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《膽鹽輸出泵在膽道梗阻再通大鼠肝組織中的表達(dá)及意義.doc》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、膽鹽輸出泵在膽道梗阻再通大鼠肝組織中的表達(dá)及意義作者：祝建勇別平陳應(yīng)果馮春林唐春吳喬【摘要】目的探討膽鹽輸出泵(BSEP)在膽道梗阻再通大鼠肝組織中的表達(dá)及意義。方法將54只Wistar大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)(Sham)組、膽總管結(jié)扎(CBDL)組、膽道再通(BR)組，測定各時(shí)相點(diǎn)血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、總膽汁酸(TBA)以及腫瘤壞死因子(TNFct)的水平，采用RTPCR方法和二步法免疫組化染色分別在基因轉(zhuǎn)錄、蛋白表達(dá)及肝細(xì)胞膜定位上檢測BSEP在大鼠肝組織中的表達(dá)情況，運(yùn)用Mias99病理圖像分析系統(tǒng)半定量檢測BSEP的平均積分光密度仃0D),與TBA和TNFoc作相關(guān)分
2、析。結(jié)果CBDL術(shù)后大鼠血清ALT,TBA及TNFa顯著增高(P<0.05);BR術(shù)后上述指標(biāo)逐步好轉(zhuǎn)，7d時(shí)仍顯著高于Sham組水平(P<0.05)oBSEPmRNA水平隨著梗阻時(shí)間的延長明顯降低(P<0.05),CBDL術(shù)后14d僅微弱表達(dá)，梗阻解除后緩慢增高；BR術(shù)后7d仍未恢復(fù)至Sham組水平。免疫組化染色顯示BSEP表達(dá)定位于肝細(xì)胞膜上，變化規(guī)律與前述一致，并且與TBA和TNFex呈顯著負(fù)相關(guān)(rl=-0.9257,r2=-0.8536,P<0.05)。結(jié)論膽道梗阻再通大鼠模型中膽鹽的代謝與BSEP水平密切相關(guān)，而TNFa可能是影響B(tài)SEP變化的
3、重要因素?！娟P(guān)鍵詞】膽鹽輸出泵腫瘤壞死因子CX膽道梗阻再通肝組織大鼠【Abstract]ObjectiveToexploretheroleofbilesaltexportpump(BSEP)inrat1iverwithbileductobstructionandbilereflow.MethodsFiftyfourmaleWistarratswererandomizedlydividedintothreegroups,shamgroup,commonbileduct1igation(CBDL)groupandbilereflow(BR)grouptodetectlevelofse
4、rumALT,totalbileacids(TBA)andtumornecrosisfactora(TNFex)ateverytimepoint.ExpressionofBSEPatlevelofgenetranscription,proteinexpressionandhepaticcel1membranelocalizationwasmeasuredbyusingRTPCRandimmunohistochemistrymethod?MeanBSEPIODwasdetectedsemiquantitativelybyusingMias99pathologicalimageana
5、lysissystem.Meanwhile,correlationofBSEPIODwithserumTBAandTNFexwasperformed?ResultsAfterCBDL,levelsofserumALT,TBAandTNFawereascendedsignificantly(P<0.05),whichgotagraduallyfavourableturnbutwasstillhigherthanthatinshamgroupsevendaysafterbilereflow(P&It;0.05).TheexpressionofBSEPmRNAdecreaseda
6、sbileductobstructionelongated(P&It;0.05),increasedslowly14daysafterCBDLandposteriortoobstructionreliefbutdidnotreachlevelofshamgroupsevendaysafterBR.Tmmunohistochemistryresultsshowedasimilartendencytoabovementionedchange,ie,expressionofBSEPwasrestrictivelylocatedonthehepatocytemembrane,whichw
7、asnegativelycorrelatedwithTBAandTNFa（rl=-0.9257,r2=-0.8536,P<0.05）.ConclusionBSEPmayberesponsibleforbilesaltmetabolisminratmodelofbileductobstructionandbilereflow,andTNFaplaysanimportantroleinregulatingBSEPexpression.［Keywords!Bilesaltexpo
