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1、第5章細(xì)菌的遺傳變異目的要求1、掌握:細(xì)菌基因轉(zhuǎn)移與重組:轉(zhuǎn)化、接合、轉(zhuǎn)導(dǎo)、溶原性轉(zhuǎn)換、原生質(zhì)體融合的概念及機(jī)制。2、熟悉:細(xì)菌的變異現(xiàn)象。細(xì)菌遺傳變異在醫(yī)學(xué)上的意義。遺傳(heredity):子代與親代的生物學(xué)性狀基本相同,且代代相傳。遺傳保證了物種的穩(wěn)定性。變異:子代與親代以及子代與子代之間的生物學(xué)性狀出現(xiàn)差異。變異產(chǎn)生新的物種,有利于物種的進(jìn)化?;蛐妥儺悾ㄟz傳性變異)表型變異(非遺傳性變異)BCG:牛型結(jié)核桿菌(有毒株)膽汁-甘油-馬鈴薯培養(yǎng)13年,230次傳代減毒株(BCG)基因型變異:BCG表型變
2、異:細(xì)菌L型基因型和表型變異的比較基因型變異表型變異基因結(jié)構(gòu)變化未變可逆性不或極少可逆穩(wěn)定性穩(wěn)定不穩(wěn)定環(huán)境影響涉及細(xì)菌數(shù)不受影響受影響個別全體一、形態(tài)結(jié)構(gòu)變異鼠疫耶爾森氏菌→含3%~6%NaCl瓊脂培養(yǎng)→多形態(tài)性(衰退型)第一節(jié)細(xì)菌的變異現(xiàn)象L型變異(細(xì)胞壁缺陷型)生物學(xué)特性:多形性、革蘭陰性、高滲培養(yǎng)、生長緩慢、荷包蛋樣菌落、可回復(fù)A、原細(xì)菌型菌落B、荷包蛋樣L型菌落C、顆粒型L型菌落D、絲狀型L型菌落葡萄球菌絲狀L型菌落葡萄球菌絲狀L型菌落回復(fù)后莢膜變異:肺炎鏈球菌莢膜→體外長期培養(yǎng)→失去莢膜芽胞變異:炭
3、疽桿菌→經(jīng)42℃,10~20天→失去芽胞,毒力減弱鞭毛(H-O)變異:變形桿菌→含10%的培養(yǎng)基上生長→失去鞭毛二、菌落變異(S-R變異)光滑型(S型)——粗糙型(R型)三、毒力的變異毒力降低或消失:如卡介苗毒力增強(qiáng):如白喉棒狀桿菌四、耐藥性變異細(xì)菌對某種抗菌藥物由敏感變?yōu)槟褪?。第二?jié)細(xì)菌的遺傳物質(zhì)1、細(xì)菌的染色體:環(huán)狀、dsDNA。相對較?。?.2×106bp,4000個基因復(fù)制快:105bp/min無組蛋白,無內(nèi)含子,為連續(xù)基因單倍體:突變后更易表現(xiàn)2、質(zhì)粒(plasmid):細(xì)菌染色體外的遺傳物質(zhì),環(huán)狀
4、閉合的雙股DNA。可編碼許多重要的生物學(xué)性狀。質(zhì)粒DNA的特性具有自我復(fù)制能力緊密型質(zhì)粒;松弛型質(zhì)粒質(zhì)粒能編碼某些特定性狀可自行丟失與消除可在細(xì)菌間轉(zhuǎn)移。分相容性與不相容性兩種種類致育質(zhì)?;蚍QF質(zhì)粒結(jié)合耐藥性質(zhì)??煞譃榻雍闲阅退庂|(zhì)粒(R質(zhì)粒)和非接合性耐藥質(zhì)粒。耐藥毒力質(zhì)?;騐i質(zhì)粒編碼與該菌致病性有關(guān)的毒力因子。毒力細(xì)菌素質(zhì)粒編碼各種細(xì)菌產(chǎn)生的細(xì)菌素。細(xì)菌素代謝質(zhì)粒編碼產(chǎn)生與代謝相關(guān)的許多酶類3、轉(zhuǎn)座因子是細(xì)菌基因組中能改變自身位置的一段DNA序列,這種轉(zhuǎn)座作用可發(fā)生在染色體、質(zhì)粒上或染色體與質(zhì)粒之間。分類
5、(1)插入序列(insertionsequence,IS):750~1550bp兩端重復(fù)序列,與插入有關(guān)中心序列有轉(zhuǎn)位酶基因(2)轉(zhuǎn)座子(transposon,Tn):2000~25000bp兩端為IS中心序列有與轉(zhuǎn)位無關(guān)基因如:毒素基因、耐藥基因等ISISResistanceGene(s)常見的插入序列和轉(zhuǎn)座子ISbpTn耐藥或毒素基因IS1768Tn1AP(氨芐青霉素)IS21327Tn6Kan(卡那霉素)IS31300Tn10Tet(四環(huán)素)IS41426Tn551Em(紅霉素)IS51195Tn681
6、E.coliET(腸毒素)4、整合子(integron,In):是一種運(yùn)動性DNA分子,具有獨(dú)立結(jié)構(gòu)可捕獲和整合外源性基因,使之轉(zhuǎn)變成為功能性基因表達(dá)單位。定位于細(xì)菌染色體、質(zhì)粒或轉(zhuǎn)座子上基本結(jié)構(gòu):兩端為保守末端,中間為可變區(qū),含一個或多個基因盒整合子含有3個功能元件:重組位點(diǎn);整合酶基因;啟動子通過轉(zhuǎn)座子或接合性質(zhì)粒,使多種耐藥基因在細(xì)菌中進(jìn)行水平傳播5、噬菌體基因組:形態(tài)結(jié)構(gòu):蝌蚪形衣殼:蛋白質(zhì)核酸:dsDNA分布廣:有菌就有噬菌體宿主特異性:流行病調(diào)查;分型參與細(xì)菌變異:轉(zhuǎn)導(dǎo),溶原性轉(zhuǎn)換基因轉(zhuǎn)移(gen
7、etransfer):外源性遺傳物質(zhì)由供體菌轉(zhuǎn)入某受體菌內(nèi)的過程?;蛑亟M(generecombination):轉(zhuǎn)移的基因與受體菌DNA整合在一起的過程。供體菌(donor);受體菌(recipient)第三節(jié)基因的轉(zhuǎn)移和重組一、轉(zhuǎn)化(transformation):供體菌游離的DNA片段被受體菌直接攝取,使受體菌獲得新的性狀。*條件:受體菌與供體菌DNA有同源性。感受態(tài):受體菌能攝取外源DNA片段的生理狀態(tài)。感受態(tài)一般出現(xiàn)在細(xì)菌對數(shù)生長期的后期,持續(xù)時間約3~4小時。小鼠體內(nèi)肺炎鏈球菌的轉(zhuǎn)化試驗轉(zhuǎn)化因子(
8、transformingprinciple)在轉(zhuǎn)化過程中,轉(zhuǎn)化的DNA片段稱為轉(zhuǎn)化因子,分子量小于107,最多不超過10~20個基因。感受態(tài)(competence)二、接合(conjugation):細(xì)菌通過性菌毛,將遺傳物質(zhì)從供體菌轉(zhuǎn)移給受體菌的過程。F質(zhì)粒(fertilityfactor,致育因子)接觸:細(xì)胞質(zhì)溝通轉(zhuǎn)移:F質(zhì)粒進(jìn)入F-菌,1分鐘完成復(fù)制:F-菌轉(zhuǎn)為F+菌Hfr(高頻重組菌株):F