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1、實驗五藥物對離體腸運動的影響一、實驗原理本實驗制備兔離體腸道標本,與張力換能器相連,在BL-420型生物信號顯示與處理系統(tǒng)上顯示用藥后的腸運動狀態(tài)(張力、幅度和節(jié)律),從而觀察藥物對離體腸運動的影響。二、實驗?zāi)康膶W(xué)習(xí)兔離體腸道標本的制備方法觀察藥物對離體兔腸運動的影響三、實驗材料(一)動物家兔(二)器材BL-420型生物信號顯示與處理系統(tǒng),數(shù)顯恒溫平滑肌槽,術(shù)剪,眼科鑷,注射器,培養(yǎng)皿,縫針,棉線。(三)藥品0.05%硫酸新斯的明,0.01%腎上腺素,0.05%硫酸阿托品,0.001%乙酰膽堿,臺氏液,未知名的藥物(XGJ)四、實驗步驟與觀察項目離體兔腸段標本的制備:取空腹家兔1只,左手持髂
2、上部,右手握木棒,猛擊枕骨部致死。迅速開腹,自幽門下6cm處剪取空腸,立即置入盛有冷臺氏液的培養(yǎng)皿中,剪去腸系膜,清洗腸內(nèi)容物,將腸管剪成2~3cm的小段,兩端各穿一線備用。2.連接實驗裝置標本一端用線系于Z型溝的彎鉤上,并置于數(shù)顯恒溫肌槽的內(nèi)槽中,另一端系在已調(diào)好的BL-420型記錄儀的張力換能器上,緩緩?fù)ㄈ肟諝猓棵腌姎馀?~2個)。浴槽的營養(yǎng)液以能浸沒標本為宜。水浴溫度為38±0.5℃。3.軟件操作打開分機,再開電腦。點擊打開BL-420型生物信號顯示與處理系統(tǒng)→點擊“實驗項目”→“消化實驗”→“消化道平滑肌的生理特性”,編輯標記條。4.實驗步驟1.待離體腸適應(yīng)后(收縮張力和頻率規(guī)則后
3、),打開記錄儀描記一段離體小腸平滑肌的正常收縮曲線,注意觀察腸平滑肌張力及收縮幅度的變化情況。2.給藥記錄正常曲線后,在藥槽中加入0.05%硫酸新斯的明0.5ml,觀察腸平滑肌張力及收縮幅度的變化情況,放掉藥槽中的臺氏液,加入預(yù)先準備好的38℃新鮮臺氏液,重復(fù)更換2~3次新鮮臺氏液,待腸段活動恢復(fù)至對照水平時,進行下一項實驗。在藥槽中加入0.01%腎上腺素2~4滴,觀察腸平滑肌張力及收縮幅度的變化情況。后續(xù)處理同上。在藥槽中加入0.001%乙酰膽堿2~4滴,觀察后續(xù)處理同上。觀察及后續(xù)處理同上。在藥數(shù)顯恒溫平滑肌槽中加入0.05%阿托品2~4滴,待作用明顯后,描記變化情況,立即加入0.001
4、%乙酰膽堿2~4滴,后續(xù)處理同上。滴加XGJ2~4滴,觀察腸平滑肌張力及收縮幅度的變化情況。五.實驗結(jié)果對圖形進行分析,比較給藥前和給藥后離體腸收縮曲線的張力、強度(幅度)、頻率(次/10分鐘),分析討論藥物對離體腸作用的特點和機理。打印曲線并粘貼在實驗報告上。六.注意事項1.游離及取出腸段時,動作要快,要輕柔。為保持離體腸段的活性,游離腸段及穿線在預(yù)冷的營養(yǎng)液中進行。2.懸掛腸段不宜在空氣中暴露過久,以免影響其活性。3.加藥時不要把藥液直接加到腸管上,以免影響結(jié)果。4.記錄電位時,要保持安靜,避免振動實驗臺,以免影響實驗結(jié)果。七.思考題1.進行哺乳類動物離體組織器官實驗時,需控制哪些條件?
5、2.加入阿托品后再加入乙酰膽堿,腸段活動將如何變化,為什么?八.創(chuàng)新與探索設(shè)計實驗,觀察致瀉藥或止瀉藥物對離體腸段平滑肌的影響。九.實驗報告書寫實驗報告時除需遵守以前的要求外,還必須打印出不同組腸運動曲線,并對實驗結(jié)果進行分析。實驗設(shè)計隨實驗報告交上來。介紹數(shù)顯恒溫平滑肌槽1.控氧:打開供氧開關(guān),調(diào)節(jié)通氣量,以每秒鐘氣泡1~2個為宜;2.控溫:打開設(shè)定開關(guān),設(shè)定為37℃,調(diào)節(jié)恒溫開關(guān)加熱;關(guān)閉設(shè)定開關(guān),打開測量開關(guān),檢測溫度,當(dāng)溫度顯示為37℃時,將恒溫旋鈕調(diào)至最低,此時開始保持恒溫。由于很多儀器的數(shù)顯不很準確,為避免影響實驗,用溫度計進行監(jiān)控是可靠的辦法。3.沖洗:(1)放出內(nèi)槽中的溶液:
6、用夾子夾緊保溫液和營養(yǎng)液之間的膠管,阻斷水流。打開調(diào)節(jié)閥一,內(nèi)槽溶液從換液口流出;(2)補充內(nèi)槽溶液:待內(nèi)槽溶液流盡后,關(guān)閉調(diào)節(jié)閥一,并用夾子夾住換液口的膠管,打開調(diào)節(jié)閥二,松開保溫液與營養(yǎng)液之間膠管的夾子,溶液從外槽流向內(nèi)槽。如此反復(fù)3次,即可將內(nèi)槽中的藥液沖洗干凈。