辣椒多態(tài)性EST-SSR標(biāo)記開發(fā)及連鎖圖譜構(gòu)建.pdf

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1、第38卷第2期湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)V_01.38No.22012年4月JournalofHunanAgriculturalUniversity(NaturalSciences)Apr.2012D0I:10.3724/SP.J.1238.2012.00162辣椒多態(tài)性EST—SSR標(biāo)記開發(fā)及連鎖圖譜構(gòu)建劉峰la,3,謝玲玲,歐陽(yáng)嫻h,王運(yùn)生,一,鄒學(xué)校h(1.湖南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院a.蔬菜研究所;b.西瓜甜瓜研究所,湖南長(zhǎng)沙410125;2.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)生物安全科學(xué)技術(shù)學(xué)院,湖南長(zhǎng)沙410128;3.中國(guó)農(nóng)業(yè)

2、科學(xué)院蔬菜花卉研究所,北京100081)摘要:采用SSR檢索程序,從辣椒221037條unigenes中篩選到17319個(gè)SSR位點(diǎn),設(shè)計(jì)了10468對(duì)引物,并對(duì)其進(jìn)行E—PCR多態(tài)性檢測(cè)。結(jié)果表明,1538對(duì)引物具有多態(tài)性,其中554條辣椒EST序列能匹配到番茄基因組上,構(gòu)成了12條辣椒EST—SSR連鎖群,平均每條連鎖群含45.75個(gè)EST—SSR。對(duì)匹配到番茄基因組上的EST—SSR進(jìn)行GO(geneontology)分類,結(jié)果有481條EST序列被分類,其中以初生代謝、細(xì)胞代謝、生物合成過程為主,分別占

3、34.13%、28.35%、25.82%。在KEGGmap中,91條EST序列共涉及到76條代謝途徑(I~GG),約67條序列參與新陳代謝途徑,32條序列參與次生代謝產(chǎn)物合成途徑。關(guān)鍵詞:辣椒;多態(tài)性;連鎖圖譜;表達(dá)序列標(biāo)簽技術(shù);簡(jiǎn)單重復(fù)序列中圖分類號(hào):$641.3文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A文章編號(hào):1007—1032(2012)02—0162—06DevelopmentofpepperEST-SSRsandanSSR-basedlinkagemapLIUFeng,。,XIELing1ing,OUYANGXian,WANG

4、Yun—sheng’。,ZOUXue—xiao(1.a(chǎn).InstituteofVegetables;b.InstituteofWatermelonandMuskmelon,HunanAcademyofAgriculturalSciences,Changsha410125,China;2.CollegeofBio—SaltyScienceandTechnology,HunanAgriculturalUniversity,Changsha410128,China;3.InstituteofVegetablesand

5、FlowersChineseAcademyofAgriculturalSciences,Beijing100081,China)Abstract:Inthisstudy,17319SSRswereidentifiedfrom221037ESTsofpepperusingSSRfindingsoft.Atotalof10468primerpairsweresuccessfullydesignedand1538primerpairsexhibitedpolymorphismbyE—PCR.Amongthepolym

6、orphicprimer—containingESTs,554ESTscontainingSSRmotifswerematchedontothetomatogenome,forming12linkagegroupswithanaverageof45.75makerspergroup.AnalysisofGO(geneontology)showedthat481ESTswereclassifiedmainlytobeinvolvedinprimarymetabolicprocess,cellularmetabol

7、icprocessandbiosyntheticprocess.IntheKEGGmap,91ESTswereinvolvedin76pathways(KEGG),67ESTstookpartinmetabolicpathwaysand32participatedinbiosynthesisofsecondmetabolites.Keywords:pepper;polymorphism;linkagemap;expressedsequencetags(EST);simplesequencerepeats(SSR

8、)目前,DNA分子標(biāo)~E(SSR、RAPD、AFLP、RFLP)含SSR基序的EST序~(EST—SSR)在玉米、大豆、水已成為遺傳變異分析和作物分子輔助育種研究的重稻、小麥等作物中已被大量開發(fā),并應(yīng)用于遺傳圖要工具_(dá)lJ。SSR(simplesequencerepeats)分子標(biāo)記由譜構(gòu)建和遺傳多樣性分析【4]。于具有信息量高、多等位性、共顯l生、結(jié)果穩(wěn)定等特辣椒(Capsicuma

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