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《控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查操作規(guī)程.doc》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在應用文檔-天天文庫。
1、文件批準表職責部門及職責姓名簽名日期起草部相關部門審核QA審核質量管理部部門審核部批準質量負責人文件復審日期1目的建立一個控制菌檢查用培養(yǎng)基檢查操作程序。2適用范圍控制菌檢查中用的培養(yǎng)基。檢查項目包括培養(yǎng)基的促生長、指示和抑制特性能力。3發(fā)放范圍質量部4職責責任人職責質量部負責起草執(zhí)行該文件。5內(nèi)容5.1菌種和菌液制備5.1.1控制菌檢查用培養(yǎng)適用性檢查試驗用菌株。大腸埃希菌（Escherichiacoli)[CMCC(B044102]金黃色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)[CMCC(
2、B026003乙型副傷寒沙門菌銅綠假單胞菌(Pseudomonasaeruginosa)[CMCC(B)10104生孢梭菌(Clostridiumsporgenes)[CMCC(B)64941]白色念珠菌Candidaalbicans)[CMCC(B)98001]5.1.2將金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、沙門菌分別接種于胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基中或在胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基上，30-35℃培養(yǎng)18-24小時，將白色念珠菌接種于沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上或沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基中，20-25℃培養(yǎng)2-3天，將
3、生孢梭菌接捉于梭菌增菌培養(yǎng)基中置厭氧條件下30-35℃培養(yǎng)24-48小時或接種于硫乙醇酸鹽液體培養(yǎng)基中30-35℃培養(yǎng)18-24小時。5.2各種培養(yǎng)基需要測試的能力及判斷指標5.2.1液體培養(yǎng)基促生長能力檢查，取不大于100cfu的試驗菌分別接種于被檢查培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中，在相應控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及不大于規(guī)定的最短培養(yǎng)時間下培養(yǎng)。增菌培養(yǎng)基多澄清液體培養(yǎng)基，與對照培養(yǎng)基比較，被檢查培養(yǎng)基中試驗菌應生長良好，表現(xiàn)為液體培養(yǎng)基渾濁。固體培養(yǎng)基促生長能力檢查：取試驗菌液（含菌數(shù)不大于100cfu）分別涂
4、布于被檢查培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基上，在相應控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及不大于規(guī)定的最短時間下培養(yǎng)，與對照培養(yǎng)基比較，被檢查培養(yǎng)基與對照培養(yǎng)基上生長的菌落大小、形態(tài)特征應一致。若被檢查培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)與對照培養(yǎng)基上的菌落數(shù)的比值應在50-200%，且菌落形態(tài)、大小與對照培養(yǎng)基上的菌落一致，則判斷該培養(yǎng)基的適用性檢查促生長能力符合規(guī)定。5.2.2培養(yǎng)基抑制能力檢查：取不少于100cfu的試驗菌分別接種于被檢查培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基，在相應控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及不不小于規(guī)定的最長培養(yǎng)基時間下培養(yǎng)，試驗菌應不得生長
5、。5.2.3液體培養(yǎng)基指示能力檢查：取不大于100cfu的試驗菌分別接種于被檢培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中，在相應控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及不大于規(guī)定的最短培養(yǎng)時間下培養(yǎng)。與對照培養(yǎng)基比較，被檢查培養(yǎng)基中試驗菌應生長情況/指示劑反應等應與對照培養(yǎng)基一致。固體培養(yǎng)基指示能力檢查：取試驗菌液（含菌數(shù)不大于100cfu）分別涂布于被檢查培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基上，在相應控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及不大于規(guī)定的時間下培養(yǎng)，與對照培養(yǎng)基比較，被檢查培養(yǎng)基與對照培養(yǎng)基上生長的菌落大小、形態(tài)特征、菌落顏色及指示劑反應等應一致。5.3控
6、制菌檢查用培養(yǎng)基能力測試列表控制菌檢查涉及的14種培養(yǎng)基特點各異味，表中概述培養(yǎng)基檢查的具體項目，具體操作在其后說明。表1控制菌檢查用培養(yǎng)基的促生長能力、抑制能力和指示特征控制菌的檢查培養(yǎng)基特征試驗菌株腸道菌增菌液體培養(yǎng)基促生長能力大腸埃希菌、銅綠假單胞菌耐明鹽革蘭陰性菌抑制能力金黃色葡萄球菌紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基促生長能力+指示特征大腸埃希菌、銅綠假單胞菌大腸埃希菌麥凱康液體培養(yǎng)基促生長能力大腸埃希菌抑制能力金黃色葡萄球菌麥凱康瓊脂培養(yǎng)基促生長能力+指示特征大腸埃希菌RV沙門菌增菌液體培養(yǎng)基促生長能力
7、乙型副傷寒沙門菌抑制能力金黃色葡萄球菌木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基促生長能力+指示特性乙型副傷寒沙門菌三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基指示能力乙型副傷寒沙門菌溴化十六烷基三甲銨瓊脂培養(yǎng)基促生長能力銅綠假單胞菌抑制能力大腸埃希菌甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基促生長能力+指示特性金黃色葡萄球菌抑制能力大腸埃希菌梭菌增菌培養(yǎng)基促生長能力生孢梭菌哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基促生長能力生孢梭菌沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基促生長能力白色念珠菌沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基促生長能力+指示特性白色念珠菌念珠菌顯色培養(yǎng)基促生長能力+指示能力白色念珠菌抑制能力大腸埃希菌5
8、.4控制菌培養(yǎng)基適用性檢查的具體操作過程：5.4.6木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基：新鮮配制對照木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基，121℃滅菌15分鐘，備用。取含沙門菌的RV沙門增菌液體培養(yǎng)物劃線接種于木糖賴氨酸脫氧膽酸鹽瓊脂培養(yǎng)基平板上30-35℃培養(yǎng)18-48小時，被檢培養(yǎng)基同法操作。培養(yǎng)18小時，被檢培養(yǎng)基菌落大小、形態(tài)特征及顏色應與對照培養(yǎng)基上的菌落一致，培養(yǎng)48小時，空白平板和接種金黃色葡萄球菌的平板應不得生長。5.4
