煙草中Ntpx基因的克隆及表達(dá)特性研究.pdf

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1、,-.rKI孽聾夢/l滬寶:,補(bǔ).班皆濟(jì)f"v甲蒙¥養(yǎng)或.、‘藥戶.參‘??;C管'*';、巧H."./.襲/.:-興/是.墓;...i.’.:轉(zhuǎn)狂載^‘..弓‘,>;."/r;^.N,擇..,-J..vv-NV?i"‘f秦W南xv^^f、每U’"..苗慕‘為::..*n夸巧-r.V>學(xué)位I論文穿’、卻.;/韋v'為滅夢闕.wV?.賞中吹細(xì)觀陸及!達(dá)特細(xì)脫V0';?.皆.v.:''/奏V/:.".,巧::.I.t\.、,若‘一':、;%、,

2、>貧.窗-.V ̄巧誦.,r^r起‘勢’-.究^.羅秀占v-:、'.田云^授.巧V/.';..、盧向授sv...怯.生說學(xué)L苗錦.滬!..'J:心分t?。陕?;/....:1'-:Xf古1技、^妄一^某共-^我堿^身-?:益琴/.'e/0多巧.3"^片霉>/*v巧./v.‘禱:.\:^,.藝.;少分年敎T¥-&v;/-氣::.:子.'..>..:背#//.;;復(fù)、.、普V辜.度誤、分類號S199密級公開UDC

3、單位代碼10537蝴齋農(nóng)史丈緣碩:t學(xué)位論文煙草中7V醉C基因的克隆及表達(dá)特性研究StudiesonCloningandExpressionCharacterizationofNtPxinTobacco研究生姓名羅秀云指導(dǎo)教1幣田云教授|副指導(dǎo)教師盧向陽教授學(xué)位類型碩:t學(xué)科領(lǐng)域生物化學(xué)與分子生物學(xué)研巧方向分子生物學(xué)論文答辯日期20-06-09答辯委員會主席當(dāng)孟良15論文評閱人劉選明劉文彬黎繼烈二〇—五年六

4、月獨(dú)創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的論文是我個人在指導(dǎo)老師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知,論,除了文中特別加W標(biāo)注和致謝的地方外文中不包含其他人己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果,也不包含為獲得湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料一。與我同工作的同志對本研究所做的任何貢獻(xiàn)均己在論文中作了明確的說明并表示了謝意。:<^研究生簽名:時間>么年口月^曰喪乏^關(guān)于論文使用授權(quán)的說明本人完全了解湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,目P:學(xué)校有權(quán)保留、

5、送交論文的復(fù)印件和電子稿,允許論文被查閱和借閱,可W采用影印縮印或掃描等、復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。同意湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)可(^用不同方式在不同媒體上發(fā)表傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容,并同意將由此產(chǎn)生的收益捐贈給學(xué)校教育基金會用于發(fā)展研究生教育。保密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)遵守此協(xié)議)(研巧生簽名:時間:年b/月曰fii如麥/占,導(dǎo)師簽名::時間月/日//^摘要摘要植物由于受到外界環(huán)境脅迫的刺激,導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生氧化脅迫,從而影響植物的生理生化特性和代謝途徑。過氧化物酶(

6、Px)在植物脅迫應(yīng)答、防御反應(yīng)和生長發(fā)育過程中具有重要的作用。本論文W煙草為材料,從中克隆得到編碼過氧化物酶基因的新。成員7V腳C,并對其性質(zhì)做了初步分析本論文獲得如下主要研究結(jié)果:(1)從煙草中克隆得到編碼過氧化物酶基因的新成員Mpx,其開放閱讀框長990一-b,eoxidase4結(jié)構(gòu)域。p,能夠編碼329個氨基酸殘基具有個典型的pr(2)Mpx在成熟煙草植株各器官的表達(dá)水平從高到低依次為花、莖、葉和根。(3)Mpjc基因的表達(dá)不僅受到低溫、ABA、MeJA、GA的顯著誘導(dǎo)

7、;也受到高溫、SA的較顯著誘導(dǎo),受到ET、干旱誘導(dǎo)調(diào)控不顯著;W斬C基因在高溫、低溫、鹽害和SA、GA、ABA、ET、MeJA的調(diào)控下,都表現(xiàn)為先升后降,再升再降的上調(diào)表達(dá)模式,但在干旱脅迫中的呈現(xiàn)先升后降的上調(diào)模式。(4)-Mx-GFP載體通過構(gòu)建pBI121p,轉(zhuǎn)化至農(nóng)桿茜并侵染洋蔥表皮觀察細(xì)胞定位,Ntx主要定位在核上。,結(jié)果表明p(5)通過構(gòu)建pET30a+-Mpc-();畑P載體,轉(zhuǎn)化至大腸桿菌BL21中進(jìn)行表么結(jié)N°果表明表達(dá)產(chǎn)物tx具有過氧化物酶活性,且其在30

8、C,200rm/min下振蕩0.05pp,--iimmol/LIPTG誘導(dǎo)lOh表達(dá)的Ntx具有較高的比活力比活力為8.617化.min。p,其酶g上述研究結(jié)果為進(jìn)一步系統(tǒng)分析Ntpx在煙草中的重要生物學(xué)功能及其分子機(jī)制奠定基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞:JC原核表達(dá)亞細(xì)胞定位表達(dá)特性。取;;;I湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)碩上學(xué)位論文AbstractOxidativestresswasbroughtduetothestimu

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