細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中的關(guān)鍵因素.doc

《細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中的關(guān)鍵因素.doc》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。

1、細(xì)胞培菲技術(shù)中的關(guān)鍵伏I索一細(xì)胞操作功夫在手！一、準(zhǔn)備工作對升展細(xì)胞培養(yǎng)異常蟲要，推備工作中某一環(huán)節(jié)的疏忽可導(dǎo)致實驗失敗或無法進(jìn)行"爪備工作的內(nèi)容包括器皿的淸洗、干燥與消毒,培養(yǎng)基與其他試劑的饑制、分裝及滅菌?無菌室或超掙臺的淸沽與洎潯，培養(yǎng)箱及戲他儀器的檢杳與調(diào)試等.1?清潔、消海、液體宜接接臟細(xì)胞的用品要超凈處理——無非必須分子直接接觸細(xì)胞的用品要徹底消除微生物超掙和消得過的樣品要絕對密閉保存，標(biāo)記消得時間實驗室保持沽掙，隨時涓毒盡量釆用商品化一次性用品操作者也要淸潔和消褂緩沖液要符合生理滲透壓(280

2、~310mOsni)和pH(7.2-7.4)2玻璃器皿超掙去污劑煮沸30min(超聲波怨蕩30min)溫水刷洗流水沖洗酸性洗滌液浸泡流水沖洗蒸脩水沖洗純水漂洗在沽凈沿箱中烤于密封消帶3?消壽汗熱一股璃器Jill160C.120min濕熱(高壓，120'C)10?20磅，20-30min紫外線一氣消再劑場而微孔過濾液體0?22um、0.45um二、細(xì)胞生長的條件和培養(yǎng)基要求:選擇合適的培養(yǎng)基.保證全過程的無菌細(xì)胞的營養(yǎng)需要:飆基觀、維生素、碳水化合物、無機(jī)離子、蛋白質(zhì)、促生長因子。其中很多成分系用血清、胚胎浸

3、出液等提供,在很多諸況下還需加入10%的胎?；蛐律Ｑ獪[。培養(yǎng)基的制備：a.?濃度要卅一浚透壓、b?酸幅度要適宜一酸度計細(xì)胞的生存環(huán)境：a..溫度、b?氣相、c?滲透壓一一290mmol/L三、實臉者的操作技術(shù)細(xì)胞操作功夫在手！