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《去分化來源表皮干細胞與在體表皮干細胞之間的差異分析》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、·17·感染、炎癥、修復2010年3月第11卷第1期·論著·去分化來源表皮干細胞與在體表皮干細胞之間的差異分析孫曉艷付小兵劉惠玲(解放軍總醫(yī)院基礎醫(yī)學研究所，北京100853)【摘要】目的：比較去分化來源的表皮于細胞與在體表皮干細胞之間的異同點。方法：采用堿性成纖維細胞誘導因子(bFGF)誘導表皮細胞去分化形成表皮干細胞；由人包皮分離、培養(yǎng)在體表皮干細胞。采用免疫細胞化學染色法、流式細胞檢測技術(shù)、細胞染色體核型檢測技術(shù)及逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈式反應法(RT-PCR)觀察去分化來源的表皮干細胞與在體表皮干細胞之間細胞表面標志蛋白表達、細胞亞群及染色體核型等方面
2、的差異。結(jié)果：免疫細胞化學染色結(jié)果表明，去分化來源的表皮干細胞能夠表達表皮干細胞及其亞群特異性的表面標志蛋白，如融整合素、角蛋白19(CK19)、CK14等，而CKlO的表達為陰性。流式細胞技術(shù)檢測結(jié)果顯示去分化來源的表皮干細胞及在體表皮干細胞中％葉。CD71一、qCD71及CD71表達陽性的細胞亞群分別占被檢測細胞總數(shù)的22．8、68．14、0及45．39、33．110／0、0．02細胞染色體核型檢測分析結(jié)果顯示去分化來源的表皮干細胞與在體表皮干細胞的染色體均為23對、46條，核型正常。此外，RT-PCR檢測結(jié)果表明去分化來源的表皮干細胞與在體表皮干
3、細胞中融整合素、CK19、CK14及CK10的mRNA表達水平差異無顯著性。結(jié)論：去分化來源的表皮干細胞和在體表皮干細胞之間存在著細胞亞群的分布差異，提示其具有更強的增殖能力；二者在細胞核型和表面標志蛋白表達等方面具有相似性。去分化來源的表皮干細胞可以作為表皮干細胞的替代細胞應用于皮膚重建與再生的相關研究。關鍵詞表皮干細胞去分化免疫細胞化學流式細胞檢測RT—PCRComparisonbetweenindigenousepithelialstemcellsandinducedepidermalstemcellsbydedifferentiationofe
4、pithelialcellsSunXiaoyan，F(xiàn)uXiaobing，LiuHuiling．InsitituteofBasicMedicalScience，ChinesePIAGeneralHospital，Beijing100853，ChinaCorresp0ndingauthor：FuXiaobing(E-mail：fuxb@cgw．net．cn)Abstract0bjective：Toinvestigatethedifferencebetweenindigenousepithelialstemcellsandthoseinducedfromde
5、differentiationofepithelia1cellswithbasicfibroblastgrowthfactor(bFGF)，andlookforapossibilitytousededifferentiatedinducedepiderma1stemcells(iESCs)inwoundrepairandregenerationofskintissues．Meth-ods：Humanepidermalkeratinocytes(HEKs)werecultivatedandinducedtOreversetheirdifferentiat
6、edprocessandproduceimmature，stem-likecells(dediferentiationinducedepidermalstemceils，iESCs)bybFGFinvitro．Indigenousepidermalstemcells(ESCs)wereisolatedfromhumanforeskinandcultured．Immunochemicalstai—ning，flowcytometricanalysis，karyotypeanalysisandreversetranscription-polymerasec
7、hainreaction(RT—PCR)analysiswereusedtOdetectthedifferencesintheexpressionofmarkerprotein，subpopulationandkaryotypebe-tweeniESCsandESCs．Results：ImmunocytochemicalanalysisprovedthatiESCswerepositivefor131integrin。ker-atin19(CK19)andCK14。yetnegativefortheexpressionofCK10，theestabli
8、shedmarkersofdifferentiatedcells．Flowcytometric
