花豇豆中黃酮的提取工藝研究.pdf

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1、理論·實踐花豇豆中黃酮的提取工藝研究劉茜(廣東環(huán)境保護(hù)工程職業(yè)學(xué)院，?廣東?佛山?528216)摘要：以花豇豆為原料，采用浸提法提取其抗氧化成分黃酮，改變影響提取率的4個因素：乙醇濃度，料液比，水浴溫度，浸提時間。利用Fenton反應(yīng)測定溶液吸光度，比較其清除羥自由基率，找出提取花豇豆中黃酮的最佳提取方法。實驗結(jié)果表明：最佳提取工藝條件為乙醇的體積分?jǐn)?shù)為60%；料液比為1∶20；提取溫度為70℃；提取時間為105min。關(guān)鍵詞：花豇豆；黃酮；浸提法0引言銹鋼托盤上，自然晾干，用粉磨機將花豇豆粉碎，然后過4

2、0目篩，將粉末至于烘箱內(nèi)于40℃下干燥5h，置于棕色試劑瓶中避食用豆類不僅是重要的糧食資源之一，還含有多種生物活[1]光保存。性物質(zhì)，其中含有多種維生素，礦物質(zhì)以及黃酮類化合物。[2-6]1.3.2乙醇濃度對提取率的影響天然抗氧化劑普遍取自天然可以食用的原料中，由于天然抗氧化劑具有安全，無毒等優(yōu)點而引起人們的關(guān)注。尋找稱取花豇豆粉末2.000g，放于150mL的圓底燒瓶中，分別加入40mL的40%，50%，60%，70%，80%，95%的乙醇溶液，料高效，天然抗氧化劑符合現(xiàn)代人的健康需要，極具開發(fā)價值。液

3、比為1∶20。置于回流裝置中回流45min，設(shè)置水浴溫度為黃酮類化合物是植物界廣泛存在的成分之一，常作為植物80℃。冷卻后減壓抽濾，移取上層清液測定其羥自由基清除率。藥的有效成分存在，廣泛存在于植物的次級代謝產(chǎn)物中，具有抗癌、抗衰老、抗炎、降血糖、降血壓、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌等多種功能，1.3.3料液比對提取率的影響還可有效清除羥自由基等活性氧組分，是一類具有廣泛開發(fā)前稱取花豇豆粉末2.000g，放于150mL的圓底燒瓶中，分別景的天然抗氧化劑[7]。加入20mL，40mL，60mL，80mL，100mL的60%乙

4、醇溶液，即料液比為：1∶10，1∶20，1∶30，1∶40，1∶50。置于回流裝置浸提法是黃酮類化合物提取中較常用的一種提取法。浸提中回流45min，設(shè)置水浴溫度為80℃。冷卻后減壓抽濾，移取上法主要依據(jù)各種黃酮類化合物的極性、溶解性不同，從而使其層清液測定其羥自由基清除率。分離出，是黃酮類化合物的一種初級分離法。1.3.4水浴溫度對提取率的影響1實驗部分稱取花豇豆粉末2.000g，放于150mL的圓底燒瓶中，加入1.1材料與試劑60mL60%乙醇溶液，置于回流裝置中回流45min，設(shè)置水浴溫材料：花豇豆

5、(市售)度為60℃，70℃，80℃，90℃，95℃，冷卻后減壓抽濾，移取上層試劑：95%乙醇(開封市芳晶化學(xué)試劑有限公司)；清液測定其羥自由基清除率。FeSO4·7H2O(天津市凱通化學(xué)試劑有限公司)；30%過氧化氫1.3.5浸提時間對提取率的影響(天津市永大化學(xué)試劑開發(fā)中心)；水楊酸(天津市博迪化工股稱取花豇豆粉末2.000g，放于150mL的圓底燒瓶中，加份有限公司)；以上試劑均為分析純。入60mL60%乙醇溶液，置于回流裝置中回流15min，45min，1.2儀器與設(shè)備75min，105min，13

6、5min，設(shè)置水浴溫度為70℃，冷卻后減壓抽濾，移取上層清液測定其羥自由基清除率。新苗電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱(上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司)；KM快速研磨機(湘潭湘儀儀器有限公司)；8411電動1.4羥自由基清除實驗振篩機(湘潭湘儀儀器有限公司)；電子分析天平(上海越平科實驗體系中，過氧化氫在亞鐵離子作用下生成羥自由基，學(xué)儀器有限公司)；數(shù)星HH-2恒溫水浴鍋(金壇市杰瑞爾電向體系中加入水楊酸捕捉羥自由基，同時產(chǎn)生在可見光區(qū)有特器有限公司)；SHZ-D(Ⅲ)循環(huán)水式真空泵(鞏義市予華儀器征吸收的紫色產(chǎn)物。在反

7、應(yīng)體系中加入抗氧化物質(zhì)，與水楊酸有限責(zé)任公司)；UV-754型紫外可見分光光度計(上海精密科競爭捕捉羥自由基，使生成的紫色產(chǎn)物減少，溶液的吸光度發(fā)學(xué)儀器有限公司)。生改變。通過比較實驗組與空白組反應(yīng)溶液吸光度的變化評價[8]受試物的抗氧化活性。1.3黃酮的提取黃酮提取液清除羥自由基(·OH)實驗在試管中依次加1.3.1花豇豆的預(yù)處理入0.5mL水楊酸-乙醇溶液(9.1mmol/L)，0.5mL的黃酮提將花豇豆用自來水洗凈，然后用蒸餾水洗3遍，平鋪于不2+取液，0.5mLFe溶液(9mmol/L)，3.5m

8、L蒸餾水，最后加入202

9、2015年12月5.0mLH2O2(88mmol/L)啟動反應(yīng)，搖勻后于510nm處測定吸由表3可看出，當(dāng)溫度為70℃時，羥自由基清除率最高，其2+光度A1；取0.5mL的蒸餾水代替Fe溶液所測得的吸光度為黃酮提取率最高。A2；取0.5mL蒸餾水代替黃酮提取液所測得的吸光度為A3，均2.1.4浸提時間的影響[18]重復(fù)5次，按下式計算羥自由基(·OH)的清除率P(%)。表4不同浸提時間反應(yīng)后提取液的吸