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1、樣品采集一、標(biāo)本采集對(duì)象1、預(yù)警病例：2、醫(yī)學(xué)觀察病例、疑似病例、臨床診斷病例及需要進(jìn)一步研究地確診病例。3、其他需要進(jìn)行診斷或排除者。4、需要采集地環(huán)境標(biāo)本。二、標(biāo)本采集要求1、從事標(biāo)本采集地技術(shù)人員必須經(jīng)過生物安全培訓(xùn)和具備相應(yīng)地實(shí)驗(yàn)技能。在標(biāo)本采集過程中，采集人員必須采取相應(yīng)生物安全防護(hù)。2、住院病例地標(biāo)本由所在醫(yī)院醫(yī)護(hù)人員在當(dāng)?shù)丶部貦C(jī)構(gòu)專業(yè)人員地指導(dǎo)下采集。（人感染高致病禽流感標(biāo)本采集技術(shù)方案）3、標(biāo)本采集具體種類和數(shù)量由現(xiàn)場(chǎng)工作組確定。4、密切接觸者標(biāo)本由當(dāng)?shù)丶部貦C(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)采集。5、結(jié)果不好判斷時(shí)，結(jié)合病程再次采
2、樣。三、標(biāo)本采集種類1、上呼吸道標(biāo)本：包括咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液、深咳痰液、最佳采集時(shí)間為發(fā)病后3天內(nèi)。2、下呼吸道標(biāo)本；包括呼吸道抽取物、支氣管灌洗液、肺組織活檢標(biāo)本。3、尸檢標(biāo)本：病人死后應(yīng)依法盡早進(jìn)行解剖，在嚴(yán)格按照生物安全防護(hù)地條件下進(jìn)行尸檢，主要采集肺、氣管組織標(biāo)本、條件允許下也可采集肝、腎、脾、腦、淋巴結(jié)等組織標(biāo)本。4、血清標(biāo)本：每一病例必須采集血清標(biāo)本。須采集急性期、恢復(fù)期雙份血清。第一份血清應(yīng)盡早（最好在發(fā)病后7天內(nèi)）采集，第二份血清應(yīng)在發(fā)病后第3—4周采集。采集量要求5ml，以空腹血為佳，建
3、議使用真空采血管。5、其他標(biāo)本：如果病例由腹瀉癥狀，可采集糞便標(biāo)本：有胸水者可采集胸水標(biāo)本。淤血點(diǎn)等。四、標(biāo)本采集方法1、咽拭子：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將拭子頭浸入含4～5ml采樣液地管中，尾部棄去，旋緊管蓋。注：亦可將鼻、咽拭子收集于同一采樣管中，以便提高分離率，減少工作量。2、鼻拭子：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入4～5ml采樣液中，尾部棄去，旋緊管蓋。3、鼻咽抽取物或呼吸道抽取物：用與負(fù)壓泵相連的收集器從鼻咽部抽取粘液或從氣管抽取呼吸道分泌物。先將收集
4、器頭部插入鼻腔或氣管，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出。收集抽取的粘液，并用3ml采樣液涮洗收集器1次4、咽漱液：用10ml不含抗菌素的采樣液漱口，漱口時(shí)讓患者頭部微后仰，發(fā)“噢聲”，讓洗液在咽部轉(zhuǎn)動(dòng)。然后，將咽漱液收集于50ml無菌的螺口塑料管中。無條件可用平皿或燒杯收集咽漱液并轉(zhuǎn)入10ml螺口采樣管中。注：取鼻洗液和漱口液時(shí)，需預(yù)先了解患者是否對(duì)抗菌素有過敏史，如有洗液和含漱液中不應(yīng)含有抗菌素。5、深咳痰液：要求病人深咳后，將咳出的痰液收集于50ml含3ml采樣液的螺口塑料管中。6、呼吸道灌洗液：將收集器頭部從鼻口
5、處插入氣管（約30cm）深處，注入5ml生理鹽水，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出。收集抽取的粘液，并用采集液涮洗收集器1次。7、胸水：在B超定位下進(jìn)行胸腔穿刺，抽取胸水5ml，置于無菌的塑料口管中。8、肺組織活檢標(biāo)本：在超聲或X線定位下，經(jīng)皮穿刺取肺組織活檢標(biāo)本，置于含3ml采樣液的塑料螺口管中。9、尸檢標(biāo)本：每一采部位分別使用不同消毒器械，以防交叉污染；每種組織應(yīng)多部位取材，各部位應(yīng)取20—50g，淋巴結(jié)取2個(gè)。10、糞便標(biāo)本：采取5-10g糞便置于含5-10ml采樣液無菌螺口管中，嚴(yán)格密封。11、血清標(biāo)本：用真空
6、負(fù)壓血管采集血液標(biāo)本5ml，室溫靜止30分鐘，1500-2000rpm離心10分鐘，收集血清于無菌螺口塑料管中。12、淤血點(diǎn)：選病人皮膚上的新鮮淤斑或淤血點(diǎn)，消毒后用針頭挑破，擠出組織液，用無菌棉簽蘸取先接種含雙抗的葡萄糖增菌肉湯管中增菌8~12小時(shí)后分離培養(yǎng)或直接接種EPV平板，再涂片染色直接鏡檢。涂片也可做免疫熒光檢查。13、尿液標(biāo)本：取病人急性期尿液5ml加20ml無水乙醇，置4℃2小時(shí)，離心（3000轉(zhuǎn)/分鐘，15分鐘），棄上清，收集沉淀部分加0.25ml磷酸鹽緩沖液將其溶解，同前離心，吸取上清液檢測(cè)腦膜炎奈瑟氏
7、菌（Nm）群特異抗原麻疹、風(fēng)疹：取病人急性期尿液5--10ml于無菌螺口塑料管中。14、腦脊液(CSF)：如果懷疑為腦膜炎，CSF是用于分離和鑒定病原體最好的標(biāo)本。取患者CSF2-3ml，注入無菌的試管內(nèi)。3000轉(zhuǎn)/分，離心20分鐘，用無菌吸管取沉淀物直接接種到10%羊血巧克力色瓊脂平皿上做細(xì)菌培養(yǎng)。CSF沉渣還可涂片，作革蘭氏染色鏡檢。CSF離心后的上清液可置-20℃，供做血清學(xué)檢查腦膜炎奈瑟氏菌（Nm）群特異性抗原。五、采樣液1、普通肉湯2、ph7.4～7.6的Hank’s3、5%水解乳蛋白液。為防止細(xì)菌和真菌生長(zhǎng)
8、，在采樣液中需加入抗菌素，以往抗菌素多用青、鏈霉素（每毫升含青霉素1000單位.鏈霉素100微克），近來發(fā)現(xiàn)不少種類細(xì)菌對(duì)它們具有耐藥性，故近來多用慶大霉素（其終濃度為每ml采樣液中加入0.1m1的l0mg／ml）水解乳蛋白5.0gNaCI0.85g加去離子水100ml高壓滅菌后4度保存4、0.85%生理鹽水六、標(biāo)本
