凝集、沉淀反應.ppt

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1、凝集、沉淀反應實驗目的1掌握直接凝集反應的原理意義及操作方法2了解雙向瓊脂擴散試驗的原理意義及操作方法實驗內容1直接凝集反應玻片法2雙向瓊脂擴散試驗實驗原理直接凝集反應：顆粒性抗原懸液與其相應抗體，在有適量電解質的環(huán)境中，兩者直接特異性結合，進一步凝集成肉眼可見的凝集塊。沉淀反應：可溶性抗原與相應抗體特異性結合，兩者比例適當并有電解質存在及其一定的溫度條件下，經一定的時間，可形成肉眼可見的沉淀物，在瓊脂板上雙方結合出現(xiàn)白色沉淀線。實驗用品瓊脂板，打孔器，酒精燈，毛細吸管，診斷血清，對照抗原，待檢血清，濕盒，37℃溫箱，雙凹玻片，傷寒診

2、斷血清，生理鹽水，待檢菌液等。實驗方法直接凝集反應玻片法1先標記雙凹玻片，兩側分別為1，2號，在1號凹內加入傷寒診斷血清1滴，在2號凹內加入生理鹽水1滴。2分別加入待檢菌液于兩凹內各1滴3搖動混勻2分鐘，觀察結果雙向瓊脂擴散試驗1鋪板：將溶化之1﹪瓊脂5ml鋪于潔凈玻片上。2打孔：在瓊脂板上打7個孔。3封底：把瓊脂板通過火焰三次。4加樣：把抗體1滴加于中央孔，把對照抗原加于上下兩孔（6點，12點），把待檢血清（肝癌病人血清）加于右側孔內，左側孔留作空白對照。5孵育：將加樣后的瓊脂板放在濕盒內，放入37℃溫箱孵育24h，取出觀察結果。實

3、驗結果與分析：1直接凝集反應玻片法：1號凹內出現(xiàn)凝集顆粒，2號凹內均勻混濁不出現(xiàn)顆粒。2雙向瓊脂擴散試驗：兩對照抗原孔和抗體孔之間出現(xiàn)白色沉淀線，待檢血清孔（2點，4點）和中央抗體孔之間亦出現(xiàn)白色沉淀線為陽性反應實驗注意事項：1直接凝集反應玻片法搖動玻片時不要把兩凹內液體混在一起。2雙向瓊脂擴散試驗要注意加樣要加滿而不溢出為止。作業(yè)1寫出實驗報告2分析凝集反應的結果和意義3繪出雙向瓊脂擴散試驗結果圖