線粒體ATP敏感鉀通道對高氧誘導(dǎo)人肺泡上皮細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用.pdf

《線粒體ATP敏感鉀通道對高氧誘導(dǎo)人肺泡上皮細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用.pdf》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。

1、．本研究基金來源：四川省教育廳科研項(xiàng)目基金(編號：08ZAl50-033)四川省衛(wèi)生廳科研基金(編號：90191)h’’l線粒體ATP敏感鉀通道對高氧誘導(dǎo)高氧誘導(dǎo)人肺泡上皮細(xì)胞亡的的保護(hù)作用??????????????11．1中文摘要?????????????????????11．2英文摘要?????????????????????31．3前言???????????????????????61．4材料與方法????????????????????81．5結(jié)果??????????????．．：．??????

2、??151．6討論???????????????????????231．7結(jié)論???????????????????????331．8參考文獻(xiàn)?????????????????????341．9英漢縮略詞對照表???’??????????????4l2致謝???????????????????????423新生兒高氧肺損傷的肺修復(fù)機(jī)制與保護(hù)策略(綜述)4攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表和撰寫的論文?????????53、瀘州醫(yī)學(xué)院研究生碩士論文線粒體ATP敏感鉀通道對高氧誘導(dǎo)人肺泡上皮細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用。摘要目的：探

3、討線粒體ATP敏感鉀通道(mitochondrialATP．sensitivepotassiumchannel,mitoKATP)對高氧誘導(dǎo)人肺泡上皮細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用。方法：以人肺泡上皮A549細(xì)胞為研究對象，體外傳代培養(yǎng)A549細(xì)胞系。以3L／min的900ml／L氧氣和50ml／L二氧化碳高純混合氣作為攻擊因素處理A549細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)將A549細(xì)胞共分為三組：對照組(n=8)、高氧組(n-8)，二氮嗪組(n-8)。對照組：加入含100mL／L胎牛血清培養(yǎng)液常規(guī)培養(yǎng)；高氧組：加入等量含IOOmL／L胎牛

4、血清培養(yǎng)液，換液后，通入3L／min的90％氧氣和5％二氧化碳高純混合氣10min，密閉培養(yǎng)；二氮嗪組：用終濃度為lOOpmol／L的等量二氮嗪培養(yǎng)液預(yù)處理24h后，再用高氧誘導(dǎo)A549細(xì)胞，密閉培養(yǎng)12、24、48h收集細(xì)胞指標(biāo)檢測如下指標(biāo)：倒置相差顯微鏡下觀察A．549細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變并照相；CCK．8法檢測A549細(xì)胞活力；流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡；免疫組化法檢測細(xì)胞內(nèi)Omi／HtrA2的表達(dá)；激光共聚焦顯微鏡檢測線粒體膜電位變化：透射電鏡法檢測細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化。結(jié)果：(1)倒置顯微鏡下：對照組細(xì)胞

5、貼壁良好，呈鋪路石樣，為扁圓的多角形，細(xì)胞排列緊密，連接成片，數(shù)量多，懸浮細(xì)胞少，分裂相多。高氧組細(xì)胞受損明顯，形態(tài)改變，由典型的扁圓多角形細(xì)胞變?yōu)閳A形或橢圓形，‘細(xì)胞間空隙加大，連接松散，活細(xì)胞數(shù)量明顯降低，懸浮細(xì)胞明顯增多；二氮嗪組細(xì)胞損傷狀況明顯得到改善，細(xì)胞生長狀況明顯好轉(zhuǎn)，形態(tài)明顯瀘州醫(yī)學(xué)院研究生碩士論文變好，較高氧組活細(xì)胞數(shù)量增加，懸浮細(xì)胞數(shù)減少，但未恢復(fù)到對照組水平；(2)與對照組(O．34士0．03)H5，高氧組細(xì)胞活力(O．13士0．02)下降(P

6、活力(O．21士0．04)增加，但未恢復(fù)至對照組水平(P

7、07)flfJ顯降低，差異有顯著性儼

8、核小，圓形，胞質(zhì)電子密度較高，線粒體呈空泡狀，線粒體嵴減少。結(jié)論：二氮嗪可能通過穩(wěn)定線粒體膜電位，減少Omi／HtrA2表達(dá)，從而減少A549細(xì)胞凋亡來明顯減輕高氧誘導(dǎo)的人肺泡上皮細(xì)胞的損傷。關(guān)鍵詞：高氧，肺損傷；A549：二氮嗪，線粒體ATP敏感鉀通道；凋亡：Omi／HtrA2瀘州醫(yī)學(xué)院研究生碩士論文TheProtectionEffectsandMechanismsofMitochondrialATP··sensitiveP