布病作業(yè)指導(dǎo)書范文.doc

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1、布病作業(yè)指導(dǎo)書范文　　布病作業(yè)指導(dǎo)書微生物操作方法　　一、平板凝集試驗（PAT）　　1、備一方形潔凈的玻璃板，劃成25個方格（或更多），橫數(shù)5格、縱數(shù)5格，第一列各格寫下血清號碼。　　2、用0.1毫升吸管按下列劑量加受檢血清于任何一行的各格中第一格0.08毫升，第二格0.04毫升，第三格0.02毫升，第四格0.01毫升?！　∪缥懿欢?，可于分注每份血清完畢后，在2-3個盛有生理鹽水的杯中清洗六次以上，然后可用于吸注另一份血清?！　?、加平板凝集反應(yīng)抗原0.03毫升于各血清格中，用牙簽或細(xì)鐵絲混合，由血清量最小的格混起?！　〉诜菅逵靡桓篮灒煤蠹袩龤??！　∪粲眉?xì)鐵絲時，每份血清混合后用酒

2、精棉球擦凈，然后再用作另一份血清?！　?、混勻后將玻璃板置于酒精燈火焰或凝集反應(yīng)箱上，均勻加溫，使其達(dá)到30℃左右，5分鐘內(nèi)記錄反應(yīng)結(jié)果?！　?、每次試驗用陰、陽血清各1份作對照?！　?、按下列標(biāo)準(zhǔn)用加號記錄反應(yīng)強(qiáng)度++++出現(xiàn)大的凝集片或小的粒狀物，液體完全透明，100%凝集?！　?++有明顯的凝集片，液體幾乎完全透明，75%凝集?！　?+有可見的凝集片，液體不甚透明，50%凝集。　　+液體混濁，只有少量粒狀物，25%凝集。　　-液體均勻混濁?！　《?、試管凝集試驗（SAT）　　1、血清稀釋及加入抗原每份血清用10支小試管，第一管加入2.3毫升生理鹽水，第二管不加，第三管至第九管各加0.5毫

3、升。　　用1毫升吸管吸取受檢血清0.2毫升，加入第一管中，并混勻。　　以該吸管吸取混合液分別加入第二和第三管，每管0.5毫升?！　〗?jīng)該吸管將第三管混合液混勻，并吸取0.5毫升加入第四管，混勻，從第四管吸取0.5毫升加入第五管，依次加到第九管?！　牡诰殴芪?.5毫升棄去。　　第十管作抗原對照?！　牡诙芷鹧逑♂尪确謩e為112.　　5、　　125、　　150、　　1100、　　1200、　　1400、　　1800、11600...?！　?、加入抗原方法是先以生理鹽水將抗原原液作110稀釋，從第二管起每管加0.5毫升，血清稀釋度從第二管起依次為　　125、　　150、　　1100、　　12

4、00、　　1400、　　1800、　　11600、13200...?！　?、全部試驗管充分振蕩后置37度溫箱中20-22小時，取出后放室溫2小時，然后判定結(jié)果?！　?、結(jié)果判定++++等于完全凝集，上層液100%清亮?！　?++等于幾乎完全凝集，上層液75%清亮?！　?+等于顯著凝集，液體50%清亮?！　?等于有凝集出現(xiàn)，液體25%清亮?！　?等于無凝集，液體不清亮?！　∪?、平板和試管凝集反應(yīng)的關(guān)系0.08毫升血清量出現(xiàn)反應(yīng)相當(dāng)于試管法125的血清稀釋度，0.04毫升相當(dāng)于150，0.02毫升相當(dāng)于1100，0.01毫升相當(dāng)于1200?！　∷摹⑴卸ㄆ桨迥囼灒≒AT）0.02毫升血清量++

5、以上凝集現(xiàn)象判斷為陽性?！　≡嚬苣囼灒⊿AT）血清滴度1100++以上凝集現(xiàn)象判斷為陽性?！　　　?nèi)容僅供參考