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1、生化分析儀維修基礎(chǔ)原理與實(shí)現(xiàn)篇鄭振寰yeec2生化分析儀維修基礎(chǔ)原理與實(shí)現(xiàn)篇目錄1、朗伯-比爾定律2、生化試劑相關(guān)基礎(chǔ)3、生化分析儀的實(shí)現(xiàn)4、生化反應(yīng)的監(jiān)測(cè)5、生化反應(yīng)方法6、生化校準(zhǔn)方法7、數(shù)據(jù)檢查8、質(zhì)控9、結(jié)果問題10、水機(jī)相關(guān)知識(shí)11、生化儀的性能驗(yàn)證知識(shí)12、項(xiàng)目性能驗(yàn)證知識(shí)yeec目錄31、朗伯-比爾定律A=lg(1/T)=Kbc=lg(Io/It)朗伯-比爾定律是生化儀的理論基礎(chǔ)。其中,A:吸光度,縮寫Abs/OD,無單位布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后在T:透射比1729年和1760年闡明了物質(zhì)對(duì)光的吸收程度K:吸光系數(shù),L/(g·cm)與吸收層厚度之間的
2、關(guān)系;B:溶液厚度,cm比爾(beer)于1852年又提出光的吸收程度C:溶液濃度,g/L與吸光物質(zhì)濃度之間也有類似的關(guān)系;Io:透射光強(qiáng)度,cd(坎德拉/新燭光)二者結(jié)合起來就得到了朗伯-比爾定律。It:入射光強(qiáng)度,cd該定律奠定了分光光度分析法的理論基礎(chǔ)。當(dāng)一束平行的單色光垂直通過某一均勻的、非散射的吸光物質(zhì)溶液時(shí),其吸光度(A)與溶液入射光的強(qiáng)度為I0,吸收光的強(qiáng)度為Ia,透過光液層厚度(b)和濃度(c)的乘積成正比。它不僅的強(qiáng)度為It,反射光的強(qiáng)度為Ir,那么適用于溶液,也適用于均勻的氣體、固體狀態(tài),I0=Ia+It+Ir是各類光吸收的基本定律,也是各類分光光度在分光光度測(cè)定中,比
3、色皿都是采用相同材質(zhì)法進(jìn)行定量分析的依據(jù)。的光學(xué)玻璃制成的,反射光的強(qiáng)度基本上是不變的(一般約為入射光強(qiáng)度的4%)其影響可以互相抵消,于是可以簡(jiǎn)化為:I0=Ia+It,又因純水對(duì)于可見光的吸收極微,故有色液對(duì)光的吸收完全是由溶液中的有色質(zhì)點(diǎn)造成的。所以,當(dāng)入射光的強(qiáng)度I0一定時(shí),如果Ia越大,It就越小,即透過光的強(qiáng)度越小,表明有色溶液對(duì)光的吸收程度就越大。yeec生化分析儀維修基礎(chǔ)-原理與實(shí)現(xiàn)篇1、朗伯-比爾定律4根據(jù)比爾-朗伯定律,當(dāng)吸收介質(zhì)厚度不變時(shí),A與c之間應(yīng)該成正比關(guān)系,但實(shí)際測(cè)定時(shí),標(biāo)準(zhǔn)曲線常會(huì)出現(xiàn)偏離比爾-朗伯定律的現(xiàn)象,有時(shí)向濃度軸彎曲(負(fù)偏離),有時(shí)向吸光度軸彎曲(正偏
4、離)。造成偏離的原因是多方面的,其主要原因是測(cè)定時(shí)的實(shí)際情況不完全符合使比爾-朗伯定律成立的前提條件。比爾-朗伯定律的成立是有前提的,即:物理因素有:1、入射光為平行單色光且垂直照射;1、非單色光引起的偏離;2、吸光物質(zhì)為均勻非散射體系;2、非平行入射光引起的偏離;3、吸光質(zhì)點(diǎn)之間無相互作用;3、介質(zhì)不均勻引起的偏離;4、輻射與物質(zhì)之間的作用僅限于光吸收過程,化學(xué)因素有:無熒光和光化學(xué)現(xiàn)象發(fā)生。1、溶液濃度過高引起的偏離;2、化學(xué)反應(yīng)(如水解、解離)引起的偏離;yeec生化分析儀維修基礎(chǔ)-原理與實(shí)現(xiàn)篇1、朗伯-比爾定律5根據(jù)朗伯-比爾定律衍生出比濁法。比濁法又稱濁度測(cè)定法。為測(cè)量透過懸浮質(zhì)
5、點(diǎn)介質(zhì)的光強(qiáng)度來確定懸浮物質(zhì)濃度的方法,這是一種光散射測(cè)量技術(shù)。比濁法的原理是:懸浮顆粒在液體中造成透射光的減弱,減弱的程度與懸浮顆粒的量相關(guān),據(jù)此可定量測(cè)定物質(zhì)在溶液中呈懸浮狀態(tài)時(shí)濃度的方法。比濁法分類:免疫比濁法,散射比濁法,光掃描比濁法,乳膠比濁法,光電比濁法,微生物比濁法等十余類。比濁法主要是用于測(cè)定能形成懸浮體的沉淀物質(zhì),例如微量磷、硫、氯和鈣等的測(cè)定,生物堿沉淀試劑形成的混濁也可用此法測(cè)定。這是根據(jù)懸浮體的透射光或散射光的強(qiáng)度以測(cè)定物質(zhì)組分含量的一種分析方法。當(dāng)光線通過一混濁溶液時(shí),因懸浮體選擇地吸收了一部分光能,并且懸浮體向各個(gè)方面散射了另一部分光線,減弱了透過光線的強(qiáng)度。y
6、eec生化分析儀維修基礎(chǔ)-原理與實(shí)現(xiàn)篇1、朗伯-比爾定律62、生化試劑相關(guān)基礎(chǔ)目前試劑大多為液體試劑,有單試劑、雙試劑,不同的機(jī)型可能還有三試劑等?;瘜W(xué)檢測(cè)方法大致有:雙縮脲法、溴甲酚綠染根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目和機(jī)型的不同,其包裝也不相同,料結(jié)合法、釩酸鹽氧化法、重氮偶合法、酶循也有通用包裝型的,手工倒入機(jī)內(nèi)試劑瓶。環(huán)法、酶偶聯(lián)反應(yīng)法、葡萄糖氧化酶法、苦味酸反應(yīng)法、免疫比濁法、乳膠增強(qiáng)比濁法。其他衍生方法和已經(jīng)淘汰的方法單試劑存在抗干擾能力差的特點(diǎn),會(huì)帶來分AMP緩沖液法DGKC94年標(biāo)準(zhǔn)方法析誤差。而雙試劑準(zhǔn)確性較高,消除了樣品CHOD-PAP法化學(xué)修飾酶法的內(nèi)源性干擾,在終點(diǎn)法測(cè)試中,能消除樣G
7、PO-PAP法(脂蛋白脂肪酶-甘油磷酸氧化酶-過品空白(脂濁、溶血、黃疸等干擾物質(zhì))、比氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法)色杯等因素的影響,提高了測(cè)定的準(zhǔn)確性,直接法肌氨酸氧化酶法并且試劑穩(wěn)定:試劑1(R1)、試劑2(R2)分開UV酶法己糖激酶法保存,提高試劑的穩(wěn)定性。IFCC推薦方法偶氮胂法二甲苯胺藍(lán)法硫氰酸汞法生化試劑的上機(jī)要點(diǎn):FERENE法PEP-C法單、雙試劑的選擇。EPS速率法CNP-G3生化儀的型號(hào):選擇適