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1、生理學實驗實驗一神經干動作電位的引導及傳導速度和不應期的測定【實驗目的】1.學習和掌握制備蛙類神經干制作方法。2.①學習使用BL-420生物機能實驗系統(tǒng)引導蛙類坐骨神經干動作電位的方法。②分析神經干動作電位的基本波形、幅值、時程，測定神經興奮的傳導速度和不應期。【實驗原理】神經干動作電位是神經興奮的客觀標志。它是由粗細不等、興奮性不同的神經纖維所組成的，故在神經干表面記錄的動作電位為復合性動作電位。這種電位的幅度在一定范圍內可隨刺激強度的增加而加大。處于興奮部位的膜外電位負于靜息部位，當神經沖動通過后，該處的電位又恢復到靜息水平，這一可擴布的、
2、一過性的電位變化，即動作電位。如果將兩個引導電極分別置于神經干表面，當神經干一端興奮時，興奮波先后通過兩個引導電極處，記錄到兩個方向相反的電位偏轉波形，稱為雙向動作電位?！緦嶒瀸ο蟆矿蛤芑蛲堋緦嶒炂鞑摹客茴愂中g器械（粗剪刀，眼科剪，手術剪，鑷子，探針，蠟盤，玻璃分針，大頭針，）培養(yǎng)皿，神經屏蔽盒，引導線，刺激電極，任氏液，BL-420生物機能實驗系統(tǒng)，廢液缸，張力換能器。【實驗步驟】1.制備坐骨神經腓神經標本 （1）破壞腦脊髓 （2）剪除軀干上部及內臟（3）剝皮及分離下肢 （4）制備坐骨神經-腓神經標本。2.儀器連接（1）開機并啟動BL-420
3、生物機能實驗系統(tǒng)（2）本實驗采用雙通道記錄，將兩對引導電極分別與通道1和通道2連接，刺激電極連接至刺激器輸出接口。 連接方法如見圖：BL-420生物機能實驗系統(tǒng)神經屏蔽盒CH1CH2刺激輸出刺激電極地線C1C2C3C4儀器連接示意圖（3）將坐骨神經—腓神經標本放入神經屏蔽盒（坐骨神經中樞端放在刺激電極上，外周端放在引導電極上）。【實驗項目】1、觀察細胞外引導雙相動作電位的波形特點、測定幅值及時程。2、測定神經干動作電位傳導速度。3、測定不應期：記下第二個動作電位剛消失時的兩個刺激脈沖之間的波間隔，此時的波間隔值即為絕對不應期。用不應期減去絕對不
4、應期即可得出相對不應期【結果分析】1.解釋雙相動作電位產生的機制，記錄動作電位的時程、幅值。(3)2.測定神經干動作電位傳導速度:V=ΔS/ΔT(m/s)。（4）3.動作電位不應期的測量（5）4.刺激強度與復合動作電位幅值的關系（6）【注意事項】1.破壞蟾蜍的腦和脊髓時，應防止其耳后腺及皮膚分泌的蟾酥毒液射入操作者的眼內或污染實驗標本。2.制備神經標本過程中，應避免用手捏神經或鑷子夾傷神經。3.為了防止神經標本干燥，制備過程中需不斷滴加任氏液，使其保持良好的興奮性。4.將神經干放入屏蔽盒之前，用刀片輕刮引導電極，以保證電極和神經干密切接觸。5．
5、制作標本過程中，切勿傷及神經干及其分支，避免牽拉和其它不良刺激，6．實驗過程中，應經常在標本上滴加任氏液以保持濕潤，使其保持良好的興奮性。7．每次刺激標本以后，必須讓肌肉休息1-2分鐘，以防標本疲勞。雙向動作電位傳導速度：動作電位在神經干的傳導速度，可用電生理學方法進行測量。測定神經沖動在神經干上傳導的距離（S）和通過該距離所需時間（t），即可計算出神經沖動的傳導速度(V)，V＝ΔS/Δt。不應期：當雙脈沖的間隔時間為20ms左右時，示波器熒光屏上呈現兩個同樣大小的動作電位。逐漸縮短雙脈沖之間的間隔，第二個動作電位逐漸向第一個動作電位靠近，振幅
6、也隨之降低，最后可因落在第一個動作電位的絕對不應期內而完全消失。刺激強度與復合動作電位幅值的關系一根神經纖維在受到閾值以上刺激產生動作電位不隨著刺激強度增大而增大,但是坐骨神經干是有許多神經纖維組成的,在受到閾值以上刺激時,由于引起不同數目神經纖維產生動作電位,隨著刺激強度增大,神經纖維產生動作電位的數目也越多,動作電位的幅度也就越大,當全部神經纖維都產生動作電位時,動作電位的幅度就不會增大了．故在一定范圍內,坐骨神經干動作電位的幅度為何隨著刺激強度增大而增大．實驗報告要求神經干動作電位引導及其傳導速度和不應期測定一、實驗目的二、實驗器材三、實
7、驗步驟四、實驗結果1.動作電位的時程及幅度2.寫出閾刺激、最大刺激強度；3.相對不應期、絕對不應期4.傳導速度：五、思考題1.雙相動作電位產生機制。2.動作電位隨刺激增大機制，與全或無是否矛盾？
