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《銅離子對兩棲動物的毒性影響》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、銅離子對兩棲動物的毒性影響這篇文章的目的是從形態(tài)和分子方面共同闡述銅離子對兩棲動物的毒性影響。從4個(gè)方面去研究銅離子的影響。(一)急性毒性1.觀察記錄在不同濃度下,中華大蟾蜍和中國林蛙的死亡率,通過半致死劑量來說明這兩種物種急性毒性的差別及敏感性程度。2.分別取中華大蟾蜍和中國林蛙正常組10只,稱量其體重,并解剖取肝臟進(jìn)行稱量,計(jì)算這兩種物質(zhì)的肝重/體重的比值,通過比值來說明這兩種物種的肝臟解毒能力,來進(jìn)一步解釋說明不同的敏感程度,以及對環(huán)境的適應(yīng)性。3.分別對中華大蟾蜍和中國林蛙皮膚進(jìn)行組織學(xué)觀察,研究其皮膚對污染物的滲透能力,進(jìn)一步闡明二、游泳行為在半致
2、死劑量的前提下,獲得亞致死濃度和安全濃度。在亞致死濃度范圍內(nèi),觀察這兩種物種的游泳行為,參照文獻(xiàn),可分為3種不同的游泳行為:Break、Sinking、Cruising、每1個(gè)小時(shí)觀察一次,記錄蝌蚪這3種行為的百分比。三、游泳速率通過觀察計(jì)算不同濃度組中蝌蚪的游泳速率,來說明不同濃度對蝌蚪的毒性影響。其次比較相同濃度組中中華大蟾蜍和中國林蛙的游泳速率,研究這兩種物種對銅離子的敏感程度。四、遺傳毒性1、通過微核測定的方法檢測銅離子是否會對兩棲動物引起遺傳毒性。微核測定法是一種簡便的遺傳毒理學(xué)方法,目前已較廣泛地用來檢測和監(jiān)察各種理化因子對機(jī)體的致癌、致突變效應(yīng)
3、。通過微核測定的方法,檢測銅離子誘發(fā)中華大蟾蜍和中國林蛙血液中紅細(xì)胞微核的數(shù)目異常情況,說明銅離子造成的遺傳毒性。2、彗星電泳(CometAssay):彗星試驗(yàn)是一種測定和研究單個(gè)細(xì)胞DNA鏈斷裂的新電泳技術(shù),該技術(shù)是先用瓊脂糖凝膠將細(xì)胞包埋在載玻片上,在裂解液作用下,細(xì)胞膜、核膜及其他生物膜破壞,使細(xì)胞內(nèi)的RNA、蛋白質(zhì)等通過凝膠擴(kuò)散到裂解液中,唯獨(dú)核DNA仍保持纏繞的環(huán)區(qū)(Loop)附著在剩余的核骨架上,留在原位。如果細(xì)胞受到損傷,電泳即可出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象。最后,在熒光顯微鏡下,觀察單細(xì)胞電泳圖像,每片記數(shù)25~50個(gè)細(xì)胞,每個(gè)劑量組檢查100個(gè)細(xì)胞。通過觀
4、察尾長和尾距來測定DNA的損傷程度。尾長(taillength)即DNA遷移的長度,在低損傷劑量范圍內(nèi)與DNA損傷呈線性關(guān)系;尾矩(tailmoment)即尾長與尾部DNA百分含量之乘積,在高損傷劑量下與損傷程度呈線性關(guān)系。