抗凝血因子Ⅰ與凝血因子IX結(jié)合反應(yīng)及納米Fe3O4對(duì)鎘毒性的抑制作用研究.pdf

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1、中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)碩士學(xué)位論又抗凝血因子I與凝血因子IX結(jié)合反應(yīng)及納米Fe304對(duì)鎘毒性的抑制作用作者姓名:學(xué)科專業(yè):研究方向:導(dǎo)師姓名:完成時(shí)間:研究張燕無(wú)機(jī)化學(xué)生物無(wú)機(jī)化學(xué)徐小龍副教授二。一二年五月二日UniversityofScienceandTechnologyofChinaAdissertationformaster,SdegreeThestudyofthebindingofantiCoagUIationfactorItocoagulationfactorlXandtheinhibitionofCdZ十toxicitybynanoFea04Author’SN

2、ame:Speciality:Supervisor:Finishedtime:YanZhangInorganicChemistryAssoc.Prof.XiaolongXuMay2m,2012中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行研究工作所取得的成果。除已特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,論文中不包含任何他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫(xiě)過(guò)的研究成果。與我一同工作的同志對(duì)本研究所做的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明。作者簽名:教叛簽字日期:型21塹:筮中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)學(xué)位論文授權(quán)使用聲明作為申請(qǐng)學(xué)位的條件之一,學(xué)位論文著作權(quán)擁有者授權(quán)中國(guó)科學(xué)技術(shù)

3、大學(xué)擁有學(xué)位論文的部分使用權(quán),即:學(xué)校有權(quán)按有關(guān)規(guī)定向國(guó)家有關(guān)部門(mén)或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱,可以將學(xué)位論文編入《中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)》等有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。本人提交的電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相一致。保密的學(xué)位論文在解密后也遵守此規(guī)定。,眥≥開(kāi)口保密(年)作者簽名:茲羲導(dǎo)師簽名:;經(jīng):,l幺!簽字日期:迎12,占!上簽字日期:趔2=≤:星摘要摘要全文分成兩個(gè)部分,第一部分主要研究了抗凝血因子I與凝血因子Ix結(jié)合反應(yīng)以及鈣離子對(duì)該結(jié)合的影響;第二部分是關(guān)于納米粒子與重金屬毒性的毒性

4、相互作用,由于納米粒子的廣泛運(yùn)用,納米粒子的毒性受到關(guān)注,另一方面重金屬污染日益嚴(yán)重,對(duì)生態(tài)環(huán)境造成巨大損害。過(guò)去的研究主要著眼于其中某一個(gè)對(duì)象的研究,而對(duì)納米粒子和重金屬的協(xié)同作用研究較少。本文就目前應(yīng)用廣泛的納米Fe304與重金屬Cd對(duì)小鼠毒性的協(xié)同作用進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)Fe304可以抑制CdCl2對(duì)小鼠肝臟的毒性,具有負(fù)協(xié)同效應(yīng)。全文共分為四章。第一章:介紹了凝血過(guò)程、C.型凝集素類似蛋白、凝血因子IX/X結(jié)合蛋白的研究;研究凝血因子IX/X結(jié)合蛋白常用的實(shí)驗(yàn)手段,包括離子交換層析、熒光、聚丙烯酰胺凝膠電泳和表面等離子體技術(shù)。第二章:用陰陽(yáng)離子交換層析方法從蛇毒中

5、分離純化出ACFI,運(yùn)用電泳和SPR技術(shù)檢測(cè)ACFI和FIX結(jié)合反應(yīng)以及鈣離子對(duì)ACFI和FIX結(jié)合反應(yīng)的影響,鈣離子可以誘導(dǎo)ACFI和FIX的結(jié)合,而且不同濃度的的鈣離子對(duì)ACFI和FIX結(jié)合影響不同。通過(guò)SPR動(dòng)力學(xué)分析發(fā)現(xiàn)當(dāng)鈣離子濃度為0.25raM時(shí),二者親和力最強(qiáng),在高于0.25mM時(shí)會(huì)抑制ACFI和FIX的結(jié)合。說(shuō)明了鈣離子在ACFI和FIX結(jié)合中起開(kāi)關(guān)的作用。同時(shí)也說(shuō)明了ACFI和FIX的結(jié)合在ACFI的抗凝血活性中起主要作用。第三章:概述了納米粒子的基本性質(zhì)、納米金屬氧化物的毒性及用表面包裹降低毒性的研究、磁性納米粒子的毒性研究、Cd引起的氧化應(yīng)激反

6、應(yīng)和體內(nèi)微量元素失衡、Cd在體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中的毒性機(jī)理、毒物的聯(lián)合作用和毒性檢測(cè)指標(biāo)。第四章:研究了CdCl2和納米Fe304聯(lián)合暴露對(duì)小鼠短期毒性的協(xié)同作用。發(fā)現(xiàn)同時(shí)注射nano.Fe304+CdCl2組的臟器系數(shù)、血液檢測(cè)中ALT、AST、LDH、TP、肝臟的酶活力MDA都低于CdCl2組,而血檢中的TBIL、A/G以及肝臟中的SOD、GPx值高于CdCl2組。在肝臟和腎臟中注射納米Fe304+CdCl2組的Cd鎘含量顯著低于CdCl2組。組織切片顯示,注射nano.Fe304對(duì)小鼠各器官?zèng)]有明顯毒性,注射CdCl2組肝組織壞死嚴(yán)重,但是在Fe304+CdCl2組

7、中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)壞死。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示Cd短期毒性主要表現(xiàn)在對(duì)小鼠的肝臟和腎臟損傷,對(duì)其它組織器官影響較小。多種酶活性和生物代謝物分析以及病理切片分析結(jié)果顯示,納米Fe304可以抑制CdCl2對(duì)小鼠肝臟和腎臟的損傷。因此納米Fe304可以作為Cd中毒患者理想的磁共振成像造影劑。摘要關(guān)鍵詞:抗凝血蛋白凝血因子Ca2+皖南尖吻蝮蛇毒納米Fe304Cd抑制效應(yīng)IIAbstractThethesisisconsistsoftwoparts.Thefirstpartistheresearchonanticoagulationproteinspurifiedfromsnakeveno

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