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《植物組織培養(yǎng)教學課件 鄭永娟 第二章 試管苗快速繁殖 .ppt》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、第2章植物快速繁殖技術(shù)2.1試管苗快速繁殖意義和一般程序2.1.1試管苗快速繁殖意義試管苗快速繁殖，是指利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)對外植體進行離體培養(yǎng)，使其短期內(nèi)獲得遺傳性一致的大量再生植株的方法。試管苗快速繁殖是植物組織培養(yǎng)技術(shù)在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用最廣泛、產(chǎn)生經(jīng)濟效益最大的研究領(lǐng)域，涉及的植物種類繁多，技術(shù)日益成熟并程序化。2.1.2試管苗快速繁殖的一般程序一般選擇根、莖、葉器官為培養(yǎng)材料進行培養(yǎng)、壯苗與生根培養(yǎng)、試管苗馴化與移栽幾個環(huán)節(jié)。①研究根系生理代謝的優(yōu)良實驗體系②研究營養(yǎng)吸收、生長和代謝的變化規(guī)律③建立快
2、速生長的根無性系④進行誘變育種2.2器官培養(yǎng)2.2.1根的培養(yǎng)2.2.1.1根無性繁殖性的建立根無性繁殖系1.2cm接后1周側(cè)根反復轉(zhuǎn)接無菌種子2.2.1.2培養(yǎng)多為無機離子濃度低的懷特培養(yǎng)基。也可用2／3MS或1／2MS、B5培養(yǎng)基注：離體根生長要求提供全部必需元素，蔗糖、硝態(tài)氮效果好，加入B1、B6最重要，生長素對離體根影響不一致。培養(yǎng)溫度25－27℃，暗光培養(yǎng)。概念：切取莖的先端或莖尖分生組織進行無菌培養(yǎng)。意義：微莖尖培養(yǎng)可獲得脫毒苗；莖尖培養(yǎng)技術(shù)簡單，操作方便，易成活，成苗時間短，加快繁殖。2.2.
3、2莖尖培養(yǎng)類型：根據(jù)培養(yǎng)目的和取材大小分為：微莖尖培養(yǎng);普通莖尖培養(yǎng)莖尖培養(yǎng)的類型普通莖尖指幾毫米到幾十毫米的芽尖及側(cè)芽。微莖尖為0.3-0.5mm取材材料處理及消毒培養(yǎng)莖尖培養(yǎng)的方法接 種①直接取材：在生長旺盛、枝條健壯、無病的母株上選生長不久、雜菌污染少的頂梢（1－2cm）（取前可噴殺菌藥，可頂芽或側(cè)芽）。②從試管苗獲取。2.2.2.1取材取1-2㎝頂梢①頂梢切割成0.5-1.0cm的莖尖（除葉,剝?nèi)バ菝哐康镊[片）②莖尖流水沖洗2-4h③75%酒精迅速漂洗30s④0.1%升汞或稀釋20倍的次氯酸鈉液消毒
4、5-8min(取自老枝條上的可適當延長時間）2.2.2.2材料處理及消毒接前可再剝?nèi)ヒ恍┤~片。然后隨切隨接，動作迅速。亦可將切下莖尖材料在1-5%VC液中浸一下。2.2.2.3接種培養(yǎng)基①基本培養(yǎng)基：MS、White、B5、Heller。②蔗糖作碳源效果好，濃度2－3%。③激素和有機添加物有明顯影響。但激素濃度以0.1mg/L為宜，不要太高。2.2.2.4培養(yǎng)培養(yǎng)條件①光強：1000－3000lx；光照時間：16h。②溫度：25℃左右③晝夜溫差有或無，以植物或培養(yǎng)過程來定④干燥季節(jié)注意保濕。2.2.3莖段的
5、培養(yǎng)2.2.3.1材料選擇與處理嫩枝去葉，剪3-4cm長水沖洗1-3h,75%酒精30-60s，0.1%升汞3-8min(飽和漂白粉液10-20min，無菌水沖洗數(shù)次。2.2.3.2接種與培養(yǎng)培養(yǎng)基：MS腋芽增殖效果：BAKT、ZT，生長素改善苗生長，GA促芽伸長。注意激素配比。繼代增殖途徑：促腋芽快速生長；誘導形成不定芽。1.成苗途徑與意義2.材料選擇與消毒3.接種4.培養(yǎng)2.2.3葉的培養(yǎng)幼嫩葉片流水沖洗70-75%酒精漂洗10s飽和漂白粉液浸3-15min（或在0.1%升汞液5-8min）無菌水沖洗多
6、次后，用無菌濾紙吸干水分2.2.3.1材料選擇與滅菌上表皮朝上接種培養(yǎng)基。最好帶葉脈，注意極性2.2.3.2接種外植體大?。?×5mm薄片培養(yǎng)基：MS、B5、White、N6；蔗糖3%；2.4－D利于愈傷組織形成，NAA抑制芽形成，利于根發(fā)生，KT、6BA利于芽形成。培養(yǎng)條件：25－28℃，10－14h光照，1500-3000lx（不定芽分化和生長再強些）。2.2.3.3培養(yǎng)2.2.4.4植株再生途徑直接產(chǎn)生不定芽形成愈傷組織形成胚狀體其他途徑2.3壯苗和生根培養(yǎng)2.3.1試管苗的壯苗培養(yǎng)較高濃度的生長素與
7、較低濃度的細胞分裂素組合有利于形成壯苗.在生產(chǎn)實際中，增殖系數(shù)控制在3.0-5.0時可實現(xiàn)增殖和壯苗的雙重目的。另外，改善培養(yǎng)室環(huán)境條件，如增加光照強度、降低濕度等對培養(yǎng)壯苗也有一定幫助。2.3.2試管苗的生根培養(yǎng)生根培養(yǎng)基：1／2或1／4MS基本培養(yǎng)基；不加或少加CTK，適量添加NAA；糖濃度1-1.5%。培養(yǎng)條件：增加光強，達3000-10000lx。2.3.2.1生根方法與途徑將新梢基部浸入50ppm或100ppmIBA溶液中處理4-8h；在含有生長素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4-6d直接移入含有生長素的生根培養(yǎng)
8、基中。容易生根的植物，延長在增殖培養(yǎng)基中的培養(yǎng)時間即可生根；適當降低增殖倍率，減少細胞分裂素的用量，即可增殖又可生根；對易生根植物，切割粗壯的嫩枝用生長素溶液浸醮處理后在營養(yǎng)缽中直接生根，此方法省去了生根階段，但只適于一些容易生根的植物。2.3.2.2影響試管苗生根的因素植物材料基本培養(yǎng)基植物生長調(diào)節(jié)劑培養(yǎng)條件其它物質(zhì)2.4試管苗的馴化與移載試管苗生態(tài)環(huán)境與自然環(huán)境的差異試管苗的特點試管苗的馴化試管苗的移栽2.4
