滅菌。4.室溫保存。3)1.5MTris-HCl(pH8.8)組份濃度：1.5MTris-HCl配制量：1L配制方法：1.稱量181.7gTris置于1L燒杯中。2.加入約800ml的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?.用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至8.8。4.將溶液定容至1L。5.高溫高壓滅菌后，室溫保存。注意：應(yīng)使溶液冷卻至室溫后再調(diào)定pH值，因?yàn)門ris溶液的pH值
5、隨溫度的變化差異很大，溫度每升高1℃，溶液的pH值大約降低0.03個(gè)單位。4)3M醋酸鈉(pH5.2)組份濃度：3M醋酸鈉配制量：100ml配制方法：1.稱量40.8gNaAc·3H2O置于100-200ml燒杯中，加入月40ml的去離子水?dāng)嚢枞芙?.加入冰醋酸調(diào)節(jié)pH值至5.23.加去離子水將溶液定容至100ml4高溫高壓滅菌后，室溫保存。5)PBSBuffer組份濃度：137mMNaCl,2.7mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4配制量：1L配制方法：1.稱量下列試劑，置于1L燒杯中。NaCl8gKCl0.2gNa2HPO41.42gK
6、H2PO40.27g2.向燒杯中加入約800ml的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?.滴加濃鹽酸將pH值調(diào)節(jié)至7.4，然后加入去離子水將溶液定容至1L。4.高溫高壓滅菌后，室溫保存。注意：上述PBSBuffer中無(wú)二價(jià)陽(yáng)離子，如需要，可在配方中補(bǔ)充1mMCaCl2和0.5mMMgCl2。6)10M醋酸銨組份濃度：10M醋酸銨配制量：100ml配制方法：1.稱量77.1g醋酸銨置于100～200ml燒杯中，加入約30ml的去離子水?dāng)嚢枞芙狻?.加去離子水將溶液定容至100ml。3.使用0.22mm濾膜過(guò)濾除菌。4.密封瓶口于室溫保存。注意：醋酸銨受熱易分解，所以不能高
7、溫高壓滅菌。7)苯酚/氯仿/異戊醇(25:24:1)配制方法：1.說(shuō)明：從核酸樣品中除去蛋白質(zhì)時(shí)常常使用苯酚/氯仿/異戊醇（25:24:1)。氯仿可使蛋白質(zhì)變性并有助于液相與有機(jī)相的分離，而異戊醇則有助于消除抽提過(guò)程中出現(xiàn)的氣泡。2.配制方法：將Tris-HCl平衡苯酚與等體積的氯仿/異戊醇（24:1）混合均勻后，移入棕色玻璃瓶中4℃保存。8）10％(W/V)SDS組份濃度：10％(W/V)SDS配制量：100ml配制方法：1.稱量10g高純度的SDS置于100-200ml燒杯中，加入約80ml的去離子水，68℃加入溶解2.滴加濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至7.23.將
8、溶液定容至100ml后，室溫保存。9）2NNaOH組
