旋毛蟲鏡檢法.doc

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1、旋毛蟲病肉品檢驗技術(shù)旋毛蟲病是重要的人畜共患寄生蟲病，它是由毛形科的旋毛形線蟲（Trichinella?spiralis）成蟲寄生于腸管，幼蟲寄生于橫紋肌所引起的。該病流行于哺乳類動物間，鳥類可實驗感染。人若攝食了生的或未煮熟的含旋毛蟲包囊的豬肉可感染生病，主要臨床表現(xiàn)為胃腸道癥狀、發(fā)熱、肌痛、水腫和血液嗜酸性粒細胞增多等，嚴(yán)重者可以導(dǎo)致死亡，故肉品衛(wèi)生檢驗中將旋毛蟲列為首要項目。旋毛蟲病的肉品檢驗是生豬屠宰檢疫中的一項重要內(nèi)容，通過該項檢驗可以檢出感染旋毛蟲的豬只。對于杜絕病豬肉流入肉品市場，有著重要的作用。?一、實驗?zāi)康募耙?1．掌握肌肉旋毛蟲壓片鏡檢法、消化法的操作方法

2、。?2．了解酶聯(lián)免疫吸附試驗的方法。?3．掌握旋毛蟲病肉的處理方法。?二、實驗器材?（一）旋毛蟲壓片鏡檢法?1．材料：被檢肉品。?2．器材：載玻片，剪刀，鑷子，天平，顯微鏡。?3．試劑：50%甘油水溶液，10%稀鹽酸。?旋毛蟲壓片鏡檢法1．采樣。自胴體左右兩側(cè)橫膈膜的膈肌腳（見圖21-1），各采膈肌1塊（與胴體編成相同號碼），每塊肉樣不少于20g，記為一份肉樣，送至檢驗臺檢查。如果被檢樣品為部分胴體，則可從肋間肌、腰肌、咬肌等處采樣。?2．肉眼檢查。4撕去被檢樣品肌膜，將肌肉拉平，在良好的光線下仔細檢查表面有無可疑的旋毛蟲病灶（見圖21-2）。未鈣化的包囊呈露滴狀，半透明，細針

3、尖大小，較肌肉的色澤淡；隨著包囊形成時間的增加，色澤逐步變深而為乳白色、灰白色或黃白色。若見可疑病灶時，做好記錄且告知總檢將可疑肉尸隔離，待壓片鏡檢后做出處理決定。?3．制片。取清潔載玻片1塊放于檢驗臺上，并盡量靠近檢驗者。用鑷子夾住肉樣順著肌纖維方向?qū)⒖梢刹糠旨粝隆Ｈ绻麩o可疑病灶的，則順著肌纖維方向在肉塊的不同部位剪取12個麥粒大小的肉粒（2塊肉樣共剪取24個小肉粒）。將剪下的肉粒依次均勻地附貼于載玻片上且排成兩行，每行6粒。然后，再取一清潔載玻片蓋放在肉片的載玻片上，并用力適度捏住兩端輕輕加壓，把肉粒壓成很薄的薄片，以能通過肉片標(biāo)本看清下面報紙上的小字為標(biāo)準(zhǔn)。另一塊膈肌按上

4、法制作，兩片壓片標(biāo)本為一組進行鏡檢4．鏡檢。把壓片標(biāo)本放在低倍（4×10）顯微鏡下，從壓片的一端第一塊肉片處開始，順肌纖維依次檢查。鏡檢時應(yīng)注意光線的強弱及檢查速度，切勿漏檢。?5．結(jié)果判定。?（1）沒有形成包囊的幼蟲，在肌纖維之間呈直桿狀或逐漸蜷曲狀態(tài)，但有時因標(biāo)本壓得太緊，可使蟲體擠入壓出的肌漿中。?（2）包囊形成期的旋毛蟲，在淡黃色背景上，可看到發(fā)光透明的圓形或橢圓形物。包囊的內(nèi)外兩層主要由均質(zhì)透明蛋白質(zhì)和結(jié)締組織組成，囊中央是蜷曲的蟲體。成熟的包囊位于相鄰肌細胞所形成的梭形肌腔內(nèi)。?（3）發(fā)生機化現(xiàn)象的旋毛蟲。蟲體未形成包囊以前，包圍蟲體的肉芽組織逐漸增厚、變大，形成紡

5、錘形、橢圓形或圓形的肉芽腫。被包圍的蟲體有的結(jié)構(gòu)完整，有的破碎甚至完全消失。蟲體形成包囊后的機化，其病理過程與上述相似。由于機化灶透明度較差，需用50％甘油水溶液作透明處理，4即在肉粒上滴加數(shù)滴50%甘油水溶液，數(shù)分鐘后，肉片變得透明，再覆蓋上玻片壓緊觀察。?（4）鈣化的旋毛蟲。在包囊內(nèi)可見數(shù)量不等、濃淡不均的黑色鈣化物，包囊周圍有大量結(jié)締組織增生。由于鈣化的不同發(fā)展過程，有時可能看到下列變化：①包囊內(nèi)有不透明黑色鈣鹽顆粒沉著；②鈣鹽在包囊腔兩端沉著，逐漸向包囊中間擴展；③鈣鹽沉積于整個包囊腔，并波及蟲體，尚可見到模糊不清的蟲體或蟲體全部被鈣鹽沉著。此外，在鏡檢中有時也能見到由

6、蟲體開始鈣化逐漸擴展到包囊的鈣化過程（多數(shù)是由于蟲體死亡后而引起的鈣化）。發(fā)現(xiàn)鈣化旋毛蟲時，可以通過脫鈣處理，滴加10%稀鹽酸將鈣鹽溶解后，可見到蟲體及其痕跡，與包囊毗鄰的肌纖維變性，橫紋消失。?（5）鑒別診斷。在旋毛蟲檢驗時，往往會發(fā)現(xiàn)住肉孢子蟲和發(fā)育不完全的囊尾蚴，蟲體典型者，容易辨認，如發(fā)生鈣化，死亡或溶解現(xiàn)象時，則容易混淆，在檢查時可參4旋毛蟲、住肉孢子蟲、囊尾蚴肉眼檢查及鏡下區(qū)別項目旋毛蟲住肉孢子蟲囊尾蚴發(fā)育早期發(fā)育中期成熟期蟲?體?形?態(tài)呈灰白色半透明小點，包囊呈紡錘形，橢圓形，蟲體常蜷曲成S形或8字形呈灰白色或黃白色毛根狀小體。鏡下，米氏囊內(nèi)充滿香蕉形滋養(yǎng)體和卵圓

7、形孢子粟粒大到米粒大包囊，囊內(nèi)有可見的白色頭節(jié)。鏡下：頭節(jié)上有四個吸盤，尚無或有發(fā)育不全的角質(zhì)鉤黃豆大包囊，囊內(nèi)充滿無色液體，白色頭節(jié)如米粒大。鏡下：頭節(jié)上有四個吸盤和角質(zhì)鉤黃豆大包囊，囊內(nèi)充滿無色液體，白色頭節(jié)如米粒大。鏡下：頭節(jié)上有四個吸盤和角質(zhì)鉤寄?生?部?位多見于膈肌、肩胛肌、腰肌及腓腸肌等?骨骼肌、心肌。尤其以食道、腹部、股部等部位寄生最多?肩胛外肌、股部內(nèi)側(cè)肌、心肌、咬肌及腰肌等肩胛外肌、股部內(nèi)側(cè)肌、心肌、咬肌及腰肌等肩胛外肌、股部內(nèi)側(cè)肌、心肌、咬肌及腰肌等蟲體鈣化灶肉眼檢查針尖