萱草愈傷組織芽分化培養(yǎng)基的篩選開題報(bào)告

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1、開題報(bào)告萱草愈傷組織芽分化培養(yǎng)基的篩選一、選題的背景、意義萱草HemerocallisfulvaL.系百合科(Liliacea)多年生草本植物,以根及根莖入藥,為我國傳統(tǒng)中藥“萱草根(Ra2dixHemerocallis)”,具有清熱涼血、利尿通淋的功效,用于治療水腫、小便不利、淋濁、帶下、黃疸、便血、崩漏等癥[1-2]。　　又名金針菜,原產(chǎn)我國、日本及歐洲南部。萱草葉狹長,花呈喇叭形,花莖變化大,花形各異,花期從晚春一直到秋季,盛花期可延續(xù)幾個(gè)月。它不僅供人觀賞,也可將花蕾作蔬菜供人食用,更是被廣泛用于綠化工程,近年來市場(chǎng)對(duì)萱草種苗的需求越來越大。從2003年始,我站承擔(dān)了嘉興市科

2、技局、海鹽縣科技局下達(dá)的“萱草等宿根花卉的組培苗快繁及產(chǎn)業(yè)化開發(fā)”等科研課題,對(duì)萱草等品種進(jìn)行了組培快繁試驗(yàn)研究,獲得成功,到目前已累計(jì)生產(chǎn)了紅運(yùn)、金娃娃等50多萬株的萱草,并供應(yīng)上海、杭州等地,在較短的時(shí)間內(nèi)滿足客戶的需求。近年來，我國城市環(huán)境保護(hù)中的綠化建設(shè)越來越受到重視，其中急需解決的是綠境植物多樣性問題，我國的花卉栽培以前在世界上是有名的，而且花卉品種甚多，但是由于歷史原因，國內(nèi)現(xiàn)有的花卉生產(chǎn)情況與人民生活水平的提高是不相適應(yīng)的，因此，引進(jìn)國外優(yōu)良花卉品種，可以加快解決我國城市綠化中花境植物品種單一的現(xiàn)狀。組培法篩選高抗鹽植物是現(xiàn)代生物技術(shù)之一,利用離體再生系統(tǒng)結(jié)合選育新品種

3、具有簡(jiǎn)便、速度快、準(zhǔn)確的特點(diǎn)。近年來研究表明萱草根中含有多種蒽醌類和二氫呋喃-γ-內(nèi)酰銨類化合物,這些成分具有抗菌、抗癌、殺蟲等生物活性[3]。萱草不僅具有藥用價(jià)值,還具有蔬菜食用和花卉觀賞價(jià)值。其花經(jīng)過加工后是頗負(fù)盛名的“黃花菜”、“金針菜”,營養(yǎng)豐富,且具有保健益壽之功。萱草組織培養(yǎng)的是基于觀賞花卉品種的快速繁殖技術(shù)的實(shí)驗(yàn)研究[4-6],因此,借鑒這些研究成果,對(duì)藥用植物萱草開展了組織培養(yǎng)技術(shù)方面前期實(shí)驗(yàn)工作,期望為進(jìn)一步研究其藥材質(zhì)以及開發(fā)中藥功能保健類蔬菜奠定基礎(chǔ)?！?】二、最新研究進(jìn)展近年來,利用植物組織培養(yǎng)技術(shù),成功地獲得了許多植物的抗鹽培養(yǎng)細(xì)胞系,并且選擇出了水稻、小麥

4、和冰草等植物的耐鹽植株。[8]該試驗(yàn)對(duì)大花萱草抗鹽愈傷組織的選擇試驗(yàn)表明,利用濃度逐級(jí)增高的含鹽培養(yǎng)基誘導(dǎo)和選擇的愈傷組織,在鹽份濃度較高的培養(yǎng)基上,無論生長率還是存活率均明顯提高?？果}性大小與在含鹽培養(yǎng)基上培養(yǎng)的時(shí)間長短有關(guān)。愈傷組織的這種抗鹽性具一定程度的穩(wěn)定性。抗鹽變異產(chǎn)生的原因可能有兩個(gè)方面,一是在低水平選擇壓力下,可能產(chǎn)生了生理適應(yīng)的細(xì)胞;二是在高水平選擇壓力下經(jīng)長時(shí)間選擇培養(yǎng),可能產(chǎn)生遺傳上變異的細(xì)胞。這種遺傳上發(fā)生的變異一般是穩(wěn)定的,該試驗(yàn)通過大花萱草組培苗的抗性培養(yǎng)基上抗性比較,證明了鹽脅迫與繁殖系數(shù)、生物產(chǎn)量有一定的相關(guān)性,并確定的適合的鹽篩選濃度,并確定脯氨酸能反

5、應(yīng)出組培苗在鹽脅迫過程中的生理變化。[9]通過組織培養(yǎng)技術(shù)可以快速生產(chǎn)出發(fā)育健壯的金娃娃萱草苗。其誘導(dǎo)愈傷組織和形成叢生芽的最佳外植體為花蕾;最佳誘導(dǎo)和繼代培養(yǎng)基均為MS+6-BA1.0mg/L+KT1.0mg/L+IBA0.5mg/L,最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA0.1mg/L;生根試管苗根系長至1.5cm以上時(shí),移栽成活率高達(dá)90.0%以上?！?0】自然界的萱草一般采用分蘗等無性繁殖方式進(jìn)行增殖,但由于其速度慢，一般一株萱草每年僅可繁殖4-5株，因而難以適應(yīng)市場(chǎng)商品化生產(chǎn)的需求,利用組織培養(yǎng)技術(shù)快速繁育試管苗，是一項(xiàng)目前被廣泛應(yīng)用于花卉生產(chǎn)的技術(shù),雖然組織培養(yǎng)技術(shù)快速繁殖試

6、管苗存在生產(chǎn)成本高、試管苗出現(xiàn)變異植株等問題，但是采用組織培養(yǎng)繁殖可以提高繁殖倍數(shù)，而且可以打破季節(jié)局限，加快繁殖速度，實(shí)現(xiàn)工廠化育苗,因此，組織培養(yǎng)繁殖技術(shù)在挽救瀕危稀有植物品種、由于引種植物品種母本植株少而急需擴(kuò)繁以增加生產(chǎn)規(guī)模等方面發(fā)揮著巨大作用。前人對(duì)于萱草組織培養(yǎng)的研究，僅見有少量簡(jiǎn)短的報(bào)道【11-14】而未見到有關(guān)觀賞型大花萱草的工廠化擴(kuò)繁方面的報(bào)道,本文就9種觀賞型大花萱草外植體的選擇和愈傷組織的誘導(dǎo)進(jìn)行了研究，以期為合作企業(yè)提供相關(guān)環(huán)節(jié)的技術(shù)參數(shù)，為企業(yè)進(jìn)一步大規(guī)模組織培養(yǎng)擴(kuò)繁萱草提供技術(shù)指導(dǎo)?！?5】三、研究的基本內(nèi)容通過設(shè)計(jì)所得的實(shí)驗(yàn)方案，確定合適的實(shí)驗(yàn)方法。將萱

7、草愈傷組織在選擇性培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖，進(jìn)行目的篩選，保存后進(jìn)行一系列的篩選，對(duì)篩選出來的培養(yǎng)基進(jìn)行性能鑒定和成分鑒定，確定所選培養(yǎng)基。四、擬采取的研究方法（技術(shù)路線）、研究難點(diǎn)及預(yù)期達(dá)到的目標(biāo)1技術(shù)路線1.1外植體的選擇選取以上各萱草品種的葉片（切成2×3cm大?。⑶o尖、根（側(cè)根切成2±0.5cm長，主根橫切為半徑1±0.5cm的園片）和子房（橫切為3段），經(jīng)流水沖洗，70%乙醇浸2-3遍后，蒸餾水沖洗2-3次，再用0.1%HgCl2滅菌8-10mins，