資源描述：
《沙冬青種質(zhì)資源與抗旱基因研究.pdf》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、摘要蒙古沙冬青(Ammopiptanthusmongolicus)主要分布在我國西北地區(qū)的沙漠、荒漠區(qū)，是該區(qū)唯一的常綠闊葉灌木，具有很強的抗旱、抗寒等抗逆性。本研究以蒙古沙冬青(么。mongolicus)幼苗為實驗材料，測定干旱脅迫下沙冬青幼苗葉片和根生理生化指標；采用454高通量測序技術(shù)建立了沙冬青根轉(zhuǎn)錄本數(shù)據(jù)庫，并進行了相關(guān)分析；采用qRT-PCR技術(shù)檢測沙冬青抗旱相關(guān)基因的表達模式，以揭示沙冬青抗旱生理基礎(chǔ)和分子機制。結(jié)果如下：采用20％PEG6000脅迫處理lh．72h，沙冬青幼苗葉片的RWC、MDA含量和REL與對照相比沒有變化；
2、經(jīng)過24h脅迫處理，沙冬青幼苗根的RWC與對照相比顯著降低，而MDA含量和REL顯著增加。，脅迫處理醯，沙冬青幼苗葉片和根的脯氨酸含量均有大量積累。脅迫條件下沙冬青幼苗葉片的SOD活性表現(xiàn)為先降低后上升，POD活性略有增加，處理6h后CAT活性降低；沙冬青幼苗根中的SOD、CAT和POD活性隨脅迫時間加長而增加，72h處理SOD和POD活，性水平最高。上述研究結(jié)果說明，采用灌根法進行模擬干旱脅迫處理，葉片和根中的相關(guān)生理響應(yīng)特征不盡相同，根的反應(yīng)較強。應(yīng)用454高通量測序技術(shù)得到沙冬青根轉(zhuǎn)錄組共672002條高質(zhì)量(HQ)序列，平均長度279
3、bp。拼接序列27366條，包括14912個序列重疊群(contig)署H12454條singleton，總長約14Mb。共9771個蛋白序列獲得了注釋，采焉GO功能富集分析分別從生物學過程、綴臆組分黧分子功麓進行分類。并根據(jù)GO功麓富集分析，選擇了響應(yīng)滲透脅迫、氧化脅迫、激素刺激和光信號刺激等4類共計27個抗旱相關(guān)基因，采用qRT-PCR技術(shù)，以20％PEG6000脅迫lh和72h濾沙冬青撮為材料分析了表達模式，各塞響應(yīng)酶方式不同。以lh和就纛脅遺處理皆為上調(diào)表達且裙對表達量必2以上為標準確定為干旱脅遺誘導(dǎo)酶基因，共計獲得了4個基圜，分別編
4、碼糖苷永解酶家族蟹融、過氧化物酶超家旗蛋白、谷胱甘肽過氧化物酶(㈣)和向光反應(yīng)性NPH3家族蛋國；以lh和72h脅迫處理譽為下調(diào)表達且相對淡達量淹0．8戳下為標準確定炎干旱蓊追擲制酶基因，共計獲褥了4個基篋，分霧l編碼麟永素家族蛋自(EPd914)、硫酸鹽轉(zhuǎn)運予(S磁豫j?3)、硫氧還爨漱和向光反應(yīng)性NPH3寨族蛋白。本研究為深入開展沙冬青抗旱機璦積抗旱基因的研究夔定了基礎(chǔ)。美鍵讕：沙冬青，干旱脅迫，抗氧化酶，轉(zhuǎn)錄綴，qRT-PCRABSTRACTAstheonlyevergreenbroad—leafshrubinthenorthweste
5、mdesertofChina，Ammopiptanthusmongolicusshowsverystrongresistancetodroughtandcold。InordertoexplorethephysicalandmolecularmechanismsunderlyingthedroughttoleranceinA．mongolicus，weanalyzedphysiologicalandbiochemicalcharacteristicsinA．mongolicusseedlingunderdroughtstress。Weperfo
6、rmedlarge—scaletranscriptomesequencingofA。mongolicusrootusingRoche／454next—generationsequencingtechnology；andthedroughtresponsivegenesofA．mongolicusdifferentiallyexpressedunderdroughttreatmentwereidentifiedbyfurtherquantitativereal-timePCRanalysis．Theresultsarediscussedasfo
7、llow：TheRWC，MDAandRELintheleafofA。mongolicusseedlingdidnotchangecomparedwithcontrolundertreatmentof20％PEG6000for1h一72h．After24hdroughtstress，RWCoftherootofA．mongolicusseedlingdecreasedsignificantly,whileMDAandRELincreased。Theprolineaccumulatedabundantlyinbothleavesandrootso
8、fA。mongolicusafter6hdroughtstress．Inthedroughtcondition，theactivitiesofSOD，CATandP
