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1、生化檢驗項目校準瀘州市人民醫(yī)院校準：在規(guī)定條件下，為確定測量儀器(或測量系統(tǒng))所指示的量值，或實物量具(或參考物質(zhì))所代表的值，與對應的由標準所復現(xiàn)的量值之間關系的一組操作。儀器的性能驗證：零點漂移波長準確度及重復性雜散光吸光度正確度吸光度重復性吸光度線性誤差交叉污染率溫度正確度比色杯間差距檢測項目校準參考方法決定性方法廠家方法常規(guī)分析一級標準品二級標準品校準品校準目的是準確度的傳遞溯源校準項目校準主要涉及內(nèi)容校準方法的選擇校準品的選擇及準備校準頻率的選擇校準后的驗證問題討論校準方法的選擇線性線性校準方法需選用1個或多個已
2、知濃度的標準物質(zhì)或校準品，1點線性校準通常被定義為K因子校準，僅空白溶液用于校準；在生化分析儀上最常用的2點線性校準等同于分析化學中的外標2點法，需使用空白溶液和1個已知濃度的校準品。非線性如果測量方法的反應信號與被測量濃度不成線性反應（如免疫分析方法），則應選用非線性校準模式，需涉及3至6個校準品，采用曲線擬合、多項式、對數(shù)等方式建立非線性函數(shù)。K因子法（+-）：理論k值：根據(jù)理論摩爾消光系數(shù)來計算。通常試劑生產(chǎn)廠家給出的k值都屬于。實測K值：是根據(jù)儀器實測的摩爾消光系數(shù)來設置K值校準k值：是根據(jù)儀器當前的實際狀態(tài)，試劑
3、的穩(wěn)定性等通過校準品校準后得到的K值。K因數(shù)法適用的分析方法有一點終點法，兩點終點法，兩點速率法，多點速率法。線性校準（Linear）：其反應為線性（直線），一般只需一個校準品進行校準。非線性法：又稱非直線性校準法非線性法包括logit-log法、指數(shù)函數(shù)法、樣條函數(shù)法等方法Logit-log3p對數(shù)函數(shù)法中的一種，適用于濃度升高而吸光度表現(xiàn)為收束的工作曲線。P表示參數(shù)之意，由3個參數(shù)（S1Abs、k、a）參與計算。S1Abs表示試劑空白，K表示校準所得斜率，a表示近似常數(shù)。logit-log4p對數(shù)函數(shù)法中的一種，適用于
4、濃度升高而吸光度表現(xiàn)為收束的工作曲線。樣條函數(shù)法（spline）：是將每一標準液測定的吸光度連接起來（點對點），形成一個完整曲線，即為曲線擬合。該曲線擬合優(yōu)于折線法校準。logit-logXp與樣條函數(shù)法拋物線型(左下圖)，則多考慮用logic方法擬合。曲線類型不確定時，或校準曲線類型如圖12-37所示的S型非線性校準類型，則多考慮Splain方法擬合。校準品的選擇及準備校準品：含有已知量的欲測物，用以校準該測定方法的數(shù)值，它與該方法、試劑、儀器是相關聯(lián)的。校準品的作用是為了減少或消除儀器、試劑等造成的系統(tǒng)性誤差。最好為人
5、血清基質(zhì)，減少基質(zhì)效應儀器、試劑、校準品的配套性如有可能校準品應溯源到參考方法或參考物質(zhì)要有明確的不確定度冰凍產(chǎn)品的處理步驟：從-70℃或-20℃冰箱中取出樣本，置室溫（18-25）℃下平衡，使之完全融化，溫和混勻。凍干產(chǎn)品的復溶步驟：從冰箱中取出樣本，置室溫（18-25）℃下平衡，并放置在水平桌面上，輕拍小瓶，以確保所有物質(zhì)已沉淀在該小瓶底部，小心拔開膠塞，采用已校準的移液管沿瓶壁緩慢精確加入規(guī)定體積的去離子水，壓膠塞到原位后置室溫下使之完全溶解，溫和混勻。應按廠家提供說明書操作。校準品濃度水平及個數(shù)選擇校準至少包含你需
6、要報告結果的內(nèi)容/范圍。校準范圍也定義為分析方法的工作范圍。個數(shù)要與儀器要求相匹配案例分析一、現(xiàn)象：某品牌HCY試劑（儀器：雅培C8000），校準無法通過，出現(xiàn)“校準失敗”的報警。試劑參數(shù)為：Primarywavelength：340nm；Secondarywavelength：700nm；Mainreadtime：31-33；Blankreadtime：26-28；Samplevolume：10ul；R1reagentvolume：185ul；R2reagentvolume：50ul；Calibrationmethod：
7、Spline；校準品個數(shù)設置：3；濃度分別設置為：0、10、33umol/L。二、了解情況：查看校準結果，發(fā)現(xiàn)其每個濃度的吸光度實際在該儀器上已做出測定，分別為：0：-0.002710：-0.034433：-0.0738，但參與最終結果計算的CalFactor（校準因數(shù)）卻顯示為0，說明該儀器并未通過所測定的吸光度進行曲線擬合，故出現(xiàn)“校準失敗”報警。三、處理：分別對10umol/L、33umol/L的校準品進行對倍稀釋，得到5umol/L、16.5umol/L濃度的校準；把參數(shù)中校準品個數(shù)修改為：5；濃度設置修改為0、5
8、、10、16.5、33umol/L。仍采用Spline定標模式重新進行校準，后校準順利通過，結果如下：0umol/L5umol/L10umol/L16.5umol/L33umol/LCalFactor-87.2-213.5-279.6-365.3吸光度-0.0032-0.0195-0.0366-0.05
