產(chǎn)細(xì)菌素乳酸菌的篩選、培養(yǎng)條件優(yōu)化及生物學(xué)特性的研究.pdf

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3、性、無殘留、并可以殺死或抑制許多致病菌和腐敗菌，能替代化學(xué)防腐劑和抗生素的天然抑菌產(chǎn)品。而乳酸菌細(xì)菌素以其天然特性必然在未來為人類的健康事業(yè)做出巨大的貢獻(xiàn)。本文從課題組前期篩選出的產(chǎn)細(xì)菌素的菌株L1出發(fā)，進(jìn)行了以下研究：首先采用紫外-微波-紫外誘變的方法將一株產(chǎn)細(xì)菌素的乳酸球菌L1作為出發(fā)菌株，進(jìn)行誘變選育，另設(shè)空白對照組。根據(jù)菌株的耐受性，計算致死率，選擇最佳的誘變劑量，經(jīng)誘變后的菌株進(jìn)行初篩和復(fù)篩方能進(jìn)入下一輪的誘變，從而選育出性狀優(yōu)異的菌株。結(jié)果顯示經(jīng)過復(fù)合誘變選育的菌株L1-UVs3，其生長能力和抑菌性能均有所提高?？疾觳煌瑵舛燃胺N類的碳源、氮源、刺激因子和金屬離子對細(xì)菌素產(chǎn)量的影響。

4、通過單因素及正交試驗(yàn)優(yōu)化，獲得優(yōu)化培養(yǎng)基參數(shù)，即葡萄糖濃度2.5%、蛋白胨濃度2.0%、氯化鈉濃度0.20%、吐溫80濃度0.2%，37℃培養(yǎng)24小時，該優(yōu)化條件下培養(yǎng)的菌株L1-UVs3，抑菌實(shí)驗(yàn)測定抑菌圈直徑為16.87mm，產(chǎn)細(xì)菌素最多。本文對乳酸菌細(xì)菌素生物學(xué)特性研究，試驗(yàn)結(jié)果表明：乳酸菌L1-UVs3所產(chǎn)細(xì)菌素具有良好的熱穩(wěn)定性，121℃30min高溫處理后仍保持有部分活性；該細(xì)菌素在酸性和中性條件下仍具有抑菌活力，在堿性條件下細(xì)菌活力顯著降低。該細(xì)菌素對所選擇的4種蛋白酶（木瓜蛋白酶、蛋白酶K、胰蛋白酶以及胃蛋白酶）敏感；冷凍、冷藏后細(xì)菌素仍能具有很好的抑菌活性。添加劑和發(fā)酵上清液

5、共同作用的結(jié)果顯示，上清液分別與糖精鈉、D-異抗壞血酸鈉及三聚磷酸鈉共同作用的與空白組抑菌效果幾乎沒有差異，維生素C對細(xì)菌素抑菌活性有一定程度的提高，檸檬酸鈉對抑菌效果的促進(jìn)作用較明顯，添加山梨酸鉀的溶液抑菌圈直徑最大。對G+和G-病原細(xì)菌有較好的抑菌效果。細(xì)菌素粗提液比無細(xì)胞上清液的的抑菌活性大。本研究篩選出了一株產(chǎn)細(xì)菌素的乳酸菌，確定了乳酸菌細(xì)菌素的優(yōu)化培養(yǎng)基參數(shù)條件，對其發(fā)酵上清液的生物穩(wěn)定性進(jìn)行了初步探究，為該細(xì)菌素的推廣應(yīng)用提供了基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和理論支持。關(guān)鍵詞：乳酸菌細(xì)菌素；活性；穩(wěn)定性.IAbstractLacticacidbacteriaisclosedtohumanlifesuch

6、asusingthemtoprotectfood.Withthefurtherstudyonitsmechanismofinhibition,wefoundthatthemainfactorsweretheantibacterialsubstanceproducedinthefermentationprocesssuchasorganicacid,hydrogenperoxideandbacteriocins.Withadailyincreaseofantibioticresistanceproblemsandhazardsofchemicalpreservativesandotherissu

7、espromptedpeoplelookingforanosideeffects,non-toxic,noresistance,noresidue,andcankillorinhibitmanypathogensandcorruptionbacteria,canreplacechemicalpreservativesandantibioticsnaturalantibacterialproduct