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《腫瘤基因治療的靶向性研究進(jìn)展.doc》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、腫瘤基因治療的靶向性研究進(jìn)展[摘耍]近年來(lái),腫瘤基因治療技術(shù)迅速發(fā)展。其中基因治療的靶向性是值得密切關(guān)注的問(wèn)題之…。作者就基因治療靶向性的主要策略如目的基因轉(zhuǎn)移的靶向性和目的基因表達(dá)的靶向性?xún)煞蕉饕痪C述。[關(guān)鍵詞]靶向性;腫瘤;基因治療;綜述隨著分子生物學(xué)、分子遺傳學(xué)、免疫學(xué)等相關(guān)學(xué)科的發(fā)展和滲透,基因治療特別是腫瘤基因治療技術(shù)迅速發(fā)展,多種腫瘤基因治療方法在理論和技術(shù)上己趨成熟,并從實(shí)驗(yàn)及基礎(chǔ)研究過(guò)渡到臨床試用階段。然而基因治療并不如當(dāng)初人們想象的那樣完美,它離安全、高效、準(zhǔn)確的耍求還有一定的差距[1],其中基因治療的靶向性是值得密切關(guān)注的問(wèn)題
2、之一。所謂靶向性,是指在治療過(guò)程中,把治療作用或藥物效應(yīng)限定在特定的靶細(xì)胞、組織或器官內(nèi),而不影響其他正常的細(xì)胞、組織或器官的功能,這對(duì)于基因治療是非常重要的。達(dá)到基因治療靶向性的主要策略有目的基因轉(zhuǎn)移的靶向性和目的基因表達(dá)的靶向性。作者就近幾年來(lái)這兩個(gè)方面的研究進(jìn)展綜述如下。1目的基因轉(zhuǎn)移的靶向性1.1病毒介導(dǎo)的靶向基因轉(zhuǎn)移目前用于基因轉(zhuǎn)移的病毒載體有逆轉(zhuǎn)錄病毒載體、腺病毒載體、腺相關(guān)病毒載體和單純皰疹病毒載體等,但它們對(duì)細(xì)胞的感染均無(wú)選擇性。逆轉(zhuǎn)錄病毒的趨向性由其外殼包膜蛋白env和宿主細(xì)胞表面特異的蛋白受體間相互作用決定,因此,可通過(guò)修飾en
3、v基因或env蛋白來(lái)改變其感染譜。用能識(shí)別腫瘤細(xì)胞受體的配體或抗腫瘤特異性抗原的抗體基因取代env基因部分序列,使病毒表達(dá)能特異性識(shí)別腫瘤細(xì)胞的外売蛋白,從而將目的基因靶向性地導(dǎo)入腫瘤細(xì)胞。Khare等[2]用抗人癌胚抗原(CEA)單鏈抗體的基因與env重組,使逆轉(zhuǎn)錄病毒把一氧化氮合酶(NOS)“自殺基因”靶向?qū)隒EA陽(yáng)性的腫瘤細(xì)胞,并合成NOS使其自殺身亡,而對(duì)非靶細(xì)胞則無(wú)損傷。腺病毒是雙鏈DNA病毒,其在感染靶細(xì)胞時(shí),首先由病毒衣殼纖維蛋白(fiber)中的knob結(jié)構(gòu)域識(shí)別并結(jié)合細(xì)胞表面的“柯薩奇病毒和腺病毒受體(cox-sackieand
4、aden-ovirusreceptor,CAR),然后通過(guò)外売五鄰體蛋白(capsid)與細(xì)胞表面的整合素家族分子相互作用,內(nèi)化進(jìn)入細(xì)胞。因此,目前提高腺病毒感染靶向性方面的改造主耍集中于對(duì)病毒外殼纖維蛋白的基因改造。Mizuguchi等[3]選擇腺病毒纖維結(jié)區(qū)的HI環(huán)作為靶位點(diǎn),插入RGD肽段的人工合成寡核昔酸,改造后的重組病毒對(duì)CAR-的人膠質(zhì)瘤細(xì)胞和胰腺癌細(xì)胞的感染率均有所提高。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí),AD.RGD.TNF.ci感染CAR-的人膠質(zhì)瘤細(xì)胞裸鼠模型,僅以1.10的病毒量即可達(dá)到與野生型AD.TNF.a相同的治療效果。Suzuki等[4]在
5、Ad5.A24(一種E1A突變型腫瘤增生病毒)的病毒外殼纖維蛋口的C末端插入RGD短肽,發(fā)現(xiàn)改造后的病毒Ad5.A24RGD抗腫瘤療效較Ad5.A24顯著提高。最近科學(xué)家又利用某些病毒先天的特異性感染腫瘤細(xì)胞的能力來(lái)實(shí)現(xiàn)靶向基因轉(zhuǎn)移。研究發(fā)現(xiàn),某些病毒先天具有特異性感染腫瘤細(xì)胞和選擇性在腫瘤細(xì)胞中復(fù)制的能力,但其作用機(jī)制尚未明確。Phuangsab等[5]通過(guò)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤裸鼠移植瘤動(dòng)物模型證實(shí),NDV(newcastlediseasevirus,一種雞副黏液病毒,能特異性地在腫瘤細(xì)胞屮復(fù)制并溶解腫瘤)瘤內(nèi)注射可明顯抑制腫瘤生長(zhǎng),腫瘤完全消退率高達(dá)
6、75%,可望成為治療腫瘤的理想藥物。另有報(bào)道,呼吸道腸道過(guò)濾性病毒(reovirus)在ras基因處于激活狀態(tài)的腫瘤細(xì)胞中進(jìn)行復(fù)制增生,應(yīng)用該病毒治療ras高表達(dá)的多種腫瘤取得明顯療效,現(xiàn)已進(jìn)入臨床實(shí)驗(yàn)階段[6,7]o自主微小病毒(parvovirus)也是一種天然的特異性感染并溶解腫瘤細(xì)胞但對(duì)正常細(xì)胞無(wú)毒性作用的病毒,是一種無(wú)外殼的、基因組僅5kb的單鏈DNA病毒[8]o1.2受體?配體或抗原.抗體介導(dǎo)的靶向基因轉(zhuǎn)移許多細(xì)胞表面都特異性地表達(dá)或過(guò)表達(dá)某種受體或抗原,如果使目的基因或攜帶有目的基因的載體與相應(yīng)的配體或抗體相連接,利用受體?配體或抗原
7、?抗體相互作用的特異性,就可以把目的基因特異性地導(dǎo)入到靶細(xì)胞中[9]oTakayanagi等[10]以抗表皮生長(zhǎng)因子受體(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)的單抗B4G7的Fab段,通過(guò)多聚賴(lài)氨酸(polylysine)與0的基因HSV.TK基因形成親和復(fù)合物,通過(guò)EGFR介導(dǎo)的內(nèi)吞作用將HSV.TK基因?qū)爰?xì)胞,其轉(zhuǎn)染效率是用li-pofectin轉(zhuǎn)染的10倍,同時(shí)藥物敏感性也提高了1000倍。Pu等利用EGFR在大多數(shù)膠質(zhì)瘤中過(guò)度表達(dá)而在正常腦組織中則低表達(dá)的特點(diǎn),用反義EGFRcDNA轉(zhuǎn)染C6膠質(zhì)瘤細(xì)胞,觀
8、察到內(nèi)生性EGFRmRNA及蛋白水平明顯下降,在荷瘤鼠實(shí)驗(yàn)中,腫瘤生長(zhǎng)明顯受抑。1.3納米材料介導(dǎo)的靶向基因轉(zhuǎn)移納米技術(shù)對(duì)