羅丹明B最新檢測(cè)方法.doc

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1、羅丹明B最新檢測(cè)方法下載?羅丹明B檢測(cè)套裝：固相萃取柱：HiCapt羅丹明B專用柱(500mg/6mL，訂貨號(hào)：25-05006)液相色譜柱：HisepC18-T?150mm×4.6mmi.d.,5μm（訂貨號(hào)：0246150）羅丹明B又稱玫瑰紅B,是一種具有鮮桃紅色的人工合成的染料。曾經(jīng)用作食品添加劑，但后來實(shí)驗(yàn)證明羅丹明B會(huì)致癌，現(xiàn)在已不允許用作食品染色。然而,仍有不少食品生產(chǎn)企業(yè)將其作為食用色素。因此，建立快速可靠的檢測(cè)方法非常重要。維泰克科技成功開發(fā)了羅丹明B專用SPE柱，建立了羅丹明B的快速檢

2、測(cè)方法和實(shí)驗(yàn)室液相色譜檢測(cè)方法，該方法快速、簡(jiǎn)單、溶劑用量少，回收率穩(wěn)定重現(xiàn)，克服了傳統(tǒng)方法中氧化鋁固相萃取柱活性不易控制，方法回收率難以保證等缺陷。?方法的優(yōu)勢(shì)：·專利創(chuàng)新的羅丹明B專用萃取填料，有效去除食品中的天然色素和植物油等雜質(zhì)干擾·回收率穩(wěn)定、重現(xiàn)，克服了傳統(tǒng)方法中氧化鋁活性不穩(wěn)定的缺陷·方法簡(jiǎn)單、快速、節(jié)省溶劑現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)1.樣品提?。?.1?辣椒粉?取辣椒粉一小勺（約1g）放入10mL離心管中，加入6mL提取液（乙酸乙酯/環(huán)己烷（1:1，v/v）），渦混1分鐘，靜置，待上層液較為清澈，取上

3、清液3mL，準(zhǔn)備過SPE柱。1.2?辣椒油?取辣椒油一小勺（約0.5g）放入5mL離心管中，加入3mL提取液（乙酸乙酯/環(huán)己烷（1:1，v/v）），渦混1分鐘，準(zhǔn)備過SPE柱。2.過固相萃?。⊿PE）柱：HiCapt羅丹明B專用SPE柱（500mg/6mL）將1.1或1.2中準(zhǔn)備的樣品慢慢倒入小柱中，然后取3mL甲醇慢慢倒入小柱，含羅丹明B的樣品在柱上部會(huì)出現(xiàn)紅色條帶，在紫外燈照射下為顏色明亮的桃紅色熒光色帶，條帶邊緣清晰，粉紅色隨含量的增加而加深和加寬，不含或者含量極低（低于0.1μg/g，羅丹明B的

4、著色下限）的羅丹明B的樣品，提取液不會(huì)出現(xiàn)粉紅色條帶。發(fā)現(xiàn)羅丹明B的陽(yáng)性樣品需進(jìn)行液相色譜實(shí)驗(yàn)確證。?液相色譜檢測(cè)方法1實(shí)驗(yàn)部分1.1液相色譜條件色譜柱：HiSepC18（4.6mmX15cm，5μm）流動(dòng)相：甲醇/20mM甲酸銨溶液(用甲酸調(diào)pH2.5)=7/3(v/v)流速：1mL/min??????????????????????????進(jìn)樣量：20μL檢測(cè)器:紫外UV/VIS）檢測(cè)器?????????????檢測(cè)器波長(zhǎng)：550nm1.2標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制稱取50mg羅丹明B于50mL棕色容量瓶，用甲

5、醇定容，即為1mg/mL。接著取母液500μL于50mL棕色容量瓶，用提取液（乙酸乙酯/環(huán)己烷（1:1，v/v））稀釋到50mL，即為10μg/mL，作為儲(chǔ)備液于4℃避光保存，且每周重新配制。每天所用的溶液是將儲(chǔ)備液稀釋為0.2-5μg/mL。1.3樣品前處理1.3.1樣品提?。?.3.1.1辣椒粉?取辣椒粉1.0g，放入10mL離心管中，加入6mL的提取液（乙酸乙酯/環(huán)己烷（1:1，v/v）），渦混1分鐘，超聲10分鐘，接著10000r/min離心5分鐘，取上清液3mL，準(zhǔn)備過SPE柱。?1.3.1.

6、2辣椒油?取辣椒油0.5g，放入5mL離心管中，加入3mL的提取液（乙酸乙酯/環(huán)己烷（1:1，v/v）），渦混1分鐘，準(zhǔn)備過SPE柱。1.3.1.3臘腸、果脯等食品將食品切成小丁，再稱取1.0g,放入10mL離心管中，然后步驟同2.3.1.1。1.3.2固相萃取柱凈化：HiCapt羅丹明B專用柱(500mg/6mL)（1）活化：在HiCapt羅丹明B專用柱中依次加入2mL提取液（乙酸乙酯/環(huán)己烷（1:1，v/v））活化。（2）萃?。簩⒋齼艋杭尤胫?，再用200μL提取液（乙酸乙酯/環(huán)己烷（1:1））淋

7、洗樣品管，一并加入SPE柱中，讓其自然地流過萃取柱。流出液棄去。（3）清洗：待上樣液完全流出后，用3mL甲醇淋洗，淋洗液棄去。（4）解吸：3mL5%氨水的甲醇溶液解吸，用5mL的小樣品管收集解吸液。（5）吹干及定容：解吸液50℃氮?dú)獯蹈?，加?00μL流動(dòng)相溶解并定容。2結(jié)果與討論2.1標(biāo)準(zhǔn)曲線與檢出限將10μg/mL的羅丹明B儲(chǔ)備液用流動(dòng)相逐級(jí)稀釋，配制1、0.5、0.2、0.1、0.05μg/mL標(biāo)準(zhǔn)溶液，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。由表1可見，羅丹明B的線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)的平方為0.99999。以性噪比的3

8、倍和10倍分別計(jì)算檢出限（LOD）和定量限(LOQ),分別為16ng/g和53ng/g。表1線性回歸方程、LOD及LOQ分析物線性范圍線性回歸LOD[ng/g](S/N=3)LOQ[ng/g](S/N=10)abr2羅丹明B0.05-2237178.95-1088.020.999991653*y=ax+b,y=peakarea,x=massconcentration[μg/mL]2.2回收率和精密度分別加入低、中、高3種質(zhì)量濃度的羅丹明B標(biāo)