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《植物體內(nèi)微量多胺的分離和測定.pdf》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、,以上表明產(chǎn)生菌的固體發(fā)酵產(chǎn)物,,訊。,人,。,具有某些生理活性文獻(xiàn)報(bào)道液體培養(yǎng)法中毖以讓枷十加勸的合成培養(yǎng)基和光質(zhì)控制可促進(jìn)朋的產(chǎn)詳,生。本法的發(fā)酵周期雖比液體培養(yǎng)略長些,但,,討以比,其產(chǎn)物的效用則與液體培養(yǎng)方法相同因而。砂夢也可以用于研究的生理功能出,出,們,祖滋一義,參考文獻(xiàn),,組五視己吳少伯,趙毓桔一節(jié)氨基嗦嶺和脫落酸對離體葉片過司叩時(shí)飾妙以斗氧化物酶同工酶的影響植物生理學(xué)通譏,“少如,,對召應(yīng)逆版期昊少伯載體蛋白結(jié)合的數(shù)目測定植物生理學(xué)通植物叮了仇”左扣應(yīng)漢,生理學(xué)通訊腸筍嫩惻腸洲一植物體內(nèi)微量多胺的分離和測定,韋軍江蘇農(nóng)學(xué)院園藝系揚(yáng)州,,王習(xí)已,廠喲娜咖咧
2、可刀分飯左腳滋山嘟見灘尹應(yīng)破腳硯凸蔽,,州陰目前對植物組織內(nèi)多胺的含量主要是將器皿內(nèi)壁涂上一層,在?！嫦潞胬媛暋Ｖ参锊牧系闹苯犹崛∫汉捅郊滋然蚝偷せ菑孛?,“二果實(shí)由市場購得酸氯反應(yīng)后,利用高效液相色譜儀測定川。此多胺的抽提、,方法在測定多胺含量較高的胚芽和幼果時(shí)取梨果肉加入冷,‘,,尚可但對含量較少的材料如開花后一個(gè)月溶液后勻漿在冰浴中靜置再,?！嫦乱噪x心,的果實(shí)則無法測定本文采用陽離子交換樹在一抽提。脂來分離和濃縮多胺對和閉液置于一℃下保存待用,離子交換柱的方法作了改進(jìn)用以測定梨果實(shí)中微量的的制備和預(yù)處理,,。,多胺減少了干擾提高了靈敏度稱取樹脂用以制作離子交換柱
3、玻璃管尺寸為,并進(jìn)行預(yù)處材料與方法,理過柱順序?yàn)槿芤夯瘜W(xué)試劑和植物材料蒸餾水溶液丁二胺、亞精胺、精胺的氯化物、陽離子蒸餾水溶液,一交換樹脂和微孔過濾柱,一一為公司產(chǎn)品苯甲酸氯為日本和光純收稿藥化學(xué)工業(yè)株式會社產(chǎn)品。使用的玻璃器皿致謝此項(xiàng)工作在日本鳥取大學(xué)園藝學(xué)研究室進(jìn)行得到,。田邊賢二教授的支持和幫助全部經(jīng)硅化處理用溶液將玻璃溶液、釋倍,再將此濃度為’勺溶液溶液蒸餾多胺標(biāo)準(zhǔn)液通過陽離子交換柱和減壓蒸餾后。水。的測定結(jié)果從表中可見方式的靈敏,,多胺抽提液的濃縮度很高因?yàn)榉绞綗o法檢測濃度只有。整個(gè)過程流速為,過柱順序?yàn)榧吹亩喟窐?biāo)準(zhǔn)液盡管兩種測定方式所測一標(biāo)準(zhǔn)液或果實(shí)抽提液多
4、胺標(biāo)準(zhǔn)液的濃度相差倍,但由于陽離,蒸餾水一一溶液以子交換和減壓蒸餾過程對多胺的濃縮效應(yīng),。一溶液配制一兩種測定方式的峰高差異并不大兩種方。,溶液溶液式測得的多胺絕對含量雖然相同但方式得到的洗脫液留待測定。所測峰的高度要比方式降低左右這多胺的測定顯然是多胺在陽離子交換和減壓蒸餾過程中將的損失所造成。這種損失可提高多胺測定的上述洗脫液倒入燒瓶中在,。,。而且下減壓濃縮至干燥加入寫靈敏度也是值得的的差異屬系溶液充分洗滌燒瓶后,移入離心管中,再向離統(tǒng)誤差,可以校正。故方式測定結(jié)果的精度。以并不受影響心管內(nèi)加入溶液和,,苯甲酞氯天旋渦振蕩在常溫,一表兩下靜置然后加入飽和溶種不同方
5、式測定多胺液和,,標(biāo)準(zhǔn)液終高的比較乙醚再以離心抽,取而上清液放入試樣瓶內(nèi)在真空冷凍機(jī)蜂高方式方式一乃,夕污,日,中嚇燥加入甲醉充分洗滌試樣瓶再一將,洗滌液通過微孔過濾柱將此過濾液放弓,以,棄再用蒸餾水重新通過微孔過濾柱岡過濾液留待測定。高效液相色譜儀測定條件假設(shè)測駿方法成對比較假設(shè)測驗(yàn)。分光檢測器為日立一型,泵為日一立型分離柱為日立逆相陽離子交換過程減少多胺測定中其它成,。、,分離柱義理論段分干擾的原因,‘,數(shù)為保持能為峰對稱值陽離子交換樹脂只能吸附抽提液的陽離,一,,。,為流動相為甲醇水柱溫子不能吸附陰離子和中性物質(zhì)因此在抽℃,林,,,流速為而測定波長為提液通過交換柱
6、后其中的陰離子和中性物,。、、、靈敏度為進(jìn)樣量川質(zhì)如有機(jī)酸各種糖類蛋白質(zhì)中性和酸性氨基酸等都不能與陽離子交換樹脂的離子結(jié)果與討論,。交換很快就流出交換柱此時(shí)吸附在交換樹陽離子交換和減壓濃縮過程對多胺測定脂上的陽離子有多胺、堿性氨基酸、金屬離子靈敏度的影響和其它一些帶正電荷的有機(jī)分子。在這些陽,以,表是用多胺標(biāo)準(zhǔn)液兩種不離子成分中因多胺一般具有兩個(gè)或兩個(gè)以。,同方式測定的組峰高的平均數(shù)的比較方上的氨基是一種能夠強(qiáng)烈電離的有機(jī)小分式為多胺標(biāo)準(zhǔn)液的直接測定子,因此,它與陽離子交換樹脂的親合力最,結(jié)果方式為將多胺標(biāo)準(zhǔn)液稀強(qiáng)即最容易牢固地吸附在陽離子交換樹脂··。產(chǎn)。七本文中用磷
7、酸緩沖液和川鹽酸溶擇吸附效率下降抽提液應(yīng)經(jīng)過離子交換,,,、液通過交換柱的目的就是先將與陽離子交換柱后才能進(jìn)行減壓濃縮否則大量的糖類,樹脂親合力較弱的陽離子逐步洗脫下來這,氨基酸和其它雜質(zhì)就會和多胺混在一起其時(shí)吸附在交換樹脂上的陽離子主要是多胺類中有,些雜質(zhì)也含有氨基易對多胺的苯甲酞。,。,、物質(zhì)在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)多胺與陽離子交換樹脂化反應(yīng)造成干擾此外有些植物材料中糖,以,,的親合力極強(qiáng)至于的鹽酸溶液有機(jī)酸等雜質(zhì)含量很高極易污染色譜柱以。。也不能將多胺完全置換出來只有川毛致柱的使用壽命縮短而且這些雜質(zhì)的保留。,的鹽酸溶液才能將多胺完全洗脫下來本
