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1、QX型雞傳染性支氣管炎弱毒疫苗的研制DevelopmentofanattenuatedlivevaccineforQX—·typeavianinfectiousbronchitis研究生：陳啟穩(wěn)專業(yè)：預(yù)防獸醫(yī)學(xué)導(dǎo)師：吳艷濤教授張小榮副教授揚州大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院2014年6月陳啟穩(wěn)QX型雞傳染性支氣管炎弱毒疫苗的研制QX型雞傳染性支氣管炎弱毒疫苗的研制研究生：陳啟穩(wěn)導(dǎo)師：吳艷濤教授張小榮副教授摘要雞傳染性支氣管炎(infectiousbronchitis，IB)是一種由傳染性支氣管炎病毒(infectiousbronch
2、itisvirus，IBV)引起的急性、高度接觸性傳染病。IBV血清型眾多，不同血清型毒株之間的交叉免疫保護作用不好。研究表明，IBV的血清分型和基因分型具有一致性。由于Mass型疫苗在我國已經(jīng)廣泛使用多年，與目前主要流行的QX型毒株遺傳關(guān)系較遠(yuǎn)，在實際生產(chǎn)中免疫保護效果并不理想。因此，研制QX型弱毒疫苗對于預(yù)防和控制我國IB的發(fā)生和流行具有重要意義。1．QX型雞傳染性支氣管炎病毒QXL株的鑒定對QX型IBVQXL毒株的生物學(xué)特性進(jìn)行了研究。純凈性研究表明，毒株無細(xì)菌、支原體及其他外源病毒污染。致病性研究表明，Q
3、XL毒株能夠引起15日齡的SPF雛雞100％發(fā)病，40％死亡；剖檢病死雞，可見氣管及支氣管的管腔中有大量炎性或干酪樣滲出物；腎臟腫大，輸尿管中有大量尿酸鹽沉積、外觀呈大理石紋狀；組織病理學(xué)及免疫組織化學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)，毒株對氣管及腎臟的損傷較為嚴(yán)重。此外，QXL毒株對雛母雞的輸卵管及卵巢也具有較強的致病力；與健康對照組相比攻毒組雞的產(chǎn)蛋量下降50％左右；攻毒后180d，剖檢發(fā)現(xiàn)有近27％雞有嚴(yán)重的腹膜炎，36％雞有卵巢炎癥，卵巢發(fā)育不良，卵子變性壞死，呈紅褐色。組織病理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，攻毒組雞卵巢組織中有大量的異噬性粒細(xì)胞
4、浸潤，卵子壞死脫落；免疫組織化學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，在輸卵管和卵巢組織中均可以廣泛的檢測到病毒抗原。2．QX型雞傳染性支氣管炎病毒QXL株的致弱QXL毒株經(jīng)SPF雞胚連續(xù)傳代，隨著傳代次數(shù)的增加，毒株對雞胚的適應(yīng)性越來越好。為了評價QXL毒株在連續(xù)傳代后其致病力的變化，本研究選擇不同代次毒株接種1～3日齡的SPF雛雞，觀察其發(fā)病及死亡情況，并進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。結(jié)果表明，10--一30代毒株能夠引起80％以上雛雞發(fā)病，20％以上雛雞死亡；50代毒株的致病力顯著降低，僅導(dǎo)致20％的雛雞發(fā)?。唤臃N70代及之后各代次毒株的雞，無
5、發(fā)病或死亡，各組織器官均也無異常。揚州大學(xué)碩士學(xué)位論文對QXL第70、80、85、87、90、100、110、120代毒株免疫原性的研究。結(jié)果表明，以上各代次免疫組雞，在受到同源強毒攻擊時，均可提供90％以上保護。因此，70代及之后各代次毒株致病力充分降低的同時，仍然保留有良好的免疫原性。我們選取第87代毒株為進(jìn)一步研究的對象，命名為QXL87株。對QXL不同代次毒株Sl基因序列的分析，結(jié)果表明，在第5代到第120代的傳代過程中，僅有4個核苷酸位點發(fā)生突變，并僅導(dǎo)致相應(yīng)的2個氨基酸殘基發(fā)生改變。由此推測，IBVQ
6、XL毒株致病力和免疫原性的改變可能還與其他一些基因的變化有關(guān)。3．QX型雞傳染性支氣管炎病毒QXL87株弱毒疫苗的I臨床前研究QXL87株雞體內(nèi)分布及排毒規(guī)律研究，結(jié)果表明，接種后第5d及第7d各臟器均能分離到病毒，而接種后的第15d各臟器均未分離到病毒。毒力反強試驗研究表明，QXL87株經(jīng)SPF雞連傳5代，沒有出現(xiàn)毒力返強現(xiàn)象。研究表明，QXL87株對雛母雞的輸卵管及卵巢已無致病力。綜上所述，QXL87株是理想的Qx型IB弱毒疫苗候選毒株。關(guān)鍵詞：雞傳染性支氣管炎病毒；QX型；弱毒疫苗陳啟穩(wěn)QX型雞傳染性支氣管
7、炎弱毒疫苗的研制DevelopmentofanattenuatedlivevaccineforQX-·typeavianinfectiousbronchitisM．S．candidate：QiwenChenAdvisor：Prof．YantaoWu，AssociateProf．XiaorongZhangAbstract3Infectiousbronchitis(IB)isanacute，highlycontagiousdiseaseofchickenscausedbyinfectiousbronchitisvir
8、us(IBV)．IBVhavemanyserotypes，buthavelittleornocrossprotectionOccursbetweendifferentserotypesofIBV．TheMass-typevaccinehasbeenwidelyusedformanyyearsinOurcountry,anditisgeneticallydifferentf
